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増刊号これだけは知っておきたい検査のポイント　第9集臨床検査の標準化

臨床検査値のJCCLS共用基準範囲とその利用

著者：康東天

ページ範囲：P.10 - P.13

　血液検査などの検体検査データは患者の診断や治療の決定に必須の客観的な医学的情報である．その重要な指標の1つが基準範囲であるが，その設定や利用においては，多くの施設で異なった方法が取られ統一されていないのが現状である．少数の基準個体データに基づき，求められた施設固有の基準範囲，試薬メーカーの推奨値，委託先衛生検査所の値，論文や教科書の値などがある．そのような理由から，検査の標準化が進んだ項目でも，管理血清試料に対して同じ測定値を正しく出している施設間で使用されている基準範囲が大きくばらついている現状がある（図1）．
　近年の医療の分業体制の進行とともに，医療の地域連携が重要視され，個人を生涯にわたって健康管理できる医療システムの構築が模索されている．また，現在の疫学研究では10万人規模の集団を10年以上にわたって追跡することも稀ではない．このように，患者の診療においても臨床研究においても，臨床検査データは時間的空間的にますますビッグデータとして蓄積されようとしている．これらの臨床検査情報を正確かつ有効に利用するためには，検査値の時間的空間的比較性の保証とその判断基準の統一が必須である．

臨床検査の精度管理

著者：細萱茂実

ページ範囲：P.14 - P.17

臨床検査のクオリティマネジメント
　臨床検査の精度管理は，測定法の誤差管理が主体であった．今日では分析の前後過程を含む臨床検査のあらゆる段階を範疇とするクオリティマネジメント（quality management：QM）に発展している．
　検査室内の測定法の管理を内部精度管理（internal quality control：IQC），測定値の施設間差の評価・管理を外部精度評価（external quality assessment：EQA），分析の前後過程の管理や標準化を含めた総合的な概念を精度保証（quality assurance：QA）とする．さらに，検査室運営にかかわる実際上の要因の良質な検査管理業務（good laboratory practice：GLP）を含めQMとして全体が構成される．なお，検査室間比較による精度評価を技能試験（proficiency testing：PT）と言うこともある（図1）¹⁾．

臨床検査室の第三者認定

著者：久保野勝男

ページ範囲：P.18 - P.21

　医療機関は高度で複雑な判断が求められており，医師の指示の下に行われる臨床検査の結果は，診断，治療方針の決定，予後推定に重大な影響をもつ．したがって，臨床検査室は「精確な（accurate）結果」を提供する能力が問われるほか，検査室自身の組織運営の独立性も求められる．
　経済のグローバル化が進むなかで，臨床検査を含む医療領域も世界経済の仕組みのなかで同様な動きが活発化している．欧州諸国など陸続きの国だけではなく，今や患者さんや検体は国境を超えて移動しており，臨床検査や医療の標準化への動きとともに，医療規制の国際的な整合化が求められている．

コンパニオン診断薬／コンパニオン診断検査の現状と課題

著者：登勉

ページ範囲：P.22 - P.25

　従来の臨床検査に求められていた「病態を診断するための検査」に加えて，「治療選択のための検査」が日常診療で重要になってきている．2003年に国際ヒトゲノム計画が完了して以降，病態がゲノムレベルで解明されるようになった．癌分野では，癌の増殖・進展に不可欠と考えられるドライバー遺伝子変異が発見され，その変異を標的にした分子標的薬の開発が進展してきた．一方，変異を検出する診断薬は，分子標的薬の対象となる患者を選択するために必須である．米国食品医薬品局（Food and Drug Administration：FDA）は2011年7月14日にコンパニオン診断薬に関するドラフト・ガイダンスを発表し，コンパニオン診断薬の使用目的を①ある治療薬が最も有効と予想される患者の同定，②重篤な副作用のリスクが高いと予想される患者の同定，そして③投与計画や投与量の変更，そして治療の中止を決定するための治療効果のモニタリングの3つとした．2014年8月には，ガイダンスとして確定し，発表した．一方，わが国では，2013年7月1日付で厚生労働省医薬食品局審査管理課長からコンパニオン診断薬の定義や承認審査に係る留意事項が通知された．コンパニオン診断薬の定義は，FDAのドラフト・ガイダンスで示された使用目的と同じ内容である．同年12月24日には独立行政法人医薬品医療機器総合機構（PMDA）理事長名でコンパニオン診断薬および関連する医薬品に関する技術的ガイダンスが公表され，2014年2月19日には厚労省医薬食品局審査管理課医療機器審査管理室長通知によって，コンパニオン診断薬の製造販売承認申請に際しての留意点が示された．米国に3年遅れで未完成ではあるが，わが国でもコンパニオン診断薬に関する承認審査の基準が整備された．
　本稿では，コンパニオン診断薬とそれを用いる検査の現状と課題について述べる．

一般検査尿検査

尿定性検査(尿試験紙検査)

著者：菊池春人

ページ範囲：P.28 - P.30

検査の概要
　定性検査は試験紙を尿に浸して読み取るという「ディップ・アンド・リード」の形で簡便に実施できることで広く普及してきた．したがって本稿では，尿定性検査を試験紙での検査に限って述べていく．一方，試験紙で実施できる尿検査といってもかなり多くの項目がありその意義もさまざまであるために，現在よく行われていると考えられる9項目については，表1にまとめ，本文では総論的あるいは補足的な事項について記載した．なお，表1に測定原理を加えたのは試験紙検査の結果に関連することが多く，結果の解釈の際に原理を理解しておくとよいものが多いためである．また，最後に最近普及してきている尿アルブミン，クレアチニンの試験紙について補足として記述した．

尿沈渣検査

著者：菊池春人

ページ範囲：P.31 - P.33

検査の概要
　尿中の沈殿物が尿沈渣であるが，通常尿を遠心することによって集め鏡検を行って同定する．尿沈渣には腎尿路系の病変が直接反映されるので，腎尿路系の基本的で重要な検査の1つであり，さらに結晶・塩類など代謝に関連する成分も認められる．尿沈渣には多様な成分が存在するため，表1に代表的な成分についてまとめて示した．詳細については文献¹⁾を参考にされたい．
　現在，フローサイトメトリー法や画像認識によって尿を遠心せずに尿中の有形成分を判定，定量する自動分析装置が広く使用されるようになってきているが，沈渣鏡検までのレベルには達しておらず，いわばスクリーニング検査の位置づけである．

糞便検査

便潜血検査

著者：今福裕司

ページ範囲：P.34 - P.36

検査の概要
　便潜血検査（fecal occult blood test：FOBT）は，便中の微量な血液成分を検出する検査である．潜血とは目に見えない血液成分という意味であり，本検査は消化管出血を検出することを目的とする．便中の血液成分の由来として全消化管からの出血，および鼻出血や経口的に血液を摂取した場合も成分が便中に出現する．血液成分として最も多い蛋白質であるヘモグロビン（Hb）を検出対象とすることがほとんどであり，その方法として化学法（chemical method）と免疫法（immunological method）が存在している（図1）．免疫法は陽性，陰性という結果となる「定性法」と，便中の潜血量（採便容器中の溶液内のHb量を示す値としてng/mLが使用されることが多い）を数値として求められる「定量法」がある．

寄生虫検査

著者：今福裕司

ページ範囲：P.38 - P.39

検査の概要
　寄生虫は核膜を有する真核生物のうち運動性のあるものであるが，大きく単細胞生物である原虫（protozoa）と多細胞生物である蠕虫（helminth）に分類される．
　便を検体として用いる寄生虫検査には，虫体そのものの検出，虫卵，囊子（cyst），オーシスト（oocyst）の検出などがある．虫体は大きい物は肉眼的に観察でき，回虫の虫体などがそのまま検査室に提出されることもあるが，赤痢アメーバの栄養型が動いて赤血球を捕食する姿などは顕微鏡にて観察することになる（図1）．

髄液そのほかの穿刺液

胸水・腹水検査

著者：三宅一徳

ページ範囲：P.40 - P.41

検査の概要
　胸水，腹水は循環障害，栄養障害，炎症，悪性腫瘍の浸潤などの原因により貯留する．胸水・腹水検査はこの貯留液を体表より穿刺，採取して，成因の鑑別を行う検査である．検査項目としては，以下が標準的な検査として実施される．
【一般性状検査】肉眼的性状観察，細胞数算定および分画，Rivalta反応
【生化学検査】総蛋白，アルブミン，グルコース，乳酸脱水素酵素LD（LDH）活性など
【微生物検査】塗抹鏡検，細菌培養
　穿刺液の外観と疑われる病態により，他の生化学項目や腫瘍マーカー，微生物（遺伝子検査含む），細胞診などの検査を選択して追加実施する．

髄液検査

著者：渡邊卓

ページ範囲：P.42 - P.44

検査の概要
　髄液（脳脊髄液：cerebrospinal fluid）は，くも膜下腔および脳室を満たす無色透明な水様の液体である．中枢神経系への物理的侵襲に対する保護の役割を果たすのみならず，脳室，くも膜下腔内の化学的ホメオスターシスの維持，栄養物質，代謝産物などの輸送，除去などの役割をも担うとされる．髄液は基本的には血液成分に由来するが，髄液の産生は単なる透過，拡散のみではなく，能動的かつ選択的な物質の輸送によるところが大きいと考えられる．
　髄液検査が日常臨床のなかで特に重要な役割を果たすのは中枢神経系疾患の診断であるが，なかでも各種頭蓋内感染症の診断には不可欠である¹⁾．このほか，くも膜下出血，頭蓋内悪性腫瘍，脱髄疾患などの診断にも有用な情報を提供する．近年，髄液中の神経伝達物質などの微量物質の定量も試みられ，中枢神経系の機能との関連や，これまで客観的な検査データによる裏付けの困難であった精神疾患（状態）との関連なども検討されるようになってきている．

血液検査血球検査

赤血球数，ヘモグロビン濃度，ヘマトクリット値，赤血球指数，網赤血球数

著者：小林匡洋 , 張替秀郎

ページ範囲：P.46 - P.48

検査の概要
　赤血球はヘモグロビンを含み，ヘモグロビンに酸素を結合させて酸素を運搬する役割を担う．赤血球は骨髄で造血幹細胞から赤芽球を経て分化して産生され，末梢血液に放出される．赤血球は約120日間の寿命の後に脾臓で老化赤血球として貪食される．
　赤血球数，ヘモグロビン，ヘマトクリット，赤血球指数，網赤血球数の検査は，さまざまな血液疾患，出血が疑われる場合に，貧血や赤血球増多の程度を知るために行われる．赤血球の減少あるいは増加は，造血障害以外にも，消化器疾患，腎疾患などさまざまな全身性疾患でも起きる可能性がある．これらの検査は，初期診療では欠かすことのできない検査である．

溶血性疾患の検査—(赤血球浸透圧抵抗試験，Coombs試験，PNH関連検査)

著者：和田秀穂

ページ範囲：P.49 - P.52

赤血球浸透圧抵抗試験（Parpart法）
検査の概要
　遺伝性球状赤血球症（hereditary spherocytosis：HS）が疑われる時，すなわち溶血性貧血の症例で末梢血塗抹標本において小型球状赤血球が認められ，さらに遺伝性（先天性）が疑われた場合には，確定診断のために赤血球浸透圧抵抗試験を行う．本試験は，一般的にはParpart法が用いられている．

白血球数，白血球分類

著者：東田修二

ページ範囲：P.53 - P.55

検査の概要
　白血球は病原微生物や異物から生体を防御する機能をもつ細胞であり，骨髄の造血幹細胞から分化，成熟して産生される．白血球は5種類の細胞からなり，好中球は細菌の貪食，好酸球と好塩基球はアレルギーに関与する．これら3種類の細胞を総称して顆粒球と呼ぶ．リンパ球は抗体産生や細胞性免疫などにかかわり，単球は組織でマクロファージとなって貪食や抗原提示を行う．白血球の増減をみる際には，白血球数や各分画の百分率だけでなく，白血球数に各分画の百分率を掛け合わせた，絶対数の増減をみる必要がある．
　白血球数はEDTAを加えた血液を検体として，自動血球計数器を用いて測定される．白血球分類はこの装置でフローサイトメトリー法による自動分類が行われるが，自動分類できる細胞は正常白血球の5分画に限られ，好中球の桿状核球と分葉核球の区別はできず，白血病細胞がリンパ球分画に入ってしまうこともある．よって，白血球数や分画に異常がある検体や造血器腫瘍が疑われる検体では，塗抹標本の鏡検による目視分類を行う必要がある．

血小板数

著者：矢冨裕

ページ範囲：P.56 - P.58

検査の概要
　言うまでもなく，血小板は血栓・止血の中心を担う細胞である．一次止血栓は血小板によって形成され，血小板数の減少により，初期の止血が障害される（出血時間が延長する）．血小板疾患には数的異常と機能的異常があり，日常診療において頻度が高く，より重要なのは前者であり，特に血小板減少症が出血傾向との関連で問題となることが多い．
　血小板数は，赤血球，白血球の計数と同時に，EDTA加血液を測定検体として，自動血球計数器で測定される．現在の主流である電気抵抗方式・光学的方式に加え，血小板特異抗原を認識する蛍光標識モノクローナル抗体を用いた血小板計数（免疫学的血小板数測定）も可能となっており，より正確な，低値域における血小板算定が可能になっているが，費用の問題が存在する．

末梢血液像

著者：佐藤尚武

ページ範囲：P.59 - P.63

検査の概要
　末梢血液中に出現する血液細胞（血球）の形態を観察し，評価を行う検査である．まず末梢血の塗抹標本を作成し，これを染色して顕微鏡で観察する．染色は血液普通染色を行うが，必要に応じて特殊染色を追加する．血液普通染色は，現在は重染色が主流で，Wright-Giemsa染色かMay（-Grünwald）-Giemsa染色を行うが，迅速検査ではWright単染色が実施されることもある．
　観察対象は赤血球，白血球および血小板であるが，きわめて稀に末梢血液中に出現した癌細胞など，非血液細胞が対象になることもある．評価対象は数量異常と形態異常であるが，数量異常については血球計数（血算）のほうが正確な情報を得られる場合が多いので，補助的検査という位置づけになる．

骨髄像

著者：東田修二

ページ範囲：P.64 - P.65

検査の概要
　骨髄は血球産生の場であり，骨髄球系，赤芽球系，巨核球系，リンパ球系の種々の分化段階の細胞と，造血を支持する細胞が存在する．白血病，骨髄増殖性腫瘍，骨髄異形成症候群，骨髄腫はこれらの造血細胞が腫瘍化して生じた疾患であり，その診断のために骨髄検査を行う．血球減少の原因が再生不良性貧血のような骨髄不全である場合にも骨髄検査を行う．リンパ腫や種々の癌の骨髄浸潤を検索する場合にも行われる．さらには，これらの治療効果の判定にも用いられる．
　骨髄検査の適応を検討した後，まず骨髄穿刺を行う．表1のような場合には引き続き，骨髄生検も行う．穿刺は後腸骨稜で行うが，腸骨に放射線治療が行われたなどの理由で腸骨が不適切な症例では，経験豊富な医師が胸骨貫通による合併症に気をつけながら，胸骨から穿刺を行う．生検は腸骨から行う．採取検体を用いて表2に示す検査を行う．標本の鏡検では表3に示す項目を観察する．

特殊染色

著者：東田修二

ページ範囲：P.66 - P.67

検査の概要
　特殊染色とは，骨髄もしくは血液塗抹標本の細胞に存在する酵素，多糖類，脂質，金属などをそれぞれに対する試薬を用いて染色し，その陽性／陰性，染色顆粒の密度や性状によって，細胞の系統の区別，腫瘍か否かの区別，診断の補助として用いる検査法である．表1に示すような特殊染色が臨床検査として頻用されている．

細胞表面マーカー

著者：小池由佳子

ページ範囲：P.68 - P.71

検査の概要
　細胞表面マーカー検査とは，フローサイトメーターを用い，主に細胞膜表面（一部細胞質内）に存在する蛋白質，糖蛋白などの抗原（分子）をモノクローナル抗体の反応性によって検出する検査法である．末梢血，骨髄，体腔液など，細胞浮遊液であれば，いずれも検体として測定可能である．リンパ節や生検した組織も丁寧にほぐして細胞を浮遊させ検査を行う．これら抗原の発現から細胞の系統（lineage）および分化段階（differentiation）を同定することができる．
◆臨床検査として広く用いられているもの
　主な臨床検査として，リンパ球サブセット検査と造血器腫瘍細胞抗原検査がある．そのほか，造血幹細胞移植の際に採取したCD34陽性造血幹細胞数の算定や発作性夜間血色素尿症の診断などにも利用され，その応用範囲は広い．

造血器腫瘍の遺伝子・染色体検査

著者：宮地勇人

ページ範囲：P.72 - P.75

検査の概要
◆白血病
　白血病において染色体転座の結果，2つの遺伝子内の切断点においてお互いが融合し，キメラ遺伝子，さらにキメラmRNAを生じる．これを検出指標（転座マーカー）として，染色体検査や遺伝子検査が行われる．核酸増幅法は，白血病の病型診断（表1）や治療後の微小残存病変（minimal residual disease：MRD）のモニタリングなどに利用する．抗癌薬による寛解導入療法後，または造血幹細胞移植後のMRDの高感度モニタリングは，治療効果判定，疾患予後，寛解導入療法後の個別化治療計画，再発の早期発見，移植後の治療介入（ドナーリンパ球輸注など），さらに自家骨髄移植用に採取された幹細胞の質評価の指標となる．
　急性白血病の転座マーカーは骨髄性の40〜50％，リンパ性の30％の症例で利用できる（表2）．そのほかMRDの分子マーカーとして，遺伝子発現マーカー（WT1発現など），FLT3変異，抗原受容体遺伝子などがある．

EPO(エリスロポエチン)

著者：小松則夫

ページ範囲：P.76 - P.77

検査の概要
　エリスロポエチン（erythropoietin：EPO）は主に腎臓から産生される分子量約34kDa，165個のアミノ酸からなる糖蛋白性の造血因子で，赤芽球系前駆細胞に特異的に作用し，その増殖や分化を支持し，赤血球造血を促進する．EPO産生を調節するのは酸素の需要供給のバランスであり，腎臓の細胞に存在する酸素センサーが働いて，その情報をEPO産生細胞（renal EPO producing cells：REP細胞）に伝え，転写因子である低酸素誘導因子（hypoxia inducible factor：HIF）の安定化によってEPO遺伝子の転写が促進され，EPO産生が誘導される¹⁾．すなわち，低酸素状態（高地在住，肺疾患など）や貧血に陥ると組織での酸素が欠乏し，それが刺激となって腎におけるEPO産生が亢進し，赤血球造血が刺激され，赤血球数が増加する．
　一方，酸素過剰や多血症の際にはEPO産生は低下し，赤血球造血は抑制される．このように，赤血球産生のホメオスタシスは巧妙な制御を受け，維持されているため，血中EPO値の測定は生体内での赤血球造血の状態を把握するうえで，有用な検査である．病院外の検査機関への測定依頼（外注検査）が可能である．

TPO(トロンボポエチン)

著者：小松則夫

ページ範囲：P.78 - P.79

検査の概要
　トロンボポエチン（thrombopoietin：TPO）は巨核球系細胞に作用して血小板産生を促進する造血因子で，分子量95kDaの糖蛋白である．主な産生臓器は肝臓（肝実質細胞）であるが，腎臓，骨格筋，骨髄などでも産生される．TPOやTPO受容体の遺伝子破壊マウスでは末梢血の血小板数が正常値の20％以下に減少し，骨髄の巨核球系前駆細胞や巨核球の数も同程度に減少し，残存した巨核球の核の多倍体化も低下する．血小板減少症の鑑別診断を行うために血中TPO値を測定するが，測定は一部の研究機関でのみ行われている．

血栓・止血検査

出血時間

著者：高蓋寿朗

ページ範囲：P.80 - P.81

検査の概要
　出血時間は一次止血機能をベッドサイドで評価できるin vivoの検査法である．皮膚に小さな切創をつくり，出血が自然に止まるまでの時間を測定する方法であり，Duke法とIvy法が一般的である．
◆Duke法
　耳朶を消毒した後，ランセットと呼ばれるメスなどで2〜3mmの深さで穿刺し，30秒ごとに濾紙を用いて血液を吸い取り，血液が付着しなくなった時間を「出血時間」とする．簡便性を重視して，本邦では最も普及している．

血小板凝集能

著者：矢冨裕

ページ範囲：P.82 - P.83

検査の概要
　点状出血など一次止血の異常を認めた場合には，まず血小板の異常を考え，血小板数を確認するが，これに異常を認めない場合は血小板機能異常症を疑う．この際，血小板機能の評価において最も重要で，広く施行される検査が血小板凝集能である．
　本検査は，クエン酸加全血を遠心して得られる多血小板血漿（platelet-rich plasma：PRP）に種々の血小板活性化物質を添加することにより惹起される血小板凝集反応を観察するものである．凝集反応によりPRPの濁度が低下して光が透過しやすくなるが，このPRPの光学的変化を経時的に検出する透過光法が一般的である．

血小板活性化マーカー

著者：大森司

ページ範囲：P.84 - P.86

検査の概要
　生体内での血小板活性化を検出する手法としては，活性化血小板からの放出物質の測定，また，血小板の易活性化を判断する血小板凝集能がある．保険収載されている検査としてはβ-トロンボグロブリン（β-thromboglobulin：β-TG），血小板第4因子（platelet factor-4：PF-4），血小板凝集能検査である．β-TG，PF-4は血小板のα顆粒に含まれている血小板特異的蛋白質である．血小板活性化に伴って放出されるβ-TG，PF-4により，生体内での血小板活性化を定量化する．測定は酵素免疫測定（enzyme immunoassay：EIA）法が主である．
　血小板凝集能は透過度法が一般的である．血小板多血漿へ血小板活性化物質添加後の透過度の変化を定量化する．易活性化をより鋭敏に評価する方法として，粒子計測法や，より簡便な全血を用いた血小板凝集計も開発されている．

von Willebrand因子

著者：高蓋寿朗

ページ範囲：P.87 - P.89

検査の概要
　von Willebrand因子（von Willebrand factor：VWF）は血管内皮細胞あるいは骨髄巨核球で産生される高分子量の糖蛋白質で，血管内皮細胞，血小板から放出される．合成の過程で，分子量約270kDaのサブユニットがS-S結合によって重合し，分子量約500〜20,000kDaのさまざまなサイズのマルチマーを形成している．VWFは，血管内皮が破綻した部位において血管内皮下組織のコラーゲンに結合し，血小板粘着を惹起して一次止血を誘導する．VWFの質的あるいは量的異常によって，von Willebrand病（von Willebrand disease：VWD）を発症する．また，VWFは凝固第Ⅷ因子と血漿中で複合体を形成し，第Ⅷ因子のキャリアー蛋白として機能することも知られている．
　血漿中のVWFを評価する検査としては，以下の検査がある．

ADAMTS13

著者：高蓋寿朗

ページ範囲：P.90 - P.91

検査の概要
　von Willebrand因子（von Willebrand factor：VWF）はマルチマー構造を形成した状態で血管内皮細胞と血小板から放出され，止血血栓形成の場において重要な機能を示す．一方，全身の微小血管内に病的血栓が形成されることによって発症する血栓性血小板減少性紫斑病（thrombotic thrombocytopenic purpura：TTP）において，血中に超高分子マルチマーが出現することが報告されていた．1990年代以降，TTPにおいてVWFマルチマーを選択的に切断する酵素活性の低下が認められることが指摘され，この酵素がADAMTS13と呼ばれるメタロプロテアーゼであることが明らかとなった．
　ADAMTS13はVWFの特定の部位を切断するが，この切断部位を含む73アミノ酸からなるVWFのペプチド断片（VWF73）がADAMTS13の最小基質であることが見いだされている．また，VWF73がADAMTS13によって切断されて生じる切断端のアミノ酸残基を特異的に認識するモノクローナル抗体も開発され，VWF73とこのモノクローナル抗体を利用して高感度ELISA活性測定法（act-ELISA法）が確立されている．測定法の原理は参考文献を参照していただきたい．

PT(プロトロンビン時間)，APTT(活性化部分トロンボプラスチン時間)

著者：清田育男

ページ範囲：P.92 - P.95

検査の概要
　凝固反応はそれぞれの凝固因子が活性化されることで最終的にフィブリノゲンが活性化されフィブリンとなる反応である．プロトロンビン時間（prothrombin time：PT），活性化部分トロンボプラスチン時間（activated partial thromboplastin time：APTT）は，凝固反応のスクリーニングとして用いられている（図1）．

トロンボテスト，ヘパプラスチンテスト

著者：清田育男

ページ範囲：P.96 - P.97

検査の概要
◆トロンボテスト
　トロンボテスト（thrombo test）は，肝臓でビタミンK依存性に合成される凝固因子（第Ⅱ，Ⅶ，Ⅸ，Ⅹ因子）のうち，第Ⅱ，Ⅶ，Ⅹ因子量を反映する検査で，ビタミンK欠乏またはビタミンK拮抗薬（ワルファリンなど）で誘発される蛋白であるPIVKA（proteins induced by vitamin K absence）の影響も含めて測定される．ワルファリンのモニタリングに用いられるが，近年世界的にプロトロンビン時間国際標準比（PT-INR）がモニタリングの主流となり，検査件数は減少している．
◆ヘパプラスチンテスト
　ヘパプラスチンテストはトロンボテストと同様に第Ⅱ，Ⅶ，Ⅹ因子量を反映する検査である．ウシ脳由来の代わりに家兎由来の製剤を用いることで，PIVKAの影響を受けず，より第Ⅱ，Ⅶ，Ⅹ因子量を反映するテストである．肝機能評価に用いられる．

フィブリノゲン

著者：清田育男

ページ範囲：P.98 - P.99

検査の概要
　フィブリノゲンは血液凝固反応の最終段階に関与し，トロンビンによりフィブリノゲンはフィブリンとなり，さらに血液凝固第XIII因子の触媒により，フィブリンから安定化フィブリンを形成する．肝臓で合成され，生体内半減期は3〜4日とされる．

アンチトロンビン

著者：高木夕希 , 小嶋哲人

ページ範囲：P.100 - P.101

検査の概要
　アンチトロンビン〔antithrombin：AT，旧称：アンチトロンビンⅢ（ATⅢ）〕はトロンビンや活性化凝固第Ⅹ因子（activated factor Ⅹ：Ⅹa）などを阻害する生理的血液凝固阻止因子である．ATはヘパリンとの結合により抗トロンビン作用の反応速度を1,000倍以上に促進される．
　先天性AT欠乏/異常症は常染色体優性遺伝形式をとる血栓性素因の1つであり，その頻度は人口10万人当たり1〜2人と報告されている．先天性AT欠乏/異常症患者のほとんどが50〜60歳までに血栓症を発症するが，そのうちの約70％は外傷，手術，妊娠，経口避妊薬の内服，あるいはそのほかの血栓リスクを契機として10〜35歳に初発する．血栓形成頻発部位は下肢深部静脈，腸管膜静脈などで，静脈系の血栓症を引き起こす．

凝固活性化マーカー—TAT，F1＋2，可溶性フィブリン

著者：朝倉英策

ページ範囲：P.102 - P.104

検査の概要
◆TAT
　トロンビンとその代表的な阻止因子であるアンチトロンビン（AT）が1：1結合した複合体が，トロンビン-アンチトロンビン複合体（thrombin-antithrombin complex：TAT）である（図1，2）．何種類かの測定法があるが，トロンビンに対する抗体とATに対する抗体の両者ともに反応する蛋白質を検出する測定原理となっている（サンドイッチEIAなど）．
　TATを測定することで，トロンビン産生量，すなわち凝固活性化の程度を間接的に評価することができる．トロンビンの血中半減期はきわめて短いため直接測定は不可能であるが，TATの血中半減期は3〜数分であるため測定することが可能である．

線溶活性化マーカー—FDP，D-ダイマー，PIC

著者：朝倉英策

ページ範囲：P.105 - P.107

検査の概要
　組織因子（tissue factor：TF）の作用によって凝固活性化を生じると，最終的にトロンビンが形成される．トロンビンがフィブリノゲンに作用すると，フィブリノゲンはフィブリンに転換して，さらにフィブリンが重合すると血栓が形成される．この重合されたフィブリンを安定化するために，血液凝固第XIII因子による架橋結合（cross-link）が行われる．これに対して，形成された血栓を溶解しようとする働きのことを線溶（fibrinolysis）と呼ぶ（図1）．
　線溶が開始されるためには，血管内皮からの組織プラスミノゲンアクチベータ（tissue plasminogen activator：t-PA）産生が必要である．t-PAは，プラスミノゲン（肝で産生）をプラスミンに転換し，プラスミンは血栓（架橋化フィブリン）を分解する．血栓が分解された際に生ずる分解産物のことをFDP（D-ダイマー）という．t-PAおよびプラスミノゲンはフィブリン親和性が高く，フィブリン上で能率良く線溶が進行する．

プロテインC，プロテインS

著者：村田萌 , 小嶋哲人

ページ範囲：P.108 - P.109

検査の概要
　プロテインC（protein C：PC）とプロテインS（protein S：PS）はいずれも主に肝臓で産生されるビタミンK依存性凝固制御因子である．PCは血管内皮上のトロンボモジュリンに結合したトロンビンにより，活性化PC（activate PC：APC）となる．PSは血漿中では約6割がC4BP（C4b-binding protein）結合型，残りが遊離型として存在する．この遊離型PSがリン脂質とCa^2＋の存在下で活性化PCの補助因子として働き，凝固第Ⅴa因子と第Ⅷa因子を限定分解することで抗凝固作用を示す．したがって，PCやPSの異常は血栓傾向を呈する．
　先天性PC欠損症は血栓性素因として知られ，高頻度に血栓症を発症し，特に若年性の反復する血栓症では先天性PC欠損症を疑う必要がある．したがって，PCの活性値や抗原量の測定は，血栓性素因の診断や治療に重要である．

血液凝固因子，インヒビター

著者：大森司

ページ範囲：P.110 - P.111

検査の概要
　凝固因子は血小板血栓の一次止血に続き，二次止血を担う肝臓で産生される血漿蛋白質である．凝固因子は複数が存在し，血管壁の損傷に伴い上流の凝固因子から効率的に酵素反応を増幅し，最終的にフィブリン血栓を形成する．凝固因子活性の低下により二次止血が阻害され，出血傾向をきたす．凝固因子活性低下の原因として，凝固因子産生の低下，血栓形成による消費性の低下，また凝固因子インヒビターが挙げられる．
　凝固因子測定法は大きく分けて，活性と抗原測定に分けられる．日常診療では凝固一段法による活性測定が一般的である．活性測定は，目的とする凝固因子の欠乏血漿に標準血漿を種々の濃度で添加した際の活性化部分トロンボプラスチン時間（activated partial thromboplastin time：APTT），またはプロトロンビン時間（prothrombin time：PT）値を元に標準曲線を作製し，凝固検査の値から患者血漿中の凝固因子活性を測定する．凝固因子活性は正常血漿中1mLに存在する凝固因子量を1U/mLと定義し，これを100％とする．抗原量の測定はELISA法によるものが一般的だが，日常的に行うことは少ない．第XIII因子活性の測定は，ラテックス凝集法などの異なる手法を用いる．

HIT抗体検査

著者：金子誠

ページ範囲：P.112 - P.114

検査の概要
　血栓治療薬として投与される抗凝固薬のヘパリンの副作用には，出血のほかにヘパリン起因性血小板減少症（heparin-induced thrombocytopenia：HIT）がある．HITは，手術症例や血栓症発症例へのヘパリン投与後5〜14日頃に，血小板減少や血栓症の発症・増悪によって疑われる．病態の中心となるのが，血小板第4因子（platelet factor 4：PF4）とヘパリンが結合した複合体に対する抗体（HIT抗体）である．保険収載されているHIT抗体検査法は免疫学的測定法で，ラテックス凝集法および化学発光免疫測定法に基づきHIT抗体を検出する¹⁾．
　ラテックス凝集法（HemoslL^® HIT-Ab）では，PF4-ヘパリン複合体に対する総免疫グロブリン（HIT-IgG/IgA/IgM）を検出する．PF4-ヘパリン複合体マウスモノクローナル抗体が結合したラテックス，抗原となるPF4-ポリビニルスルホン酸複合体（PVS）と，患者検体中にHIT抗体の競合反応を観察する（ラテックス凝集を阻害する検体が陽性）．一方，化学発光免疫測定法には2種類あり，HIT-IgG/IgA/IgMを検出する方法（HemosIL^® AcuStar HIT-Ab）と，HIT-IgGのみ検出する方法（HemosIL^®AcuStar HIT-IgG）がある．ともに2ステップ免疫測定法で，患者検体中のHIT抗体を標識抗体で直接，定量的に検出する．この測定法の差により，HIT抗体の検出に大きな差が生じる．

血管内皮マーカー

著者：高蓋寿朗

ページ範囲：P.115 - P.116

検査の概要
　血管内皮細胞とは大血管から毛細血管に至るすべての血管の表面を単層状に覆う細胞である．通常は血管内で異常な血栓形成などをきたさないように機能しているが，血管損傷，炎症，過凝固状態に際しては，血管内皮細胞自体も活性化し，白血球，血小板の接着，凝集を誘導するように機能することが知られている．高度な血管内皮の活性化，あるいは血栓形成などに伴い血管内皮細胞障害が生じていることを，血漿中の「血管内皮マーカー」によって検出することが以前から試みられてきた．
　多くの血管内皮マーカーの可能性が提唱されてきたが，現在では可溶性トロンボモジュリン（soluble thrombomodulin：sTM）とvon Willebrand因子（von Willebrand factor：VWF）が特に有用であると考えられている．VWFについては別項でも解説するので，本稿ではsTMを中心に解説し，ほかの血管内皮マーカーの候補についても触れる．

血液生化学検査など蛋白

血清総蛋白(TP)

著者：濵田悦子 , 前川真人

ページ範囲：P.118 - P.119

検査の概要
　血清中に存在する蛋白質は100種類を超え，これらの総量が総蛋白であり，生理的意義は多種多様である．血清蛋白の変動は，基本的には合成，異化，体内分布，体内からの喪失の4つの因子により調整されている．したがって，いずれかの因子の障害によって血清蛋白濃度が変動する．そのため，全身状態のスクリーニングとして，栄養状態，蛋白質の合成や異化の状態，蛋白質の吸収・漏出の状態，脱水症などの蛋白代謝異常の評価に測定される．
　検査方法は，蛋白質が含有するペプチドとCu^2＋とのキレート形成による錯化合物の呈色反応を利用したBiuret法を原理として，自動分析装置による測定が大多数を占める．

アルブミン

著者：濵田悦子 , 前川真人

ページ範囲：P.120 - P.121

検査の概要
　アルブミンは血漿蛋白質の60〜70％を占める主要な成分で，膠質浸透圧の約80％を担っているだけでなく，栄養源，酸─塩基平衡の維持，各種物質（ビリルビン，遊離脂肪酸，甲状腺ホルモン，Ca）の運搬などの働きを有する．肝臓で合成され，分子量約67,000，等電点4.7〜5.2の水溶性蛋白質である．血中半減期は約21日であり，生体中の栄養状態を反映し，栄養評価蛋白（nutrition assessment protein：NAP）として測定されている．
　測定法は色素結合法を用いた自動分析法が一般的である．用いる色素はBCG［bromcresol green（ブロムクレゾールグリーン）］とBCP［bromcresol purple（ブロムクレゾールパープル）］である．どちらもpH指示薬であり，アルブミンと結合して発色する吸光度を比色定量する．BCG法は簡便で再現性がよいため古くから使用されてきたが，アルブミンだけでなくグロブリン，特に急性反応物質も反応するため正確性に問題がある．BCP法は酸化還元型の反応性の違いや，ビリルビンと共有結合したアルブミンとの反応性に問題があったが，村本らにより1999年にBCP改良法が開発され，アルブミンに高い特異性を示し，国際化学連合（IFCC）標準化法でもある免疫学的測定法とも測定値が一致することから，日本臨床化学会，日本臨床衛生検査技師会の推奨も受け，本邦での普及が進んでいる（すでに50％を超えている）．

蛋白分画

著者：濵田悦子 , 前川真人

ページ範囲：P.122 - P.125

検査の概要
　血清には約100種類以上の蛋白質が存在している．これら蛋白質の生化学的特性，主な機能を表1にまとめた．血清蛋白電気泳動法は主にセルロースアセテート膜を支持体とする方法であるが，アガロースゲル電気泳動やキャピラリー電気泳動も用いられている．
　右側を陰極，左側を陽極とした電気泳動パターンで示し，デンシトメータで算出された分画％が各分画に相当し，総蛋白量と乗じた分画濃度（g/dL）を評価する．病態に応じたパターンを示すので，病態のスクリーニングに有用である．

栄養アセスメント蛋白質

著者：安東由喜雄

ページ範囲：P.126 - P.128

検査の概要
　在院日数の短縮が奨励されるようになり，アルブミン（ALB），トランスサイレチン（transthyretin：TTR），レチノール結合蛋白（retinol binding protein：RBP），トランスフェリン（transferring：Tf）などの反急性期蛋白（anti-acute phase protein）が同時に栄養状態と呼応して変動することから，これらの蛋白質を用いた栄養アセスメントが行われている^1,2)．アルブミンは血中半減期が約3週間であるが，比較的半減期が短く，炎症時や栄養状態によって変動するTTRと組み合わせて栄養状態を評価することが推奨される．ただし，これらの蛋白質が反急性期蛋白質であることから，C reactive protein（CRP）やserum amyloid A component（SAA）などの増減を評価しながら，評価する必要がある．

免疫電気泳動

著者：藤田清貴

ページ範囲：P.130 - P.133

検査の概要
　免疫電気泳動とは，ゲル内沈降反応の1つの様式であって，抗原抗体反応にあずかる反応因子（抗原または抗体，その両方）が電気泳動法によって分離される過程（支持体電気泳動法）とゲル内沈降反応（オクタロニー法）とが組み合わされた分析方法を総称している．一般的には免疫電気泳動という場合，Grabar-Williamsの方法を指す．免疫電気泳動が診断上最も有力な武器となるのは，質的異常を示すM蛋白血症であるが，泳動条件，操作法を一定にすることにより量的異常を示す異蛋白血症の分析にも有用である（表1）．また，未知の蛋白の同定やその電気的易動度などを知るうえでも有力な手段として用いることができる¹⁾．
　免疫電気泳動で最も大切なことは，得られた沈降線をいかに判読するかである．血清，尿などの試料を用いて免疫電気泳動を行った場合には，それぞれの沈降線がどの蛋白成分であるかを知る必要があり，かなりの熟練を要する．実際に市販の抗血清を用いた場合，正常ヒト血清では通常20〜30本の沈降線が観察される（図1）．沈降線の現れ方は，使用した抗血清の種類やロット差などによって多少異なった結果が得られる．したがって，用いる抗血清の特徴，すなわち，どの蛋白成分の沈降線が出現しやすく，あるいはまったく認められないかをよく吟味することが大切である．

ハプトグロビン

著者：田中寿幸 , 林由里子 , 藤田清貴

ページ範囲：P.134 - P.135

検査の概要
　ハプトグロビン（haptoglobin：Hp）は電気泳動においてα₂領域に検出される糖蛋白である．Hpは主として肝臓で合成され，血中半減期は3〜5日と短い蛋白であるため，重症肝障害の場合，その血中濃度は著減する．
　Hpは酸化物質である遊離ヘモグロビン（haemoglobin：Hb）と特異的に結合することで，酸化的組織障害から生体を守っている．また，遊離Hb-Hp複合体は，腎糸球体から尿中への鉄の喪失を防いでいる．一方で，Hpは急性期蛋白であり，炎症性疾患（感染症，膠原病など），組織壊死（心筋梗塞など），悪性腫瘍などで血中濃度が上昇し，その活動性の指標となる．

免疫グロブリン

著者：林由里子 , 田中寿幸 , 藤田清貴

ページ範囲：P.136 - P.138

検査の概要
　免疫グロブリンはリンパ・形質細胞系で合成され，生体内における体液性免疫機構を担当する蛋白でIgG，IgA，IgM，IgD，IgEの5つのクラスが知られている¹⁾．表1にヒト免疫グロブリンの物理化学的性状と生物学的活性を示す．IgGは血清中に最も多く，全体の約80％を占めており，生体における二次免疫応答の主要な抗体である．IgAは免疫グロブリンの10〜13％を占めており，粘膜免疫において重要な役割を果している．また，IgMは約6％と少なく，主に一次免疫応答を担っている．IgG，IgA，IgMの定量測定には，主に免疫比濁法あるいは免疫比朧法が用いられており，自動分析装置による測定が可能となっている．IgDの血中濃度はIgG，IgA，IgMに比べて低いことから，低値の測定が可能なラテックスを用いた測定系が用いられているが，その生理的意義はいまだに不明な点が多い．一方，IgEはアナフィラキシーなどのⅠ型アレルギーに関与することが知られているが，その血中濃度はごく微量であり，測定には酵素免疫測定法や化学発光免疫測定法などが用いられている．

補体

著者：秋山雄次

ページ範囲：P.139 - P.141

検査の概要
　血清中に存在し，熱に弱く，抗体による細菌のオプソニン化と殺菌を促進する成分として発見された．主に肝臓で生成される約20種類の蛋白質の総称で全血清蛋白の約10％を占めるが，血清以外の体液や組織にも広く分布している．進化学的に発生は古く，ヒトデや線虫にも存在し自己・非自己の識別にもかかわる．当初，抗体の抗菌活性を補うものとして発見されたが，自然免疫に属し抗体が産生あるいは動員される前に活性化され効果を示すことができる（第二経路，レクチン経路）．以下に述べる種々の免疫反応や感染防御に関与している．

クリオグロブリン血症

著者：秋山雄次

ページ範囲：P.142 - P.143

検査の概要
　体温以下への冷却で白色に凝集し，37℃以上に加温すると再溶解する血清中の異常蛋白をクリオグロブリン（cryoglobulin）と呼び，そのクリオグロブリンが血中に増加した状態をクリオグロブリン血症という．基礎疾患が不明な本態性と，膠原病などの自己免疫疾患，感染症，リンパ増殖性疾患などに伴って発症する続発性に分かれる．また，クリオグロブリンを形成する免疫グロブリンの性状により3型に分類することが多い（表1）．すなわち，単一のモノクローナルな免疫グロブリンからなるⅠ型，ポリクローナルなⅢ型，混合するⅡ型である．Ⅱ型はリウマトイド因子活性をもつモノクローナルIgMとポリクローナルIgGが免疫複合体を形成したもので，Ⅲ型はリウマトイド因子活性をもつポリクローナルIgMとポリクローナルIgG（稀にIgA）が免疫複合体を形成したものである．
　症状としては皮膚症状が最も多く末梢循環不全によりRaynaud現象，四肢末端のチアノーゼ，網状皮斑，寒冷蕁麻疹，紫斑などを呈する．腎糸球体にクリオグロブリンによって生じた免疫複合体が多量に沈着すると糸球体腎炎を引き起こし蛋白尿，血尿，ネフローゼ症候群などを呈する．その他，関節痛，筋痛，末梢神経障害，腹痛，消化管出血，肝脾腫などをきたす．

Bence Jones蛋白

著者：藤田清貴

ページ範囲：P.144 - P.146

検査の概要
　Bence Jones蛋白（BJP）は，免疫グロブリンの遊離のL鎖が単一クローン性に出現したものであり，56〜60℃の熱処理で混濁し，100℃付近で再溶解する特異な熱凝固性を示す蛋白質をいう．L鎖は分子量が約22,000であるが，BJPのほとんどは二量体として合成・分泌され，単量体や稀に四量体のものも存在する．四量体のものは腎糸球体膜を通過しにくいが，それ以外は分子量が小さいので尿中に排出されやすい．
　尿中BJPの定性法としてPutnum法が用いられているが，この方法はBJPの等電点が酸性側に多いことから，尿を酸性（pH 4.9）下で熱試験を行う．しかし，BJPの等電点には多様性があり，またBJP以外のほかの蛋白成分の混在などにより判定が困難になる場合が少なくない．BJPの同定法としては免疫電気泳動法，免疫固定電気泳動法のような免疫学的な方法がより確実である．BJPの場合，IgG，IgA，IgM，IgD，IgEの各H鎖特異抗血清とはまったく反応せず，L鎖の抗κまたは抗λ鎖抗血清のどちらか一方とのみ反応するM蛋白として観察される（図1）．

免疫グロブリン遊離L鎖κ/λ比

著者：増田亜希子

ページ範囲：P.148 - P.149

検査の概要
　形質細胞はBリンパ球がさらに分化した細胞であり，免疫グロブリンを産生する．形質細胞内ではH鎖とL鎖が別々に産生され，これらが結合して完全型免疫グロブリン（IgG，IgAなど）となり，細胞表面から分泌される．形質細胞内ではH鎖よりもL鎖のほうが多く産生されるため，血中にはH鎖と結合していないL鎖が少量存在している．H鎖と結合していないL鎖を遊離L鎖（free light chain：FLC）と呼ぶ．
　免疫グロブリン遊離L鎖κ/λ比（free light chain ratio：rFLC）は，ネフェロメトリー法により血清中の遊離κ鎖およびλ鎖を測定し，κ/λ比を算出する検査である．多発性骨髄腫（multiple myeloma：MM）などの形質細胞腫瘍の場合，遊離κ鎖もしくはλ鎖どちらか一方が増加するため，κ/λ鎖比が大きく変化する．一方，感染症や自己免疫疾患などの場合，κ/λ鎖比はほとんど変化せず基準値内に収まる¹⁾．rFLC測定は，従来から用いられている免疫電気泳動や免疫固定法に比べて高感度のM蛋白検出法であり，高免疫グロブリン血症の鑑別診断や，形質細胞腫瘍の診断，予後予測，治療効果判定などに用いられる．

可溶性IL-2レセプター

著者：増田亜希子

ページ範囲：P.150 - P.151

検査の概要
　IL-2レセプター（IL-2R）はα鎖（CD25），β鎖（CD122），γ鎖（CD132）の3つのサブユニットで構成されている．IL-2Rは増殖シグナル伝達などに関わっている．
　可溶性IL-2レセプター（sIL-2R）は，IL-2Rα鎖の一部が可溶型となって血中に遊離したものである．IL-2Rα鎖はリンパ球の活性化に伴って発現することから，sIL-2Rの血清中濃度は，活性化リンパ球の細胞数や増殖の勢いを反映する．そのため，臨床的にはリンパ腫の腫瘍マーカーとして用いられている．sIL-2Rは非Hodgkinリンパ腫，成人T細胞白血病/リンパ腫（adult T-cell lymphoma/leukemia：ATLL）の診断や経過観察に有用である．一方で，リンパ球が活性化されるさまざまな疾患（自己免疫疾患やウイルス感染症など）でも高値となることがあり，非特異的である点に注意が必要である．

肺線維化マーカー(KL-6，SP-A，SP-D)

著者：田中康隆 , 滝澤始

ページ範囲：P.152 - P.154

検査の概要
　血清KL-6，SP-A，SP-D値は，主としてⅡ型肺胞上皮細胞の傷害により上昇し，特発性間質性肺炎（idiopathic interstitial pneumonias：IIPs）をはじめとする間質性肺炎全般の血清マーカーとして，広く日常臨床で用いられている．IIPsの臨床診断基準（第四次改訂）では，「KL-6，SP-A，SP-D，LDHのうち，1項目以上の上昇」が診断項目の1つに挙げられている¹⁾．また間質性肺炎の疾患活動性の指標としても有用であり，特発性肺線維症（idiopathic pulmonary fibrosis：IPF）においては，予後を予測しうるマーカーとしても知られている．間質性肺炎の診断は，特に画像・病理診断において，しばしば医師の熟練度に影響を受けやすく，客観性のある血清バイオマーカーが，広く一般臨床医にも補助診断として有用と思われる．
　KL-6の測定法としては，酵素免疫測定法（enzyme immunoassay：EIA）や電気化学発光免疫測定法（electrochemiluminescence immunoassay：ECLIA），化学発光酵素免疫測定法（chemiluminescent enzyme immunoassay：CLEIA）およびラテックス凝集比濁法などが開発されており，EIA法，ECLIA法，ラテックス凝集比濁法によるものが保険適用となっている．ラテックス凝集比濁法は検体前処理が不要で，測定時間が10分程度と短時間であるため，院内検査であれば，診察前検査を当日の診療に反映することが可能である．SP-A，SP-DはEIA法で測定に数時間を要し，多くの施設で外部の検査機関に委託している．

骨代謝マーカー—DPD，NTX，CTX，TRACP-5b，BAP，OC，P1NP，ucOC

著者：荒井誠 , 竹内靖博

ページ範囲：P.155 - P.158

検査の概要
　骨は常に代謝を続ける組織であり，骨吸収と骨形成からなるリモデリングによりその恒常性が維持されている．骨の状態の評価法の1つに骨密度測定がある．骨密度は成人となってからその時点までの骨代謝の合算，いわゆる積分値であり，必ずしも現在の骨代謝状態を評価する指標とはならない．一方，骨代謝マーカーはその時点での骨代謝回転を反映した，いわゆる微分値であり，現在の骨代謝を評価する有効な手段となる．
　骨代謝マーカーを大別すると，骨吸収を反映した骨吸収マーカー，骨形成を反映した骨形成マーカー，および骨質に関連した骨マトリックス関連マーカーに分けられる．これらのマーカーは骨折リスクとの関連が明らかにされている．特に骨吸収マーカー高値は骨密度とは独立した骨折リスクであるとされている．

炎症マーカー，感染マーカー

CRP(C反応性蛋白)

著者：松尾収二

ページ範囲：P.159 - P.161

検査の概要
　感染症や組織障害を炎症と総称するが，この炎症の主なマーカーとして，白血球とその分類，赤沈，血清蛋白分画およびC反応性蛋白（CRP）がある．CRPは，Caイオンの存在下で肺炎球菌のC多糖体と免疫沈降する物質であり，血清アミロイド蛋白（SAA），α1-アンチトリプシン，ハプトグロビン，フィブリノーゲンなどとともにacute phase protein（急性期蛋白）と称される．
　炎症では，単球・マクロファージが活性化され，白血球などの細胞浸潤，血管透過性の亢進がみられるが，それらの発現を促すのが単球・マクロファージから産生されるTNF-α（tumor necrosis factor-α），IL-1（interleukin 1），IL-6などのサイトカインであり，これらが肝細胞でのCRP産生を促す．特にIL-6の作用が大きい．

赤沈(赤血球沈降速度)

著者：松尾収二

ページ範囲：P.162 - P.163

検査の概要
　赤血球沈降速度は赤沈あるいは血沈と呼ばれ，古くより炎症性疾患のスクリーニング的診断やモニターに頻用されている．赤沈は抗凝固剤を加えた血液を専用の管に入れて垂直に立て，赤血球の沈降に伴って出現する血漿層の厚さを測定する検査である．測定条件によって値が変わるため一定の方法で測定する．国際血液学標準化委員会（ICSH）はEDTA血を用いる方法を推奨しているが，わが国ではICSHが過去推奨していたWestergren法が広く普及している．具体的には3.28％クエン酸ソーダ0.4mLと血液1.6mLを混合したものを内径2.5mmのWestergren管に吸引し垂直に立て，1時間後の血漿の層の厚さを読み取る．
　最近は，専用の採血管をそのまま血沈管として用いることで血液汚染を防ぎ，30分値からWestergren法の1時間値を推定する装置など，短時間で多数の検体を測定する自動血沈測定装置が普及している．

プロカルシトニン，プレセプシン

著者：遠藤重厚

ページ範囲：P.164 - P.166

検査の概要
　WHOの報告によると世界中の死亡原因の約25％が敗血症である．敗血症に併発する臓器不全は救急・集中医療領域において治療が長引く要因の一つで，保健医療の大きな負担となっている．したがって，生化学的/免疫学的マーカーをモニタリングし，早期診断をし，適切な治療を迅速に行うことが必要である．感染症（敗血症）診断には，以下に示すことが望まれる．①感度および特異度が高い，②感染と非感染を区別できる，③予知能がある，④重症度を反映する，⑤生物学的に筋が通っている，⑥操作が簡便である．
◆プロカルシトニン（procalcitonin：PCT）
　PCTの生理学的役割と産生部位はいまだ完全には理解されていないのが現状である．敗血症時には，PCTはほとんどすべての甲状腺外組織で産生されることが証明されている．PCTは重症細菌感染の診断に役立つだけでなく，その重症度指標ともなる非常に興味深いマーカーである（図1）¹⁾．血清を用いたイムノクロマトグラフィ法による半定量法と化学発光酵素免疫測定法による定量法がある．

エンドトキシン

著者：遠藤重厚

ページ範囲：P.168 - P.169

検査の概要
　エンドトキシン（lipopolysaccharide：LPS）はグラム陰性桿菌性敗血症の病態生理学における一次性誘発物質である．したがって，エンドトキシンは重要なモニタリング指標とみなされる．
　エンドトキシン定量法として知られるリムルステストの名はアメリカ産カブトガニの学名Limulus polyphemusから由来している．このテストは，カブトガニ血球が微量のエンドトキシンで凝固する現象が契機となり開発された¹⁾．カブトガニ血球の抽出液（ライセート）に存在するC因子がエンドトキシンの受容体であり，これは哺乳動物の補体のC1sやC1qとの構造類似性が明らかにされている．エンドトキシンと結合するC因子は活性化C因子となる．活性化C因子はB因子を活性化し，活性化B因子は凝固酵素前駆体に作用して凝固酵素に変換する．これが，コアグローゲン（哺乳類のフィブリノーゲンに相当）に作用し，不溶性のコアグリン（フィブリンに相当）を形成する．これがリムルステストのゲル化法と呼ばれるもので，開発当初から敗血症患者の血中エンドトキシンの定量法として用いられるようになった．

β-D-グルカン

著者：遠藤重厚

ページ範囲：P.170 - P.171

検査の概要
　重篤な基礎疾患を有する患者あるいは侵襲の大きい周術期の患者に対して，必然的に集学的治療を行う結果，抗菌薬，免疫抑制剤，ステロイド剤などの長期投与，中心静脈栄養あるいは血液浄化法時のカニューラ類の使用などにより易感染性に陥り，深在性真菌症を合併することが少なからずみられる．
　深在性真菌症を合併するような病態においては，汎発性血管内凝固症候群，急性呼吸不全症候群さらには多臓器不全症などに進展し，治療に難渋することが多く，このような重篤な病態への進行を予防するためにも深在性真菌症の早期診断が必要である．

カルプロテクチン

著者：佐藤宏和 , 穂苅量太

ページ範囲：P.172 - P.173

検査の概要
　カルプロテクチンは好中球や単球，マクロファージから放出されるS100A8（別名calgranulin A, myeloid-related protein 8：MRP8）とS100A9（別名calgranulin B, myeloid-related protein 14：MRP14）という2つの蛋白質の複合体である．カルプロテクチンは炎症下では上皮細胞において誘導されることが知られており，便中カルプロテクチンは消化管障害の新たなマーカーとして注目されている．近年，潰瘍性大腸炎やCrohn病といった炎症性腸疾患と過敏性腸症候群の鑑別に対する有用性が報告されている．さらにこれらの炎症性腸疾患における再燃や治療効果などの判定に対する有用性についても検討されており，特に大腸に病変の主座を有する潰瘍性大腸炎の活動性の評価に有用であるとの報告がある．
　便中カルプロテクチンはenzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）法で測定されるが，2014年11月1日現在国内では保険適用となっておらず，ELISAが可能な施設であれば検査キットを購入して測定することができるが，通常は検査会社に依頼して測定する必要がある．非侵襲的に検体を採取できることに加え，糞便中のカルプロテクチンは室温で7日間安定であり検体の取り扱いが簡便であることも利点の1つである．

窒素化合物，腎機能検査

BUN(血中尿素窒素)

著者：広浜大五郎 , 下澤達雄

ページ範囲：P.174 - P.175

検査の概要
　血中尿素窒素（BUN）は，血液中に含まれる尿素量を表し，血清の除蛋白成分のなかの窒素成分の総称である非蛋白窒素（NPN）の約50％を占める．経口摂取した蛋白や組織蛋白の分解産物であるアンモニアは，そのままでは神経毒性を有するため，肝で尿素サイクルの代謝を受けて尿素に変換される．尿素のほとんどは腎糸球体で濾過されて尿中に排泄されるが，その一部は尿細管で再吸収され血中に戻される．すなわち，BUNは，①蛋白摂取，異化亢進，②肝臓での尿素合成，③腎での排泄機能の影響を受ける．日常診療では腎機能の指標として広く利用されているが，BUNのみで腎機能障害を評価してはならない．腎機能以外では，循環血漿量減少，蛋白異化亢進，蛋白摂取量増加などの場合にも病態の補助診断として用いられている．

尿酸

著者：神保りか , 下澤達雄

ページ範囲：P.176 - P.178

検査の概要
　尿酸は，DNAやRNAなどの核酸の構成要素や高エネルギー化合物であるアデノシン三リン酸（ATP）などを合成供給するプリン体代謝経路でプリン体の最終分解産物として生成する．尿酸値測定は急性関節炎の鑑別，尿路結石症の鑑別，プリン体代謝異常や腎機能障害の診断に有用な検査である．測定方法はウリカーゼ・ペルオキシダーゼ法が一般的である．検体の取扱は冷蔵保存で約1週間，凍結保存で長期間安定である．

アンモニア

著者：神保りか , 下澤達雄

ページ範囲：P.180 - P.181

検査の概要
　アンモニア（NH₃）は食事に含まれるアミノ酸の腸管細菌による脱アミノ化，消化管への分泌液に含まれる尿素の腸内細菌および腸管粘膜のウレアーゼによる分解，肝臓・腎臓におけるグルタミナーゼによるグルタミンの脱アミノ反応などで産生される．そのほか，アンモニアは，骨格筋や脳でも産生される．アンモニアのほとんどは腸管で吸収されて，門脈血中を肝臓に輸送され，尿素サイクルで尿素に変換（解毒）され，尿素は腎より尿中に排泄される．
　アンモニアは高濃度になると神経毒性を持ち，アンモニア中毒の症状としては，無気力，振戦，不明瞭言語，視力不鮮明，嘔吐，昏睡，死などがある．血中アンモニア濃度測定は臨床的には意識障害の鑑別，肝性脳症や肝硬変，劇症肝炎の病態把握に重要な検査である．

クレアチニン，クレアチン

著者：宮川太郎 , 和田隆志

ページ範囲：P.182 - P.184

クレアチニン
検査の概要
　クレアチニンは，筋肉へ取り込まれたクレアチンの通常約2％から不可逆的に生成される．そのため，血清クレアチニン値は筋肉に含まれるクレアチン量と比例する．
　血中へ放出されたクレアチニンは，腎外での排泄や尿細管での再吸収・分泌がほとんどなく糸球体から濾過される（ただし，わずかに近位尿細管から分泌される）．したがって，血清クレアチニン値は腎機能のおおよその指標とされる．

Ccr(クレアチニンクリアランス)

著者：相良明宏 , 古市賢吾 , 和田隆志

ページ範囲：P.185 - P.187

検査の概要
　クリアランスとは，物質が単位時間あたりどれくらい血液から除去されるかを示す指標である．腎クリアランス低下は，腎での物質の除去能低下を表し，腎機能の障害を示唆する．
　クレアチニン（Cr）は主として腎糸球体から排泄される内因性物質である．Crは分子量が113であり，糸球体基底膜を自由に通過し，血清Cr値が高値でない限り尿細管からは再吸収されない．しかしながら，尿中Crの約10〜15％は尿細管より分泌されるため，イヌリンクリアランス（C_in）による真の糸球体濾過量（glomerular filtration rate：GFR）よりもクレアチニンクリアランス（Ccr）は高値となる．しかし，Crは比較的安定的に測定可能であることから，CcrはGFRの近似として用いられる．

シスタチンC，ペントシジン

著者：篠﨑康之 , 古市賢吾 , 和田隆志

ページ範囲：P.188 - P.191

シスタチンC
検査の概要
　血清シスタチンCは分子量13.3kDaの低分子蛋白である．全身の有核細胞から一定量が産生され，腎臓の糸球体を通過する際にそのほとんどが濾過されて尿中に排泄される．そのため，シスタチンCは腎機能，すなわち糸球体濾過量（glomerular filtration ratio：GFR）の評価に用いられている．
　従来から腎機能の評価として用いられている血清クレアチニンは，筋肉に含まれるクレアチンから非酵素的に産生されるため，筋肉量の影響を考慮する必要がある．またクレアチニンはシスタチンCと同様に糸球体での濾過により尿中に排泄されるが，一部は尿細管からも尿中に分泌される．シスタチンCは筋肉量による影響は受けず，尿細管での分泌や再吸収による影響も少ない．これまでの報告によると，クレアチニンよりもシスタチンCを用いた腎機能評価のほうが，特に早期の腎機能低下を鋭敏に検出する．慢性腎臓病は末期腎不全および心血管イベントのリスク因子であることが知られているが，クレアチニンよりもシスタチンCを用いた推算GFR（eGFR）による腎機能評価のほうが，これらのリスクを正確に評価できる¹⁾．

酵素，肝機能検査

LD(乳酸デヒドロゲナーゼ)とそのアイソザイム

著者：前川真人

ページ範囲：P.192 - P.194

検査の概要
　乳酸デヒドロゲナーゼ（LD）は解糖系最終段階の酵素で，すべての細胞に存在する．細胞の可溶性分画に存在するため，細胞の傷害時に直接もしくはリンパを通って間接的に血管内に流入する逸脱酵素である．したがって，大多数の細胞傷害で血清LD活性が上昇するため，非常に感度のよい体内での異常の発信シグナルであり，初診時のスクリーニング検査として重要な役割を示す．
　LD活性は，ほとんどの施設で，日本臨床化学会（JSCC）勧告法に準拠したJSCC標準化対応法によって測定されている．乳酸を基質として用い，NAD（nicotinamide adenine dinucleotide）が還元され生成するNADHを340nmの増加で連続的に捉える方法である．

AST(GOT)，ALT(GPT)

著者：野村文夫

ページ範囲：P.195 - P.196

検査の概要
　aspartate aminotransferase（AST）とalanine aminotransferase（ALT）は，それぞれaspartic acidとalanineのα-アミノ基をケトグルタール酸のα-ケト基に転移する酵素であり，トランスアミナーゼと総称される．以前はASTはGOT，ALTはGPTと呼ばれていた．
　両酵素ともきわめて多くの臓器に存在するが，組織中のAST濃度が最も高いのは肝臓であり，次いで心臓，骨格筋，腎，脳，膵，肺，白血球，赤血球の順である．ALT濃度も肝臓で最も高く，肝特異性はALTのほうがASTよりも高い．肝胆道疾患のスクリーニングや経過観察の目的で用いられることが多いが，特にASTは心疾患，筋疾患，溶血性疾患においても上昇する．ASTは肝細胞では細胞質（sAST）とミトコンドリア（mAST）に存在する．健常人血中では大部分がsASTであり，通常はmASTが上昇するのは重度の肝障害の場合である．

ALPとそのアイソザイム

著者：清宮正徳 , 野村文夫

ページ範囲：P.197 - P.198

検査の概要
　アルカリフォスファターゼ（ALP）はアルカリ性下でリン酸モノエステルを加水分解する酵素である．細胞膜の外側に結合しており，活性の中心にZnイオンを有し，Mgイオンによって活性化される．
　血漿（清）中ALP活性の測定は，4-ニトロフェニルリン酸を基質とし，ALPによって生成される4-ニトロフェノールを測定する方法が用いられている．血清またはへパリン血漿で測定が可能だが，EDTA血漿はZnイオンやMgイオンがキレートされ活性が極端に低下するため検体として不適である．

γ-GT(γ-グルタミルトランスフェラーゼ)，LAP(ロイシンアミノペプチダーゼ)

著者：野村文夫 , 澤部祐司

ページ範囲：P.199 - P.201

γ-GT
検査の概要
　γ-グルタミルトランスフェラーゼ（γ-GT）はγ-グルタミル基をもつペプチドからグルタミル基をほかのペプチドやアミノ酸に移す酵素である．肝，腎，膵，脾，脳，腸など多くの臓器に存在しているが，血中の酵素蛋白は主に肝由来と考えられる．
　血清γ-GTの異常高値が診断のきっかけとなる病態として，最も有名なのはアルコールの過剰摂取による上昇である．禁酒によりγ-GTが低下することはアルコール性肝障害診断基準における重要な一項目であり¹⁾，完全に禁酒すると2〜3週後には前値の50％程度に改善する．また，γ-GTはアルカリフォスファターゼ（ALP），ロイシンアミノペプチダーゼ（LAP）とともに胆道系酵素と呼ばれ，肝内・肝外の胆汁うっ滞により上昇する．これら3酵素のなかで胆汁うっ滞の検出率はγ-GTが最も高いとされている．ただし，遺伝性肝内胆汁うっ滞のなかにはγ-GTが上昇しないタイプもある．中年女性が健診におけるγ-GTの異常高値をきっかけに原発性胆汁性肝硬変と診断されるケースも少なくない．

コリンエステラーゼ(ChE)

著者：榎奥健一郎

ページ範囲：P.202 - P.203

検査の概要
　コリンエステラーゼ（cholinesterase：ChE）はコリンエステル類を加水分解する酵素であり，生体内にはアセチルコリンエステラーゼとブチリルコリンエステラーゼの2種類がある．
　アセチルコリンエステラーゼは神経組織や赤血球に存在し，アセチルコリンをコリンと酢酸に分解する．アセチルコリンは運動神経や副交感神経の末端から放出される神経伝達物質である．神経末端から放出されたアセチルコリンはアセチルコリンエステラーゼにより速やかに分解される．毒ガスの一種である神経ガスはアセチルコリンエステラーゼを阻害し，アセチルコリンを分解・除去できなくしてしまう．その結果，神経伝達が阻害され筋肉が正常に動けなくなる．症状としては瞳孔収縮，痙攣などが生じ，さらに進むと呼吸筋が動かなくなり窒息に至る．アセチルコリンエステラーゼは真性コリンエステラーゼと呼ばれることもある．

ICG試験(インドシアニングリーン試験)

著者：榎奥健一郎

ページ範囲：P.204 - P.205

検査の概要
　ICG（インドシアニングリーン）とは暗緑色の色素であり，静脈投与すると肝細胞に取り込まれて，抱合などの代謝を受けずに胆汁中に排泄される．肝外排泄はほとんどない．また腸肝循環もしない．静注してから一定時間後の色素の血中停滞率（retention rate）から肝機能を推定する．一般的には15分後の血中停滞率（R15）が用いられることが多い．ICG試験の結果は，単位時間あたりの肝血流量，肝細胞の血中からのICG摂取能力，肝細胞の胆汁中へのICG排泄能力を反映しているが，ICGは肝臓の初回通過で大部分が取り込まれるため肝血流量が最も影響している．
　肝血流量は摂食状況や運動で変化するため，ICG試験は早朝空腹時に安静臥位で行う．体重1kgあたり0.5mgのICGを注射用蒸留水で5mg/mL程度に希釈し，肘静脈より30秒以内に症状に注意しながら徐々に静脈注射する．採血は反対側の肘静脈から行う．ICGは光に不安定なので採血後の血清には光が当たらないようにする．

ビリルビン

著者：榎奥健一郎

ページ範囲：P.206 - P.207

検査の概要
　ビリルビンは主に赤血球ヘモグロビンの代謝分解物であり肝臓で胆汁へ排泄される．ゆえに，その総和である総ビリルビンを調べることで赤血球の分解亢進，肝機能障害，胆道閉塞などの異常を検出することができる．脾臓で赤血球が分解されるとヘモグロビンも分解され，ヘムは非抱合型ビリルビンになる．非抱合型ビリルビンは水に溶けないためアルブミンと結合して肝臓へと送られる．非抱合型ビリルビンは，間接ビリルビンとも呼ばれる．肝臓においてビリルビンはグルクロン酸抱合を受け，水に溶けるようになる．抱合型ビリルビンは胆汁中に排泄される．抱合型ビリルビンは，直接ビリルビンとも呼ばれている．
　非抱合型ビリルビン（間接ビリルビン）は光により分解しやすいので，採血後速やかに測定する必要がある．保存血清で測定する場合には血清を遮光冷凍しておく．

Ⅳ型コラーゲン，ヒアルロン酸

著者：池田均

ページ範囲：P.208 - P.209

検査の概要
　ウイルス，アルコール，薬剤，過栄養，自己免疫機序などの原因にかかわらず，肝臓への障害が継続（慢性化）すると，これに対する創傷治癒機転が持続するため，肝臓には線維成分が沈着し線維化をきたす．線維化が高度に及ぶと肝硬変症となり，肝機能の低下，門脈圧亢進症などにより予後不良の病態となる．すなわち，線維化の程度の把握は診療上，重要である．また，わが国で慢性肝臓病の原因として最も頻度の高いC型肝炎においては，治療法の進歩によりウイルスを排除し完治を目指すことが可能となってきたが，一般に線維化が進んだ症例では，治療効果が低いことが明らかとなっている．したがって，C型肝炎の治療効果を推定するためにも線維化の診断は重要となっている．この肝線維化の程度を判断するための血液中マーカーとして頻用されているのがⅣ型コラーゲン，ヒアルロン酸である．
◆感度・特異度
【ヒアルロン酸】肝臓の線維化に最も特異的であり，特に進展した肝線維化の診断に有用とされるが，線維化を伴う肝疾患以外にも，関節リウマチ，変形性関節症などの関節障害を伴う疾患や，強皮症，皮膚筋炎，血管炎などの膠原病関連疾患，悪性リンパ腫，乳癌などの悪性腫瘍でも上昇する．また，腎臓でも代謝されるため，腎不全でも上昇することが知られている．

アミラーゼとそのアイソザイム

著者：村木崇 , 川茂幸

ページ範囲：P.210 - P.212

検査の概要
　アミラーゼは，でんぷんをデキストリン，マントース，ブドウ糖に分解する消化酵素であり，膵臓，唾液腺のみならず，肝臓，腎臓，心臓，肺，卵巣，横紋筋，乳腺，甲状腺など，体内に広く分布する酵素である．血中アミラーゼの由来は主に膵臓と唾液腺であり，それぞれの臓器特異的なアイソザイムがある．血中アミラーゼは，腎臓から尿中に排泄されて血中ではほぼ一定の値を示す．
　性差はなく，運動の影響，日内変動も認めない．また，健常者の場合は，食事の影響も認めない．血中アミラーゼは，Body Mass Index（BMI）に影響を受け，BMI高値のほうが高値を示し，同一人物でも体重減少により血中アミラーゼの低下を認める．しかし，基準値を逸脱するほどの大幅な変動ではない．

リパーゼ，エラスターゼⅠ，トリプシン

著者：村木崇 , 川茂幸

ページ範囲：P.213 - P.215

検査の概要
　膵酵素の検査項目には，アミラーゼ，アミラーゼアイソザイム，リパーゼ，トリプシン，エラスターゼⅠ，PLA2，PSTⅠなどがある．
　リパーゼ，エラスターゼⅠ，トリプシンは，いずれも膵腺房細胞で合成され膵液中に分泌される消化酵素である．膵腺房細胞障害により血中に逸脱し血清値は高値を示す．いわば，膵腺房細胞障害マーカーである．これらはいずれも，血中アミラーゼと比較して膵に特異性が高い．いずれの酵素も日内変動や食事の影響は少なく，溶血の影響は認められない．

心筋マーカー—心筋型脂肪酸結合蛋白，ミオグロビン，トロポニンT，トロポニンⅠ，ミオシン軽鎖

著者：石井潤一

ページ範囲：P.216 - P.218

検査の概要
　心筋傷害（壊死）という病態を反映する心筋マーカーには，心筋型脂肪酸結合蛋白，ミオグロビン，心筋トロポニン（ⅠおよびT）やミオシン軽鎖などがある．心筋マーカーは，急性心筋梗塞の早期診断，梗塞サイズの評価や予後の推定などに用いられる．特に，トロポニンは，急性冠症候群疑い患者における急性心筋梗塞の早期診断とリスク層別化に不可欠な検査項目である．
　2009年7月に，トロポニンの最小検出感度を従来（標準）測定より10倍以上改善した高感度測定が登場した．高感度測定はトロポニン値の低濃度域を正確に測定できるため，急性心筋梗塞の基準値（健常者の99パーセントタイル値）を引き下げ，急性心筋梗塞発症早期の診断感度を大幅に改善した．一方，急性冠症候群以外の病態に起因する心筋傷害をも鋭敏に検出するため，診断特異度は著しく低下した．したがって，高感度測定値を解釈する際には従来測定値以上に，トロポニン値の上昇（異常）は心筋傷害の存在を意味するが，必ずしも急性心筋梗塞ではないことを銘記しておく必要がある．

CK(クレアチンキナーゼ)とそのアイソザイム

著者：石井潤一

ページ範囲：P.219 - P.221

検査の概要
　クレアチンキナーゼ（CK）はアデノシン三リン酸（ATP）のリン酸基をクレアチンに転移する反応（高エネルギーリン酸の貯蔵）と，クレアチンリン酸のリン酸基をアデノシン二リン酸（ADP）に転移する反応（ATPの再産生）を触媒する酵素で，エネルギー代謝における重要な役割を果たしている．心筋，骨格筋や脳に多量に存在するため，これらの組織に細胞障害（壊死）が生じると血中に遊出し，血清CK活性は上昇する．
　CKはM型（筋型）とB型（脳型）の2種類のサブユニットからなる2量体で，分子量は82kDaである．細胞上清分画にはCK-MM，CK-MBとCK-BBの3つのアイソザイムが，ミトコンドリア分画にはミトコンドリアCKが存在する．CK-MBは骨格筋に比較して心筋に多量に存在するため，その心筋特異性は高い．CK-MBの迅速測定法にはMサブユニット活性だけを阻害する免疫阻害法と，特異的抗体を用いてCK-MBを蛋白量として測定する免疫学的測定法（CK-MB蛋白量測定）があるが，急性心筋梗塞の早期診断にはより心筋特異性の高いCK-MB蛋白量測定を活用するべきである¹⁾．なお，異常CKの解析には電気泳動法を用いる．

ALD(アルドラーゼ)

著者：石井潤一

ページ範囲：P.222 - P.224

検査の概要
　アルドラーゼ（aldolase：ALD）は解糖系酵素の一員であり，フルクトース-1，6-2-リン酸（FDP）をジヒドロキシアセトンリン酸（DHAP）とD-グリセルアルデヒド-3-リン酸に分解する反応とともに，フルクトース-1-リン酸（FIP）をDHAPとD-グリセルアルデヒドに分解する反応を触媒する¹⁾．骨格筋，心筋，肝や脳に多量に存在する細胞質内酵素であるため，これらの組織に障害が生じると血中に流出し，血清ALD活性は上昇する．
　ALDは4種類のサブユニットからなる4量体で，分子量は150kDaである．A（筋）型，B（肝）型およびC（脳）型の3種のアイソザイムがある．心筋梗塞，骨格筋障害，悪性腫瘍ではA型が，肝疾患ではB型が，脳血管障害ではA型とC型が上昇してくるため，アイソザイム分析は診断に有用である．しかしながら，血清アイソザイム分析は現在行われていない²⁾．

ADA(アデノシンデアミナーゼ)

著者：涌井昌俊

ページ範囲：P.226 - P.227

検査の概要
　アデノシンデアミナーゼ（ADA）は核酸代謝におけるアデノシンからイノシンへの脱アミノ反応を触媒する酵素で，プリンのサルベージ代謝経路に関与する¹⁾．ADA1とADA2の2種のアイソザイムがあり，ADA1はさまざまな組織に，ADA2は主に単球・マクロファージおよび一部のT細胞に発現している．血中のADA活性は，これらのアイソザイムの組織・細胞からの逸脱・放出に由来するが，大半はADA2である．
　ADA1は分子量40kDaのADA-Sと分子量280kDaのADA-Lの2つのフォームがある．ADA-LはADA-Sと結合蛋白の複合体であり，ADA1の大半を占める．その結合蛋白はCD26であることが近年明らかにされ，ADA-Lは酵素活性のみならず，細胞表面上に存在して共刺激分子として作用することが知られており，特に免疫機能に重要である．ADA1をコードするADA遺伝子はヒト20番染色体q12-q13.11領域に位置し，その先天的異常によるADA欠損症は重症複合免疫不全症（SCID）の約20％を占める²⁾．このADA1欠損は，大半がADA2由来である血中ADA活性には反映され難いことに留意する必要がある．

酸性ホスファターゼ(ACP)

著者：涌井昌俊

ページ範囲：P.228 - P.230

検査の概要
　酸性ホスファターゼ（ACP）はリン酸モノエステルの加水分解酵素のうち，至適pHが4.5〜6.0と酸性側にある酵素の総称である．前立腺で大量に生成される前立腺酸性ホスファターゼ（PAP）が血中のACPの多くを占めている．酵素活性として検出される血中ACPの増加は，前立腺疾患に伴うPAPの逸脱に由来する可能性が示唆される¹⁾．しかし，ACPは前立腺以外のさまざまな組織でも生成されており，それらの疾患に伴う逸脱による血中増加の可能性を考慮して鑑別する必要がある．
　PAPの酵素活性は酒石酸により阻害されるが，それ以外のACPの酵素活性は基本的に酒石酸抵抗性を呈する．この差異を利用してPAPを検出・測定することができるが，chemiluminescent enzyme immunoassay（CLEIA）やenzyme immunoassay（EIA）などの免疫学的検査法でも測定可能である．

糖代謝検査

グルコース

著者：窪田直人

ページ範囲：P.231 - P.234

検査の概要
　グルコース（ブドウ糖）は，エネルギー源として生体組織，細胞の機能維持に重要な物質の一つである．食後，腸管より吸収されたグルコースはその約10％が肝臓に，残りの90％は大循環に入り骨格筋や脂肪組織に取り込まれる．一方，絶食時には肝臓よりグリコーゲン分解や糖新生によりブドウ糖が放出される．これらの作用はインスリンやそれと拮抗するホルモン（グルカゴン，コルチゾール，カテコラミン，成長ホルモンなど），インスリン分泌増強作用を有する消化管ホルモン（インクレチン）などにより精密にコントロールされているため，血中グルコース濃度はほぼ一定の状態で維持されている．
　血中グルコース濃度（血糖値）の測定は，糖尿病の診断・治療を行っていくうえで必要不可欠な検査である．近年測定は簡便に行われるようになってきているが，測定原理や方法をよく理解し，誤差が生じうることを念頭に置きながら評価する必要がある．

HbA1c(グリコヘモグロビン)

著者：窪田直人

ページ範囲：P.235 - P.237

HbA1cの国際標準化に伴う表記法の変更
　わが国で汎用されてきたJapan Diabetes Society（JDS）値のHbA1cは，わが国以外のほとんどの国で使用されているNational Glycohemoglobin Standardization Program（NGSP）値と比較すると約0.4％ほど低値であるという乖離が以前より指摘され，特に英文誌の原著論文や国際学会の発表において問題となっていた．日本糖尿病学会ではこの問題に対し「糖尿病関連検査の標準化に関する検討委員会」を立ち上げ，2010年7月1日より，まず英文誌や国際学会における発表においてNGSP相当値（国際標準値：JDS値＋0.4）を使用することとした．一方で日常臨床においては混乱を避けるためJDS値が使用され続けた．その後2011年10月1日，検査医学標準物質機構（ReCCS）がJDS値を決める指定比較法であるKO500法で，NGSPの基準測定施設であるアジア地区secondary reference laboratory（SRL）の認証を取得した．それによりJDS値とNGSP値との関係が「NGSP値（％）＝1.02×JDS値（％）＋0.25％」という換算式で表現できることが確定したことを受け，診療報酬の改定に合わせて2012年4月1日よりNGSP値が日常臨床に初めて導入された．移行期間としてJDS値との併記が行われたが，2014年4月1日よりわが国のHbA1cの表記はすべてNGSP値に統一された．

グリコアルブミン

著者：武井泉

ページ範囲：P.238 - P.239

検査の概要
　グリコアルブミン（glycoalbumin：GA）はアルブミン分子中のリジンが糖化された糖化蛋白である．アルブミンが肝臓で生成されて代謝される間血糖値に応じて，高ければ多量のGAが，低ければ少量のGAが生成される．そのためGAの多寡により約17日間（アルブミンの半減期）の血糖状態を把握することができる．詳細な検討によればGAは過去約2カ月間の血糖状態を反映するが，主として1カ月間，特に直近2週間の血糖状態によりその多寡が決定される¹⁾．

尿中アルブミン

著者：武井泉

ページ範囲：P.240 - P.241

検査の概要
　尿中アルブミン（Alb）は主に糖尿病の腎機能低下の評価として用いられている検査であるが，そのほかにも慢性腎臓病（chronic kidney disease：CKD）疾患，動脈硬化性疾患（脳梗塞，虚血性心疾患）の評価として利用しうる検査である．
　尿中Albは糖尿病腎症病期分類，CKD重症度分類に関連して臨床的に用いられている指標である．

1,5-AG(1,5-anhydroglucitol)

著者：山内俊一

ページ範囲：P.242 - P.244

検査の概要
　血清（血中）1,5-AGは血糖変動に迅速かつ鋭敏に反応する血糖コントロール指標である．HbA1cより血糖の動向が正確に捉えられるため，治療の開始や中止時の血糖変化のモニターに適する．特に，HbA1cが7％台以下で変化の幅がきわめて大きいため，食事や運動療法の成果を正確に捉えうる．また，食後高血糖の把握に優れるため，食後高血糖改善薬の効果判定も明確で，服薬遵守度も判明する．
　HbA1cの0.1％程度の変化が広く拡大されるため，誤差範囲か否か峻別される．糖尿病では，HbA1cが5％台で安定していても1,5-AGは不安定なことが多い．

インスリン，C-ペプチド

著者：山内俊一

ページ範囲：P.245 - P.247

インスリン
検査の概要
　血糖を下げる事実上ほぼ唯一のホルモンであるインスリンは，不足すれば高血糖や死を招く．一方過剰だと，肥満や低血糖の原因となる．すなわち，これらの病態の原因を探る際に測定される．ただし，食事による変動が大きいため，早朝空腹時の測定値および75g経口ブドウ糖負荷試験（75gOGTT）時の値のみが通常用いられる．
　以前は放射性物質を用いた免疫学的測定法であったが，現在は化学発光物質を用いている．また，モノクローナル抗体の使用により，プロインスリンとの交差反応はなくなり，インスリンのみを測定している．測定値はIRI（immunoreactive insulin）と呼ばれる．検体は血清，血漿のいずれでもよい．－20℃で長期間安定である．

抗インスリン抗体

著者：松村卓郎 , 谷澤幸生

ページ範囲：P.248 - P.249

検査の概要
　インスリン抗体とは，インスリンに対して体内で産生された抗体である．
　インスリン抗体には投与を受けた外来性インスリン（ウシ，ブタあるいはヒトインスリン）に対して産生されたインスリン抗体（IA）と自己のヒトインスリンを抗原としたインスリン自己抗体（IAA）の2種類がある．インスリン治療中の糖尿病患者で，予想以上に多くのインスリンを必要とする場合や，予期しない血糖変動（著しい高血糖や低血糖を繰り返す）がみられる場合，インスリン自己免疫症候群が疑われる低血糖症の患者，1型糖尿病の補助診断などの目的で測定される．

抗GAD抗体

著者：末冨吏佐 , 谷澤幸生

ページ範囲：P.250 - P.252

検査の概要
　グルタミン酸脱炭酸酵素（glutamic acid decarboxylase：GAD）は，抑制性神経伝達物質であるガンマアミノ酪酸（γ-aminobutyric acid：GABA）をグルタミン酸より合成する酵素である．主としてGABAニューロンの神経終末に存在しているが，膵Langerhans島β細胞にも存在している．GADにはGAD65（分子量65kDa）とGAD67（分子量67kDa）という分子量の異なった2つのisoformが存在している．脳・神経組織ではGAD65，GAD67がともに存在しているが，β細胞ではGAD65がほとんどを占めている．
　GADに対する自己抗体が抗GAD抗体である．現在わが国で広く検査されているのは，GAD65に対する抗体である．検体としては血清・血漿（クエン酸Na，フッ化Na，ヘパリンNaの採血管）が用いられる．検査方法として，リコンビナントヒトGAD65を抗原として用いるラジオイムノアッセイ法（radio immuno assay：RIA）が使用されている．これは，Immunology of Diabetes Workshop（IDW）において行われたGAD antibody proficiency testの結果，RIA法がほかの測定法と比較して感度・特異ともに優れていることが示されたことによる．

抗インスリン受容体抗体

著者：末冨吏佐 , 谷澤幸生

ページ範囲：P.253 - P.254

検査の概要
　血糖降下ホルモンであるインスリンは，細胞膜表面でチロシンキナーゼ共役型レセプターの1つであるインスリン受容体と結合し，細胞内へのグルコースの取り込みやグリコーゲン合成シグナル伝達の開始を指示する役割を担っている．
　インスリン受容体が正常に機能しない疾患として「インスリン受容体異常症」には，インスリン受容体遺伝子の異常であるA型と，後天的なインスリン受容体抗体の出現によるB型が知られている（表1）．

血中ケトン体

著者：窪田直人

ページ範囲：P.255 - P.257

検査の概要
　ケトン体は，遊離脂肪酸の肝での代謝産物であり，主に筋肉，心臓，脳で利用される．肝臓はケトン体を産生するのみで利用はできない．ケトン体とは，3-ヒドロキシ酪酸，アセト酢酸，アセトンの総称である．
　絶食が長期化すると血漿中のケトン体が上昇し，ブドウ糖の濃度より高くなる．これは，肝の貯蔵グリコーゲンの枯渇により肝の脂肪酸からケトン体への産生速度が増すことによる．肝に取り込まれた遊離脂肪酸はアセチルCoAとなり，その一部はミトコンドリアに入りβ酸化を受けアセ卜酢酸が生成され，さらに3-ヒドロキシ酪酸脱水素酵素によって還元され3-ヒドロキシ酪酸となる．肝ではケトン体は代謝されず，末梢組織（筋肉，脳，心臓，腎臓など）に取り込まれ，アセト酢酸はアセチルCoAに転換され，TCAサイクルで代謝されエネルギー源として利用される．アセトンは揮発性で呼気に排出されやすい（図1）．ケトン体の合成過程はグルカゴンにより亢進し，インスリンにより抑制される．

乳酸，ピルビン酸

著者：窪田直人

ページ範囲：P.258 - P.261

検査の概要
　血液中の乳酸濃度は成人で4〜16mg/dLであり，高値を示す場合は臨床上問題となる．乳酸は解糖系代謝経路の最終産物で，主に骨格筋や赤血球，脳，皮膚，腸管でピルビン酸から乳酸脱水素酵素（lactate dehydrogenase：LDH）の作用により生成される．グルコース→ピルビン酸→乳酸産生経路は，グルコースを酸素なしに酸化する（ATPを産生する）うえで重要である．グルコースからピルビン酸への代謝過程で2分子のNAD⁺がNADH＋Hに変換される．解糖を継続するためには恒常的にNAD⁺が必須であるが，嫌気的条件下では通常ミトコンドリアにおいて認められるNADH＋H酸化によるNAD⁺再生が起こらないためLDHによる乳酸の産生によりNAD⁺を得ることとなる．
・ピルビン酸＋H⁺＋NADH←→乳酸＋NAD⁺
　一方，好気的代謝条件下では乳酸の大半はピルビン酸に酸化され肝臓の糖新生の基質として利用され，肝臓での十分な処理能力のため乳酸が高値を示すことはない（cori回路，図1）．乳酸は，血中では1価の陰イオン有機酸として存在し，酸塩基平衡に重要な役割を演じている．

脂質・リポ蛋白

総コレステロール，LDLコレステロール，HDLコレステロール

著者：平山哲 , 三井田孝

ページ範囲：P.262 - P.264

検査の概要
　総コレステロール（TC）とLDLコレステロール（LDL-C）の上昇，HDLコレステロール（HDL-C）の低下は，動脈硬化性疾患の発症や進展と密接に関係している．よって，これらの検査は，動脈硬化や冠動脈疾患のスクリーニング検査としてだけでなく，病態評価や治療のための臨床検査指標として頻用されている¹⁾．
　米国のFramingham studyの報告では，TCが180〜200mg/dLの場合に最も総死亡率が低いJ-curve現象を認める．しかし，コレステロール低値の場合には，低栄養や悪性疾患などによる死亡が影響している可能性がある．一方，TCが180mg/dL以上の場合，冠動脈疾患の発症は直線的に増加する．また，LDL-CもTCと同様に冠動脈疾患のリスクと強く関連する．欧米の報告では，LDL-Cが1mg/dL増加すると，一次および二次予防ともに冠動脈疾患の発症リスクが約1〜2％程度増加する．LDL-Cへの介入効果を検討したメタ解析（108のランダム化比較試験による約30万人が対象）では，治療によるLDL-C 10mg/dLの減少は，冠動脈疾患イベント，冠動脈疾患死亡，総死亡の相対リスクを有意に減少させることが明らかになっている²⁾．

TG(トリグリセライド)

著者：三井田孝

ページ範囲：P.265 - P.267

検査の概要
　TGは，3価のアルコールであるグリセロールに脂肪酸が3つエステル結合したものの総称で，正式にはトリアシルグリセロール（TAG）と呼ばれる．血中には，わずかだが遊離グリセロールと，脂肪酸が1または2個しか結合していないモノアシルグリセロール（MAG），ジアシルグリセロール（DAG）がある．血液中のTGは，コレステロール，リン脂質，アポ蛋白と結合して二層性のリポ蛋白を形成する．TGは，疎水性が強いためリポ蛋白の「芯」に存在する．TGは，粒子径の大きなリポ蛋白［カイロミクロンと超低比重リポ蛋白（VLDL）］に多く分布する．
　わが国のTG測定法では，まず遊離グリセロールを消去し，残ったMAG，DAG，TAGをリポ蛋白リパーゼ（LPL）で分解し，産生されたグリセロールを測定する．これを，トリオレイン（グリセロールにオレイン酸が3つエステル結合したもの）に換算し，TG値として報告している．

リポ蛋白分画

著者：野尻卓宏 , 蔵野信

ページ範囲：P.268 - P.271

検査の概要
　コレステロールや中性脂肪などの疎水性の強い脂質は，そのままの状態では血液中に溶解できないため，親水性の強いリン脂質などの脂質や蛋白質とともにリポ蛋白という粒子を形成し，血液中を運搬されている．リポ蛋白は比重により定義されており，低比重のものからカイロミクロン，VLDL，IDL，LDL，HDLに分類されるが，日常臨床ではIDLとLDLは広義のLDLにまとめて扱われる．リポ蛋白分画は脂質代謝の全体像を概観するのに有用であるため，高脂血症のWHO分類に利用されており，脂質異常症の診断に重要な検査項目として，特にⅢ型高脂血症の判定には必須となる．
　リポ蛋白の分画方法にはさまざまな方法が存在するが，リポ蛋白は比重により定義されているため，比重の違いでリポ蛋白を分画する超遠心法が最も定義に沿った分画方法とされる．実際，米国疾病管理センター（CDC）では，LDLコレステロールの基準法として，超遠心法と沈殿法を組み合わせた方法（beta quantification法：BQ法）を採用している．しかし超遠心法は所要時間や必要な検体量の点で他法よりも劣るため，日常検査としては，荷電状態，粒子サイズなどの物性がリポ蛋白の種類により異なるということを利用した電気泳動法が用いられている．電気泳動法は，リポ蛋白をpre-βリポ蛋白，βリポ蛋白，αリポ蛋白に分け，それぞれVLDL，LDL，HDLに相当する．また，近年，高速液体クロマトグラフィ（HPLC）を用いてリポ蛋白を分画する新しい方法が保険収載された．以下，各方法について概説する．

アポ蛋白分画

著者：野尻卓宏 , 蔵野信

ページ範囲：P.272 - P.274

検査の概要
　コレステロール，中性脂肪などの疎水性の強い脂質は血液中に溶解できないため，親水性の高いリン脂質のような脂質や蛋白質とともにリポ蛋白という粒子を形成し，血液中を運搬されている．リポ蛋白に存在する蛋白質は，アポリポ蛋白あるいはアポ蛋白と呼ばれ，リポ蛋白の構造蛋白としての役割，およびリポ蛋白受容体のリガンドやリポ蛋白代謝に関わる酵素活性の修飾因子として，リポ蛋白代謝の調節を担う役割がある．そのためアポ蛋白遺伝子の欠損または変異は，原発性脂質異常症の原因となる．またアポBやアポA-Ⅰは，限られたリポ蛋白上に存在するため，そのリポ蛋白の粒子数を反映する指標となる．以上よりアポ蛋白の測定は，原発性脂質異常症の原因探索および脂質異常症全般の管理目的に用いられる．
　現在，日常診療において測定できるアポ蛋白には，アポA-Ⅰ，アポA-Ⅱ，アポB，アポC-Ⅱ，アポC-Ⅲ，アポEの6項目がある．これらのアポ蛋白は免疫比濁法を測定原理とする方法で測定されている．またアポEの特定のフェノタイプは原発性脂質異常症や神経変性疾患の危険因子であるため，保険適用外ではあるが等電点電気泳動法によるアポEフェノタイプの判別が行われることがある．これらの項目はすべて血清検体で測定が可能である．また検体の保存条件は冷蔵が推奨されているが，蛋白であるため，リポ蛋白の測定とは異なり，冷凍検体でも測定できる．

Lp(a)［リポプロテイン(a)］

著者：蔵野信

ページ範囲：P.276 - P.277

検査の概要
　Lp（a）［リポプロテイン（a）］は，LDLと同様に動脈硬化巣への沈着が確認されており，動脈硬化症の新規危険因子として注目されているリポ蛋白である．その構造はLDLと類似しているが，LDLのコアアポ蛋白であるアポ蛋白B100に，アポ蛋白（a）［apo（a）］がジスルフィド結合している．Lp（a）は，apo（a）とLDLがクリングルという環状構造を形成し，このクリングルの繰り返し回数により多くのフェノタイプ（20種類以上）が存在する．そのため，分子量は100〜800kDaと幅が広い．
　Lp（a）の動脈硬化性疾患の病態生理へのかかわりは，まだ完全には確立されていないが，Lp（a）は酸化されると，酸化LDLと同様にスカベンジャー受容体によりマクロファージに取り込まれ，泡沫化され，動脈内膜に沈着する．また，Lp（a）の構成成分であるapo（a）は，プラスミノーゲンとの相同性が高く，プラスミノーゲンと競合し，プラスミンを低下させ，血栓形成に促進的に働いているとされる．その他，平滑筋細胞増殖作用，物性として酸化リン脂質を結合しやすいなどさまざまな動脈硬化促進作用が報告されている．

電解質・微量金属・浸透圧

Na，K，Cl

著者：林松彦

ページ範囲：P.278 - P.280

検査の概要
　血清・尿中Na，K，Cl濃度は基本的な生化学的検査であり，スクリーニング検査として，あるいはさまざまな症状に対して検査される．測定方法はいずれも，イオン電極法という方法を用い，試薬による発色といった手順はなく，電極により直接測定される．したがって，正確な意味では測定しているものは各イオン濃度である．疾患としては，低Na血症，高Na血症，高K血症，低K血症が臨床上問題となることが多く，Cl濃度の異常は，酸・塩基平衡異常の指標として用いられる．いずれも，通常は自動分析器により測定され，機器により，ある一定の希釈倍率で希釈された検体が用いられる．このため，後述する偽性低Na血症を生じる場合がある．

Ca，P

著者：林恭秉 , 竹内靖博

ページ範囲：P.281 - P.283

検査の概要
　血清カルシウム（Ca）と無機リン（P）の濃度は，副甲状腺ホルモン（PTH），活性型ビタミンDである1,25水酸化ビタミンD，線維芽細胞増殖因子23（FGF23）などの内分泌因子がそれぞれの標的臓器に作用することで制御されている．PTHは腎でのCa再吸収を促進し，P排泄を促進すると同時に骨から細胞外液への両者の動員を促進する．1,25水酸化ビタミンDは主に腸管からの両者の吸収を促進する．FGF23は腎臓からのPの排泄を促進する．
　血清中のCaのうち約40％はアルブミンを主体とする蛋白と結合している．生化学自動分析装置で得られる結果は，イオン化Caと蛋白結合Caの総和である．測定には，クレゾールフタレインコンプレクソン法・メチルキシレノールブルー法・酵素法などが用いられる．

マグネシウム

著者：大和梓 , 竹内靖博

ページ範囲：P.284 - P.285

検査の概要
　マグネシウム（Mg）は体内で4番目，細胞内で2番目に多い陽イオンである．細胞内における多くの酵素反応の活性化，蛋白合成および筋神経系の興奮伝達などに関与し，生体内の代謝調節や細胞機能の維持に重要である．体内Mg含有量は21〜28gであり50〜60％は骨に，20％は筋肉内に存在し細胞外液内に存在するのは1％に過ぎない．
　Mg濃度の測定法として酵素法，色素法，原子吸光法が挙げられる．酵素法はイソクエン酸脱水素酵素などの酵素活性が検体中のMg濃度に依存することを利用し，酵素反応の生成物の吸光度の増加量より検体中のMg濃度を決定する方法で，特異性が高く多検体処理が可能である．色素法の1つであるキシリジルブルー法は，試料中のMgがアルカリ条件下においてキシリルアゾバイオレットと結合して赤色のキレート化合物を形成することを利用し，この吸光度よりMg濃度を測定する方法である．原子吸光法はMg濃度測定において最も正確な測定法である．

銅

著者：小倉彩世子 , 下澤達雄

ページ範囲：P.286 - P.287

検査の概要
　銅は，銅酵素の重要な構成成分として骨代謝，結合織代謝，造血などに重要な役割を果たしている．銅欠乏の所見は銅酵素の活性低下と関連づけられる（表1）．
　銅蛋白質の働きとしては，大きく3つに分けられる．①造血能に関与（セルロプラスミンがFe^2＋→Fe^3＋の酸化反応を触媒），②オキシダーゼ作用〔チトクローム酸化酵素として電子伝達系への関与・スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）の酸化反応への関与〕，③銅酵素構成（チロシンをメラニンに変換するチロシナーゼ反応）など，生命の維持に重要な機能を担っている．

亜鉛

著者：広浜大五郎 , 下澤達雄

ページ範囲：P.288 - P.289

検査の概要
　亜鉛（Zn）は必須微量元素として生体内のあらゆる組織に存在して，DNAポリメラーゼ，RNAポリメラーゼ，アルカリフォスファターゼ（ALP）など300種類以上の酵素や，サイトカイン，ホルモンに含まれ，生体の構造や機能を維持するために必須の微量元素である．蛋白質生合成などに関与し，骨格の発育，皮膚代謝，生殖機能，味覚・嗅覚の維持，免疫機能など，正常な生命維持に不可欠な役割を担っている．Zn欠乏は微量元素欠乏のなかで最も頻度が高いため重要である．通常は血清，尿が測定対象となる．

フェリチン，血清鉄と鉄結合能

著者：辻岡貴之 , 通山薫

ページ範囲：P.290 - P.293

フェリチン
異常値の出るメカニズムと臨床的意義
　体内の鉄貯蔵量を調べるために最も信頼性の高い検査は肝生検で得られた組織中の鉄濃度測定と考えられている．しかし，この検査は侵襲を伴い合併症のリスクを考慮すると安易に行うべき検査ではない．最近，欧米ではMRIを用いた肝鉄濃度測定法が開発され普及してきている．一方，日常臨床では血清フェリチン値が簡便に測定できる鉄貯蔵マーカーとしてよく利用されている．フェリチンは鉄を結合して貯蔵するための蛋白で，肝・脾・骨髄・胎盤などの組織に広く分布しておりその分布量は概ね血清中濃度と相関する．

血漿浸透圧

著者：林松彦

ページ範囲：P.294 - P.295

検査の概要
　血漿浸透圧は，血漿中電解質と，尿素窒素，グルコースなどの血漿成分により規定される．浸透圧はモル濃度により規定されるので，血漿中のモル濃度が高いNa，Cl，重炭酸，グルコース濃度が，主に寄与している．凝固点降下度測定法に基づいて測定する浸透圧計を用いるのが一般的である．検体として血漿を用いるので，ヘパリンまたはEDTAを入れた容器に血液を取り，血漿分離して測定する．

血液ガス分析

pH，HCO₃^-，base excess，PaCO₂，PaO₂，SaO₂

著者：諏訪部章

ページ範囲：P.296 - P.299

検査の概要
　臨床上，血液ガス測定を考慮するのは，①急性および慢性呼吸不全の診断と治療経過の評価，②人工換気時や在宅酸素療法時の適正な酸素投与量や換気条件の設定，③神経・筋疾患による呼吸筋力の評価〔換気不全で動脈血二酸化炭素分圧（PaCO₂）上昇〕，④原因不明の意識障害の原因検索などである．
　動脈穿刺によってヘパリン採血された動脈血が検体となる．採血後は十分な混和，混入空気の除去，密閉後，即時測定を行う．動脈血酸素分圧（PaO₂），PaCO₂，pHは電極法によって直接測定され，酸素飽和度（SaO₂），重炭酸イオン濃度（HCO₃^-），過剰塩基（base excess：BE）は計算によって求められる．

ビタミン

ビタミンB₁₂，葉酸

著者：橋詰直孝 , 佐藤裕子

ページ範囲：P.300 - P.301

検査の概要
　ビタミンB₁₂，葉酸はビタミンB₆と共役して正常な造血に働く．表1に示す欠乏症や欠乏状態の時，ビタミンB₁₂と葉酸はともに巨赤芽球性貧血症，高ホモシステイン血症をきたすので鑑別の時に検査する．
　ビタミンB₁₂と葉酸の測定法は，従来，競合的蛋白結合を利用したRI法が行われていたが，近年，化学発光免疫測定（CLEIA）法がある．また葉酸の測定法は，液体クロマトグラフ質量分析（LC/MS/MS）法がある．検体はビタミンB₁₂，葉酸ともに空腹時採血，血清保存は当日なら室温（遮光）で，1日なら冷蔵（4℃），長期保存は冷凍（－80℃）である．特に注意すべきことは，ビタミンB₁₂，葉酸でEDTA血漿は高値に出る．葉酸は溶血すると赤血球中の葉酸の影響で高値に出る．

ビタミンA，B₁，B₂，B₆，D，E

著者：橋詰直孝 , 佐藤裕子

ページ範囲：P.302 - P.304

検査の概要
　欠乏症や欠乏状態を表1に示した．ビタミンA，Dは過剰症がある．欠乏状態や，過剰状態を疑ったときに施行する検査である．
　測定法は表1に示すが，ビタミンB₁は国際的には高速液体クロマトグラフィー（HPLC）法から液体クロマトグラフ質量分析（LC/MS/MS）法に移行しつつある¹⁾．

薬物関連検査血中薬物濃度

抗てんかん薬，向精神薬

著者：岡島由佳

ページ範囲：P.306 - P.307

検査の概要
　てんかん患者の治療では，抗てんかん薬の血中薬物濃度測定（therapeutic drug monitoring：TDM）が不可欠である．指標となる治療有効濃度範囲は，効果発現閾値（下限値）と急性副作用発現濃度（上限値）の幅を，多数の症例についてみた統計学的数値である．そのため，発作抑制効果や副作用の出現について測定値が臨床的判断に先行するものではないが，抗てんかん薬の用量の決定に際し，重要な指標となる．
　向精神薬で現在TDMが可能なものは，気分調整薬である炭酸リチウム，抗精神病薬であるハロペリドール（HPD），ブロムペリドール（BPD）である．精神科領域ではバルプロ酸ナトリウム（VPA），カルバマゼピン（CBZ），ジアゼパム，クロナゼパムは抗てんかん薬であるだけではなく，気分調整薬，抗不安薬としても用いられている．

強心薬

著者：山口諒 , 山本武人 , 鈴木洋史

ページ範囲：P.308 - P.309

検査の概要
　強心薬のなかで，血中薬物濃度測定が一般的に行われている薬剤はジゴキシンのみである．ジゴキシンは有効血中濃度域が狭いため，きわめて厳密な血中濃度コントロールを必要とする．しかしながら，ジゴキシンの体内動態は個体差が大きく，剤形によりバイオアベイラビリティが異なることが知られている．また，多くの薬物と相互作用を起こし，血中濃度，薬剤感受性が変動する．そのため，TDM（therapeutic drug monitoring）による濃度測定・投与量調整が有効な薬剤である．
　特に，小児においては成長とともに体内動態が大きく変化する．例えば，ジゴキシンの半減期は新生児期では35〜70時間であるが，生後1年では15〜30時間となり，また，同時期の小児の体重当たりの分布容積は成人の1.5〜2倍程度であることが知られている．そのため，小児期，なかでも新生児期は最もTDMが必要な時期であると言える．

抗菌薬

著者：山口諒 , 山本武人 , 鈴木洋史

ページ範囲：P.310 - P.311

検査の概要
　血中薬物濃度測定に基づいて投与量を設定することを薬物治療モニタリング（therapeutic drug monitoring：TDM）と呼び，抗菌薬のなかでも特にTDMの実施が望ましい薬物として，アミノグリコシド系抗菌薬（ゲンタマイシン，アミカシン，トブラマイシン，イセパマイシン，アルベカシン）やグリコペプチド系抗菌薬（バンコマイシン，テイコプラニン），ボリコナゾールが挙げられる．
　抗菌薬のTDMにより，有効かつ副作用を生じない範囲で濃度をコントロールすることで，感染症の治癒のみならず，菌の耐性化を極力回避することが可能となる．したがって，抗菌薬適正使用の観点から，これらの抗菌薬を使用する際には可能な限り，TDMに基づき治療方針を決定していくことが望ましい．

免疫抑制薬

著者：中澤勇一

ページ範囲：P.312 - P.314

検査の概要
　血中濃度を測定し投与量を調節する免疫抑制薬として，シクロスポリン（cyclosporine A：CYA），タクロリムス（tacrolimus：TAC），エベロリムス（evelorimus：EVR），ミコフェノール酸モフェチル（mycophenolate mofetile：MMF）などが挙げられる．
　現在，EVR，MMFは臓器移植（EVR：心・腎移植，MMF：心・腎・肺・肝・膵移植）後の拒絶反応の抑制のみに適応が認められているが，CYA，TACは臓器移植のみならずそれ以外のさまざまな病態・疾患（CYA：眼症状のあるBehçet病，再生不良性貧血など，TAC：全身性重症筋無力症，重症関節リウマチなど）にも適応を有している．

薬物感受性遺伝子検査，薬剤リンパ球刺激試験

ワルファリン治療関連遺伝学的検査—チトクロームP450(CYP)2C9遺伝子多型検査，ビタミンKエポキシド還元酵素C1サブユニット(VKORC1)遺伝子多型検査

著者：中谷中

ページ範囲：P.315 - P.317

検査の概要
　ワルファリンはビタミンK類似構造のクマリン誘導体で，ビタミンK代謝サイクルを阻害し，肝臓での再利用を抑制することにより，ビタミンK依存性凝固因子の活性化を阻害する．ワルファリンは抗凝固療法の基本的薬剤として高く評価されているものの，薬剤効果や副作用の個人差が大きいため，使い慣れていない医師にとってはやや使いづらいとも言われている．添付文書においても「成人における維持投与量は1日1回1〜5mg程度となることが多い」と投与量の個人差の大きいことが示唆されており，当院でも1〜10mg/日と個人差が大きいことを経験している．
　ワルファリンの作用が，その代謝酵素であるCYP2C9，および標的分子のVKORC1の遺伝子多型に大きく影響を受けていることが明らかになってきたため（図1），これらの解析を実施している．

Helicobacter pylori除菌関連遺伝子検査—pylori菌クラリスロマイシン耐性遺伝子検査，チトクロームP450(CYP)2C19遺伝子検査

著者：中谷中

ページ範囲：P.318 - P.320

検査の概要
◆pylori菌クラリスロマイシン耐性検査
　Helicobacter pylori菌（以下，pylori菌）のクラリスロマイシン耐性は，その作用標的であるpylori菌23S rRNA遺伝子のdomain Vにおける変異に由来する．最も多くみられる変異は，2063番目のアデニン（A）のグアニン（G）への変異，そのほかに2064番目のAがGへ変異した株も認められている．これらの変異があると，クラリスロマイシン耐性であることがわかる．
◆CYP2C19遺伝子多型検査
　pylori菌療法は，プロトンポンプ阻害薬とアモキシシリンとクラリスロマイシンを用いることになっている．これらの薬剤血中濃度が除菌の成功に関わっていると考えられている．なかでも，プロトンポンプ阻害薬の血中濃度は，その代謝酵素であるCYP2C19の活性に依存すると考えられている．CYP2C19の酵素活性は，CYP2C19遺伝子多型と強い相関があり，遺伝子多型検査が，薬剤の効果予測に有用であることが知られている¹⁾．CYP2C19には8種類のアレル（^＊1〜8）が報告されている．^＊1は正常の代謝活性を示し，そのほかの^＊2〜8は代謝能がないと考えられている．1,002人の日本人を対象としたわれわれの検討では，日本人では^＊4〜8は認められず，アレル^＊1，^＊2，^＊3は図1のような頻度で認められた．

免疫抑制薬関連遺伝学的検査—チトクロームP450(CYP)3A5遺伝子多型検査

著者：中谷中

ページ範囲：P.321 - P.323

検査の概要
　肝移植，腎移植など臓器移植後には免疫抑制療法が必要であり，免疫抑制薬として，ステロイドに替わりカルシニューリン阻害薬を用いることが中心となってきている．カルシニューリン阻害薬はイムノフィリンに結合して，その複合体がカルシニューリンを阻害する．タクロリムスとシクロスポリンの2剤があるものの，その使い分けは採用されているレジメンや医師の経験に依存することが多い．当院では生体肝移植後の免疫抑制療法にはタクロリムスを用いるレジメンを採用しており，血中トラフ値を10〜15ng/mLに維持するように投与量を調整している．
　ある時，タクロリムス血中濃度が十分に上昇せず，投与量を数倍増量することを余儀なくされる症例が見いだされた．タクロリムスはヒト体内で肝臓や消化管に存在するチトクロームP450（CYP）3A4，CYP3A5，MDRにより代謝・排泄されることが明らかとなっている．CYP3A4，CYP3A5にはそれぞれ遺伝子多型が存在することが知られ，特にCYP3A5がタクロリムスの薬物動態に影響を与えることが報告されている¹⁾．

がん薬物療法関連—(UGT1A1，TPMT，DPD)

著者：加藤有紀子 , 安藤雄一

ページ範囲：P.324 - P.326

検査の概要
　薬物代謝酵素の遺伝子多型検査は，薬物代謝能や治療反応性の評価の指標となり，患者ごとの最適な薬物の選択と投与量の調節を行うことにより，薬効を最大限に引き出すとともに副作用を軽減できる．現在，薬物代謝酵素の遺伝子診断で保険適用となっているのは，UDP-グルクロン酸転移酵素（UDP-glucuronosyltransferase：UGT）1A1の遺伝子診断のみであるが，ここではがん薬物療法関連遺伝子として，チオプリンS-メチル基転移酵素（thiopurine S-methyltransferase：TPMT）およびジヒドロピリミジン脱水素酵素（dihydropyrimidine dehydrogenase：DPD）についても，その概要と臨床的意義について述べる（表1）．

薬剤リンパ球刺激試験

著者：山口正雄

ページ範囲：P.327 - P.328

検査の概要
　薬剤を原因として何らかの異常反応が生じ，それが免疫を介する反応と推定される場合に行う．リンパ球幼若化検査において，薬剤を添加して培養を行う間に増殖する細胞が取り込む³H-チミジンを測定し，薬剤非添加での測定値と比較する（薬剤リンパ球刺激試験，drug lymphocyte stimulation test：DLST）．前者と後者の数値の比が一定の数値を越えていれば，薬剤特異的リンパ球の存在の傍証とする検査である．

内分泌学的検査下垂体

GH(成長ホルモン)

著者：三木伸泰 , 小野昌美

ページ範囲：P.330 - P.331

　下垂体ホルモンの分泌は，視床下部に存在する放出促進，または抑制ホルモンにより制御されている．このなかで成長ホルモン（GH）は，他の下垂体前葉ホルモンとは異なり，視床下部の2種のホルモン，すなわちGH放出促進ホルモン（GHRH）とGH放出抑制ホルモンSS（Somatostatin）により相反する制御を受けていることが大きな特徴である．さらに，GHには他のホルモンのように独立した標的臓器が存在しないことも特徴である．そこで，GHは肝臓や種々の組織に作用して成長因子の一つIGF-I（インスリン様成長因子-1）を産生し，このIGF-Iが小児ではいわゆる成長促進因子として，成長完了後は代謝調節因子として作用する．IGF-Iの血中濃度は主に肝臓由来で，思春期に最大となって18歳で成人の基準値に戻り，以後加齢とともに漸減する．

TSH(甲状腺刺激ホルモン)

著者：木村孝穂 , 村上正巳

ページ範囲：P.332 - P.334

検査の概要
　甲状腺刺激ホルモン（thyroid-stimulating hormone, thyrotropin：TSH）は下垂体前葉で合成・分泌される糖蛋白ホルモンである．αとβのサブユニットからなり，αサブユニットは黄体化ホルモン（luteinizing hormone：LH），卵胞刺激ホルモン（follicle stimulating hormone：FSH），胎盤性ゴナドトロピン（human chorionic gonadotropin：hCG）と共通である．TSHは甲状腺濾胞上皮細胞表面のTSH受容体に結合し，細胞の増殖，甲状腺ホルモンの合成と分泌を促進する．TSHはイムノアッセイで測定される^1，2)．

PRL(プロラクチン)，LH(黄体化ホルモン)，FSH(卵胞刺激ホルモン)

著者：小野昌美 , 三木伸泰

ページ範囲：P.335 - P.337

検査の概要
◆プロラクチン（PRL）
　血中PRLは日内変動を示し，夜間睡眠時に上昇する．また，性，年齢，月経周期，妊娠，授乳，産褥，ストレス，食事により変動する．男性より女性で，小児より成人でやや高く，月経周期の排卵期にやや高く，妊娠月数に伴い上昇，哺乳刺激で上昇し，産褥期に除々に低下する，また，ストレス，運動，食事により一過性に上昇する．採血は安静時にストレスを避け，できれば空腹時に行うのが望ましい．食後採血するなら少なくとも1時間以上おくべきである．血中PRL濃度は，測定キットにより最大2倍程度異なる（表1）．この乖離には，各社のキットで用いる標準品が異なることが大きく影響している．同一キット内の変動係数（CV％）は10％程度であるが，異なるキット間のCV％は20％程度に達する．
◆黄体化ホルモン（LH），卵胞刺激ホルモン（FSH）
　LH，FSHの血中濃度は，乳幼児期には高値を認め，その後低下し，思春期までは低値を示す．男女ともにLHは12歳頃より，FSHは10歳頃より上昇して成人レベルに達する．その後，LH，FSHの基礎値は，女性では閉経後に，男性では60歳以降にさらに上昇する．女性の月経周期との関連ではLH，FSH共に排卵期に上昇し，黄体期は卵胞期より低値を示す．また，LHはパルス状に分泌される（律動的分泌/パルス状分泌：pulsatile）．LH，FSH値は日内変動，日差変動があるため，複数回測定すべきである．LH，FSHの測定はnon RIA法を用いた数社のキットがあり，同一キット内の変動係数（CV）は5％以下と良好で，異なるキット間のCVは10％程度である．

ACTH(副腎皮質刺激ホルモン)

著者：庄司優

ページ範囲：P.339 - P.341

検査の概要
　副腎皮質刺激ホルモン（adrenocotricotropic hormone：ACTH）は下垂体前葉ACTH細胞から分泌されるポリペプチドホルモンで，副腎皮質のACTH受容体に結合し，コルチゾールの合成・分泌を促進する．メラニン色素合成も刺激する．ACTHは視床下部─下垂体─副腎皮質系の疾患の診断と病態の解明に重要な検査である．特に，Cushing症候群，下垂体前葉機能低下症，副腎皮質機能低下症の診断やステロイド治療下の副腎皮質の機能の推定に欠かせない．
　ACTHは，EDTA-2Na採血から遠心分離された血漿0.5mLを測定検体として二抗体法のECLIAにより迅速に測定される．

ADH(抗利尿ホルモン，バゾプレシン)

著者：庄司優

ページ範囲：P.342 - P.344

検査の概要
　抗利尿ホルモン（antidiuretic hormone：ADH）は視床下部で転写され下垂体後葉系から分泌されるペプチドホルモンで，腎集合管における水再吸収を促進し，体液量と血漿浸透圧を調節する．ADHの産生・分泌の障害は，水利尿をもたらし，脱水や高Na血症を引き起こす．反対に，ADHの分泌過剰は水再吸収を亢進させて進行性の低Na血症と水中毒をもたらす．このように，ADHは水電解質代謝異常症，特に尿崩症とADH分泌過剰症（syndrome of inappropriate secretion of antidiuretic hormone：SIADH）の診療に欠かせない重要な検査である．
　ADHは，EDTA-2Na採血から遠心分離された血漿2.2mLを測定検体として二抗体法によるRIA（radioimmunoassay：放射免疫測定法）で測定される．

甲状腺・副甲状腺

T₄(サイロキシン)，FT₄(free T₄)，T₃(3,5,3′-トリヨードサイロニン)，FT₃(free T₃)

著者：木村孝穂 , 村上正巳

ページ範囲：P.345 - P.347

検査の概要
　甲状腺ホルモンの合成・分泌は下垂体前葉から分泌される甲状腺刺激ホルモン（thyroid stimulating hormone：TSH）により調節されており，視床下部-下垂体-甲状腺系にネガティブフィードバック機構が存在する（TSHの項の図1 p332参照）．甲状腺から分泌される甲状腺ホルモンの98％がサイロキシン（T₄）であり，甲状腺ホルモン脱ヨード酵素の働きにより脱ヨードを受け，生理活性を有する3,5,3′-トリヨードサイロニン（T₃）に変換され甲状腺ホルモンとしての生理作用を発揮する．血中の甲状腺ホルモンの大部分は甲状腺ホルモン結合蛋白（thyroid hormone-binding protein：TBP）と結合している．TBPと結合していない甲状腺ホルモンが遊離型のfree T₄（FT₄），free T₃（FT₃）として存在する^1，2)．
　甲状腺機能検査としてはTBPの影響を受けない遊離甲状腺ホルモンであるFT₄，FT₃が測定される．FT₄はT₄の0.02％，FT₃はT₃の0.3％程度である^1，2)．

Tg(サイログロブリン)，TBG(サイロキシン結合グロブリン)

著者：日高洋

ページ範囲：P.348 - P.349

Tg（サイログロブリン）
検査の概要
　Tgは甲状腺濾胞腔に貯えられているコロイドの主成分である．Tgは健常人の血中にも存在するが，さまざまな甲状腺疾患では高値を示す．甲状腺の悪性腫瘍だけでなく良性腫瘍でも血中Tgが高値を示すため，血中Tg値だけでは良性・悪性の鑑別はできない．しかし，濾胞性腫瘍（濾胞癌or濾胞腺腫）において，血中Tgが1,000ng/mL以上を示す場合は濾胞癌の可能性が高いとの報告があるため，甲状腺に腫瘍を認めた場合には定期的に測定することが多い．また，甲状腺乳頭癌・濾胞癌で甲状腺を全摘したあとの腫瘍マーカーとしては非常に有用で，術後に血中Tg値が上昇してきた場合には癌の再発・転移を疑う．
　Tgは，血清を測定検体として，ECLIA法（電気化学発光免疫測定法）などの免疫測定法で測定される．ただし，抗サイログロブリン抗体（TgAb）が陽性の検体では，血中Tg値が偽低値を示すことがあるため，血中Tg測定時にはTgAbも同時に測定する．

抗サイログロブリン抗体

著者：日高洋

ページ範囲：P.350 - P.351

検査の概要
　びまん性の甲状腺腫を認める場合，あるいは甲状腺機能低下症の所見（FT₄低値）・症状（無気力，易疲労感，眼瞼浮腫，寒がり，体重増加，動作緩慢，嗜眠，記憶力低下，便秘，嗄声など）を認め，慢性甲状腺炎（橋本病）を疑ったときに抗サイログロブリン抗体（TgAb）を検査する．
　TgAbは，血清を測定検体として，ECLIA法（電気化学発光免疫測定法）などの免疫測定法で測定される．TgAbをPA法（粒子凝集反応）で測定した場合は，TgAb半定量（以前はサイロイドテストと呼ばれていた）と検査項目名で区別される．

抗甲状腺ペルオキシダーゼ抗体(抗甲状腺マイクロゾーム抗体)

著者：日高洋

ページ範囲：P.352 - P.353

検査の概要
　びまん性の甲状腺腫を認める場合，あるいは甲状腺機能低下症の所見（FT₄低値）・症状（無気力，易疲労感，眼瞼浮腫，寒がり，体重増加，動作緩慢，嗜眠，記憶力低下，便秘，嗄声など）を認め，慢性甲状腺炎（橋本病）を疑ったときに「抗甲状腺ペルオキシダーゼ抗体（TPOAb）ないし抗甲状腺マイクロゾーム抗体」を検査する．
　TPOAbは当初，甲状腺マイクロゾーム分画に反応する自己抗体として発見されたため，抗甲状腺マイクロゾーム抗体と呼ばれていた．TPOAbは，血清を測定検体として，ECLIA法（電気化学発光免疫測定法）などの免疫測定法で測定される．抗甲状腺マイクロゾーム抗体はPA法（粒子凝集反応）で測定され，検査項目名は抗甲状腺マイクロゾーム抗体半定量（以前はマイクロゾームテストと呼ばれていた）である．

TSHレセプター抗体

著者：常川勝彦 , 村上正巳

ページ範囲：P.354 - P.356

検査の概要
　甲状腺ホルモンの合成と分泌は，下垂体前葉から分泌されるTSHにより促進されるが，TSHは甲状腺濾胞上皮細胞に存在するTSHレセプターに結合して作用を発揮する．このTSHレセプターに対する自己抗体がTSHレセプター抗体であり，刺激型と阻害型の抗体がある．
　TSHレセプター抗体の測定には，以下の2通りの方法がある．

尿中総ヨウ素

著者：常川勝彦 , 村上正巳

ページ範囲：P.357 - P.359

　ヨウ素は海草類などの食品中に多く含まれ，食事により摂取されると腸管より吸収され，その多くは甲状腺に取り込まれる．体内の80％近くのヨウ素が甲状腺に存在し，甲状腺ホルモンの合成に用いられる．甲状腺ホルモンから遊離したヨウ素や甲状腺ホルモンの合成に用いられなかったヨウ素は90％以上が尿中に排泄される．

カルシトニン

著者：盛田幸司 , 江戸直樹 , 石川敏夫

ページ範囲：P.360 - P.362

検査の概要
　哺乳類において，カルシトニンは主に甲状腺傍濾胞細胞（C細胞）から分泌されるペプチドホルモンであり，32個のアミノ酸から構成される．カルシトニンは破骨細胞の骨吸収を抑制し，血中カルシウム（Ca）濃度を低下させる．だが，その生物活性はサケ鰓後腺由来のカルシトニンに比べると1/10以下と弱い¹⁾．脊椎動物は進化のなかでCaが豊富な海から陸地への上陸を果たすが，その過程でカルシトニン，ビタミンD以外の骨代謝調節因子としてPTHを獲得し，相対的にカルシトニンの生理的意義は低下した．よって本検査の目的は，Ca・骨代謝異常の鑑別診断ではなく，C細胞由来の癌である甲状腺髄様癌の腫瘍マーカーとしての役割に限定される．
　実際の測定は，早朝空腹時採血で得られる血清0.5mLで行う．

PTH(副甲状腺ホルモン)，PHTrP(副甲状腺ホルモン関連蛋白)

著者：江戸直樹 , 盛田幸司 , 石川敏夫

ページ範囲：P.363 - P.365

検査の概要
【副甲状腺ホルモン（PTH）】副甲状腺主細胞で合成・分泌されるペプチドホルモンで，84個のアミノ酸からなる．PTH分泌は副甲状腺細胞上のカルシウム感知受容体（CaSR）によって制御される．PTHの主な標的臓器は腎や骨で，PTH/副甲状腺ホルモン関連蛋白（PTHrP）受容体を介し作用する．腎尿細管ではCa再吸収促進とリン（P）再吸収抑制，ビタミンD（VitD）活性化作用を有する．骨では骨芽細胞と骨細胞に作用し，骨吸収活性化と骨形成促進をもたらす¹⁾．PTHは血中Ca濃度の恒常性維持に重要な役割を果たしている．
【PTHrP】PTHと類似構造をもち，PTH/PTHrP受容体を介しPTH様作用を発揮する．生理的には局所因子として作用し，妊娠・授乳などの特殊な状況を除いて血中には出現しない．PTHrPは悪性腫瘍で分泌される場合があり，悪性腫瘍による高Ca血症のなかのhumoral hypercalcemia of malignancy（HHM）の主因となる生理活性分子である．

副腎・腎

コルチゾール

著者：二川原健 , 大門眞

ページ範囲：P.366 - P.368

　ヒト糖質コルチコイドの代表であるコルチゾールは，血糖上昇作用，抗炎症作用，免疫抑制作用を有する．また，若干の鉱質コルチコイド作用や水利尿作用をもち，生体のホメオスタシス維持に不可欠なホルモンである．
　副腎皮質束状層で産生されるコルチゾールは，視床下部のコルチコトロピン放出ホルモン（CRH），さらにその下位ホルモンである下垂体の副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）からの合成・分泌刺激を受けている．逆にコルチゾールはCRHおよびACTHにネガティブフィードバックを及ぼす．この調節系により，平時では早朝に高く深夜に低い血中コルチゾールの日内リズムが形成され，感染や外傷などの身体的ストレス下では需要に応じたコルチゾールの分泌増加が起こる．精神的ストレスによっても容易に上昇する．

アルドステロン

著者：保嶋実

ページ範囲：P.369 - P.371

　アルドステロンは副腎皮質球状層で産生，分泌される強力な鉱質コルチコイドである．アルドステロンの主要な分泌調節因子はレニン・アンジオテンシン（renin angiotensin：RA）系であり，ほかに副腎皮質刺激ホルモン（adrenocorticotropic hormone：ACTH）やK濃度なども関与している．アルドステロンの主な標的器官は腎の遠位尿細管で，Na^＋とOH^－の再吸収とK^＋とH^＋の排泄に働き，体液や血圧の恒常性維持に重要な役割を果たしている．

レニン

著者：保嶋実

ページ範囲：P.372 - P.373

　レニンは腎傍糸球体細胞で産生，分泌される酵素である．レニン基質（アンジオテンシノゲン）に作用し，アンジオテンシンⅠ（angiotensin Ⅰ：AⅠ）を産生する．AⅠはアンジオテンシン変換酵素（angiotensin converting enzyme：ACE）によりAⅡに変換される．AⅡは血管平滑筋の収縮による昇圧と副腎からのアルドステロン分泌を介し，血圧・体液調節に重要な役割を果たしている．レニンの産生そして分泌から，AⅡに至る経路はレニン・アンジオテンシン（renin angiotensin：RA）系と呼称されており，レニンがこの系の律速酵素である．

血中・尿中カテコールアミン

著者：磯部和正

ページ範囲：P.374 - P.375

検査の概要
　カテコールアミンは副腎髄質や交感神経終末から放出されるホルモンである．褐色細胞腫腫瘍組織からも過剰に産生・放出され，高血圧や動悸などの症状を呈することになる．カテコールアミンの特徴は基本的に神経伝達物質であるので，作用後は速やかに再吸収・代謝・分解されるということである．すなわち，不安定な物質であるので測定には注意が必要である．
　カテコールアミンを産生する腫瘍には褐色細胞腫，神経芽腫，カルチノイドがあるが，診断に用いられるのは褐色細胞腫である．

尿中メタネフリン，尿中VMA

著者：磯部和正

ページ範囲：P.376 - P.377

検査の概要
　血中カテコールアミンの70％はカテコール-O-メチルトランスフェラーゼ（COMT）によってメトキシ化され，24％はモノアミン酸化酵素（MAO）によって脱アミノ化されるなどして代謝される．また，褐色細胞腫の腫瘍自体がCOMTを多く含み代謝物を産生している．したがって，メタネフリン，バニリルマンデル酸（vanillylmandelic acid：VMA；メタネフリンがさらに脱アミノ化された最終代謝産物）などのカテコールアミン代謝物の測定が重要となる．
　メタネフリン（MN）2分画には，メタネフリンとノルメタネフリン（NMN）があり，それぞれアドレナリン，ノルアドレナリンのOメチル誘導体である．血中メタネフリンには遊離型と抱合型があるがほとんどが抱合体であり，検査では抱合を加水分解して測定している．

性腺

hCG(ヒト絨毛性ゴナドトロピン)

著者：岩原由樹 , 久保田俊郎

ページ範囲：P.378 - P.379

　ヒト絨毛性ゴナドトロピン（human chorionic gonadotropin：hCG）は妊娠の成立，維持に重要な働きをする糖蛋白ホルモンであり，分子量は約37,000でα，β鎖の非共有結合により構成される異分子二量体である．α鎖は下垂体前葉から分泌される黄体ホルモン（LH），卵胞刺激ホルモン（FSH）のα鎖と免疫学的に同一のもので，構造もほぼ同様である．β鎖は145個のアミノ酸配列からなる分子量23,000の糖蛋白であり，LH, FSHなどのβ鎖とは異なっている．特にhCG-β鎖のC末端にはLHのβ鎖にないアミノ酸配列があり，hCGβ-CTP（carboxyl terminal peptide）と呼ばれている．

エストロゲン(エストラジオール，尿中エストリオール)，プロゲステロン

著者：岩原由樹 , 久保田俊郎

ページ範囲：P.380 - P.383

検査の概要
　エストロゲンは女性ホルモンまたは卵胞ホルモンと呼ばれる性ステロイドホルモンである．そのなかでエストロン（E₁），エストラジオール（E₂），エストリオール（E₃）がよく知られ，卵巣顆粒膜細胞で卵胞刺激ホルモン（FSH）の刺激によりアロマターゼ活性が亢進し，莢膜細胞より供給されたアンドロゲンからエストロゲンが産生される．
　その臨床的意義としては，①女性における第二次性徴や妊娠・出産をはじめとする生殖機能への関与，②骨代謝や心疾患系の機能調節における役割，③乳腺や子宮内膜などのエストロゲン標的臓器の増殖や癌化への関与など，非常に幅広い生理作用をもつ¹⁾．

テストステロン

著者：寺井一隆 , 堀江重郎

ページ範囲：P.384 - P.385

検査の概要
　テストステロンは男性では95％が精巣で産生される．下垂体から分泌される黄体形成ホルモン（lutenizing hormone：LH）が精巣間質細胞であるLeydig細胞に作用することにより，テストステロンが分泌される．男性の場合，小児期は生後4カ月まで3ng/mL程度を最高値とする一過性の上昇を認めるが，生後6カ月で0.03ng/mL程度に低下し，思春期までは低値を維持する．思春期の発来とともに，急激に成人男性レベルに達する．その後，20歳台をピークとして，加齢とともに緩やかに減少するが，女性の閉経のような大きな変化は認められない．女性においても卵巣で男性の約20分の1のテストステロンが産生されている．テストステロンは筋肉，骨，血管，脂質代謝，性機能など，広範な臓器の機能に関係することが知られている．また，男女とも副腎から微量のテストステロンが産生されている．
　血中テストステロンの約98％はsex hormone binding globulin（SHBG）との結合型テストステロン（SHBG-T）とアルブミンとの結合型テストステロン（Alb-T）であり，残りの2％が遊離テストステロンとして存在する．これらのうち，遊離テストステロンとAlb-Tがアンドロゲン生理活性を有することからbioavailable testosterone（BAT）と呼ばれている．近年問題となっている加齢男性性腺機能低下症（LOH症候群）の診療にはBATの測定が望まれるが，実地臨床では遊離テストステロンと総テストステロンの測定で十分であると考えられている．

そのほかのホルモン

ANP(A型ナトリウム利尿ペプチド)，BNP(NT-proBNP，B型ナトリウム利尿ペプチド)

著者：石井潤一

ページ範囲：P.386 - P.389

検査の概要
　A型ナトリウム利尿ペプチド（ANP）とB型ナトリウム利尿ペプチド（BNP）は心臓から分泌される心臓ホルモンである．グアニル酸シクラーゼ活性をもつ機能的受容体（NPR-A受容体）に結合し，ナトリウム利尿作用，血管拡張作用，レニン-アンジオテンシン-アルドステロン系や交感神経系の抑性作用，さらに心臓局所では心筋肥大や心筋線維化の抑制作用などの生理作用を発揮する．
　一方，N末端プロBNP（NT-proBNP）は76個のアミノ酸より構成されるペプチドである．BNPとNT-proBNPの生成は同じBNP遺伝子による．BNP遺伝子の転写・翻訳後，まずプロBNP（1-108）が生成される．プロBNPは心筋内で蛋白分解酵素corinによって，生理作用のあるBNP（77-108）と生理作用のないNT-proBNP（1-76）に分裂し，1：1の等モル比で血中に分泌される．

免疫学的検査アレルギー検査

IgE

著者：山口正雄

ページ範囲：P.392 - P.394

検査の概要
　IgE（immunoglobulin E）は，アレルギー性鼻炎や気管支喘息，アナフィラキシーといったⅠ型アレルギー疾患の発症に関わる重要な抗体である．血清IgE値はさまざまな抗原特異性をもつIgE抗体の総和であり，IgE値だけで診断名が確定するわけではないが，アレルゲンごとの特異的IgE抗体を測定する時はIgE値も検査することが望ましい．
　かつては放射性同位元素を用いたRIST法（radioimmunosorbent test）で測定されたが，現在は通常EIA法で測定される．濃度の単位としてはIU/mLが用いられ，1IUは2.4ngに対応している．後述する特異的IgEの単位UA/mLあるいはKU/Lは，アレルゲンごと，測定系ごとに定められたものであり，1単位が2.4ngを意味するわけではないことに注意が必要である．

アレルギー特異的IgE抗体

著者：山口正雄

ページ範囲：P.395 - P.397

検査の概要
　血清IgE（immunoglobulin E）はさまざまな抗原を認識するIgE抗体の総和であるのに対し，アレルゲン特異的IgE抗体検査は単一の抗原（アレルゲン）を認識するIgE抗体だけを選びとって，高感度で測定するものである．元々はアレルゲンをペーパーディスクに固相化して，これに結合する特異的IgEを放射性同位元素を用いて測定するRAST（radioallergosorbent test）法から始まったが，現在は放射性同位元素を使わない測定法に置き換わっている．複数の検査システムが臨床で用いられており，概ね一致した結果が得られる．基準値は陰性（アレルギー疾患をもたず，アレルゲン感作もみられない健常人が対象）であり，アレルゲン感作が成立していると陽性を示す．
　近年の検査の流れとしては，測定時間の短縮，多項目同時測定法の開発，新規アレルゲンの発見，アレルゲンコンポーネントの測定系の拡充（ただし保険適用外の項目が多い）が着実に進められている．

自己免疫関連検査

抗核抗体

著者：窪田哲朗

ページ範囲：P.398 - P.399

検査の概要
　Hargravesが全身性エリテマトーデス（systemic lupus erythematosus：SLE）の患者血液中にLE細胞を見出したのは，1948年のことであった．その後，この現象が検討されるにしたがって，SLEや，そのほかの患者血清中に，細胞の核と反応する種々の自己抗体が存在することが明らかになった．抗核抗体の検出は臨床検査としても普及してさまざまな方法が考案されたが，最近では単に抗核抗体検査と言えば，HEp-2（human epithelial-2）細胞を基材とした間接蛍光抗体法を意味する．
　核にはDNA, RNAなどの核酸や，さまざまな核蛋白質が存在し，抗核抗体の種類によって染色パターンが異なる．基本的には辺縁型（peripheral），均質型（homogeneous），斑紋型（speckled），散在斑点型（discrete speckled：セントロメア型），核小体型（nucleolar）の5種類に分類される（図1）．通常は血清を40倍に希釈して検査し，陽性の場合はさらに2ⁿ倍に希釈して，陽性を呈する最高倍率が染色パターンとともに報告される．

抗RNP抗体

著者：窪田哲朗

ページ範囲：P.400 - P.401

検査の概要
　1972年にSharpら¹⁾によって，全身性エリテマトーデス（systemic lupus erythematosus：SLE），全身性強皮症（systemic scleroderma：SSc），多発性筋炎の症状を部分的に併せもち，extractable nuclear antigen（ENA）と反応する抗体が陽性を示す一群の症例に対して，混合性結合組織病（mixed connective tissue disease：MCTD）という新しい疾患概念が提唱された．抗ENA抗体には，抗原のRNase処理で反応性が失われるものと失われないものがあり，後に前者が抗RNP抗体，後者は抗Sm抗体であることが明らかにされた．
　臨床検査では，血清中の抗RNP抗体（抗U1 RNP抗体，抗U1 snRNP抗体とも記載される）を，二重免疫拡散法（Ouchterlony法）による半定量法，または酵素免疫測定法による定量法で測定している．MCTDのほか，SLE，多発性筋炎/皮膚筋炎，SSc，Sjögren症候群，関節リウマチなどの膠原病で検出される．特にMCTDでは本抗体陽性が診断の必須項目となっているが，ほかの疾患においては，本抗体と特定の病態との相関などに関して定説がないので，測定する意義は確立していない²⁾．

抗DNA抗体

著者：窪田哲朗

ページ範囲：P.402 - P.403

検査の概要
　通常の右巻き2重らせん構造をしたdouble-stranded（ds）DNAは，正常のヒトや動物には抗原性がない．すなわち，dsDNAを投与しても抗dsDNA抗体は作られない．しかし，1950年代から，全身性エリテマトーデス（systemic lupus erythematosus：SLE）の患者は高力価の抗dsDNA抗体を産生することが知られ，SLEの診断に有力な指標として測定されている．また，多くのSLE症例では抗dsDNA抗体の力価が疾患活動性を反映して変動することから，治療効果の判定にも有用で，経過を追って定期的に測定されていることが多い．
　最近のわが国の臨床検査では，主にFarr法を応用したradioimmunoassay（RIA）の“抗DNA抗体”定量と，enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）法によるIgG “抗dsDNA抗体”定量の2種類が用いられているが，いずれの方法も使用している抗原はdsDNAである．なお，ELISA法では，single-stranded（ss）DNAと反応する抗体や，IgMクラスの抗体の測定も可能であるが，これらの臨床的意義は確立していない．

抗Sm抗体

著者：上阪等

ページ範囲：P.404 - P.405

検査の概要
　抗Sm抗体は，全身性エリテマトーデス（systemic lupus erythematosus：SLE）患者の血清に見いだされた抗核抗体の1つで，発見の由来となった患者Smith氏の初め2文字が冠されている．蛍光抗体法による抗核抗体検出法では，主に斑紋（speckled）型として検出される．
　標準的には，オクタロニー法（二重免疫拡散法）で検出される．寒天平板上の小孔に抗原と被検血清を別々に入れてゲル内を拡散させ，抗原抗体反応により生じる沈降線から抗体の有無を判定する．その後，検査自動化のために，自己抗原を生化学的精製ないし組み換え蛋白として作成して被検検体を反応させ，結合した抗原抗体複合物を色素ないし蛍光で検出して定量する方法（ELISA法）も導入された．前者は沈降線を生じる最大希釈倍数で陽性度を表すので半定量法と呼ばれ，後者は抗体量を光学的に測定するので定量法とも呼ばれる．わが国もかつて用いられていた受身血球凝集法（PHA法）ではRNase抵抗性抗ENA抗体として検出される．

抗Scl-70抗体

著者：上阪等

ページ範囲：P.406 - P.407

検査の概要
　抗Scl-70抗体は，強皮症（scleroderma）に特異的に出現するとして報告された抗核抗体である．蛍光抗体法による抗核抗体検出法では，均質（homogenous）型に近い斑紋（speckled）型を呈することが多い．Sclはsclerodemaの略で，70は対応自己抗原の分子量が70kDaと推定されたことに由来する．Og抗体と呼ばれたこともあった．その後，対応抗原が核に局在するDNAトポイソメラーゼⅠであることが判明し，抗トポイソメラーゼⅠ抗体とも呼ばれる．なお，本来の分子量は100kDaであり，当初見いだされた70kDa蛋白はトポイソメラーゼⅠの部分分解産物であった．
　標準的には，オクタロニー法（二重免疫拡散法）で検出される．寒天平板上の小孔に抗原と被検血清を別々に入れてゲル内を拡散させ，抗原抗体反応により生じる沈降線から抗体の有無を判定する．その後，検査自動化のために，自己抗原を生化学的精製ないし組み換え蛋白として作成して被検検体を反応させ，結合した抗原抗体複合物を色素ないし蛍光で検出して定量する方法（ELISA法）も導入された．前者は沈降線を生じる最大希釈倍数で陽性度を表すので半定量法と呼ばれ，後者は抗体量を光学的に測定するので定量法とも呼ばれる．

リウマトイド因子

著者：小柴賢洋

ページ範囲：P.408 - P.410

検査の概要
　リウマトイド因子（rheumatoid factor：RF）は変性した自己IgGのFc部分を抗原とする自己抗体である．1940年にノルウェーのErik Waaler，1948年に米国のHarry Roseによって記載された．関節リウマチ（rheumatoid arthritis：RA）患者より発見されたため，リウマトイド因子と名づけられた．抗自己IgG抗体としてはすべての免疫グロブリンのクラスの抗体が存在するが，RF定量では主として凝集力の強いIgMクラスの抗体を検出する．
　RFの検査法として，RAテスト（ラテックス凝集反応を用いた定性検査）やRAPA〔rheumatoid arthritis, particle agglutination. RAHA（rheumatoid arthtitis hemagglutination）を改良した半定量検査〕なども従来使用されてきた．しかし，2010年に米国リウマチ学会と欧州リウマチ学会が共同で改訂した関節リウマチの分類基準（図1，表1．以下，新基準）では，定量法を用いて評価する必要がある¹⁾．

MMP-3，抗CCP抗体

著者：小柴賢洋

ページ範囲：P.411 - P.413

検査の概要
　マトリックスメタロプロテイナーゼ-3（matrix metalloproteinase-3：MMP-3）は炎症性サイトカインや酸化ストレス刺激により，関節滑膜細胞や軟骨細胞，線維芽細胞，マクロファージなどで産生される蛋白分解酵素である．MMPのなかでも最も広い基質特異性をもち，基底膜や軟骨を構成する軟骨プロテオグリカン，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅶ，Ⅸ型コラーゲン，ラミニン，フィブロネクチンなどを分解するため，関節リウマチ（rheumatoid arthritis：RA）の関節破壊に深く関与している．
　血清中MMP-3をEIA法，ラテックス免疫比濁法により測定される．MMP-3は生体内では不活性型（proMMP），活性型，TIMPとの結合型として存在するが，血清および関節液中ではproMMPが90％以上を占めると言われている．

抗Jo-1抗体，抗ARS抗体

著者：太原恒一郎 , 沢田哲治

ページ範囲：P.414 - P.415

検査の概要
　抗Jo-1抗体（多発性筋炎と間質性肺炎を呈した患者名John Pに由来）は，1980年にNishikaiらにより二重免疫拡散法にて同定された多発性筋炎・皮膚筋炎に特異的な自己抗体である．その対応抗原はヒスチジルtRNA合成酵素であり，近年は精製あるいはリコンビナント蛋白質を用いたELISA（酵素免疫測定法）でも測定される．多発性筋炎・皮膚筋炎における抗Jo-1抗体の感度は20〜30％程度であるが，特異度は高く，多発性筋炎・皮膚筋炎の確定診断に有用である．
　抗Jo-1抗体よりも低頻度であるが，ほかのアミノアシルtRNA合成酵素に対する自己抗体には抗PL-7（スレオニルtRNA合成酵素），PL-12（アラニルtRNA合成酵素），抗EJ（グリシルtRNA合成酵素），抗OJ（イソロイシルtRNA合成酵素），抗KS（アスパラギニルtRNA合成酵素）などがあり，多発性筋炎・皮膚筋炎に特異的である．これらの抗アミノアシルtRNA合成酵素（aminoacyl-tRNA synthetase：ARS）抗体陽性の多発性筋炎・皮膚筋炎には，共通の臨床的特徴として筋炎，間質性肺炎，多関節炎，発熱，Raynaud現象，手指側面の角質化と色素沈着をきたす機械工の手（mechanic's hand）がみられ，抗ARS抗体症候群と呼ばれる．

抗SS-A/Ro抗体，抗SS-B/La抗体

著者：太原恒一郎 , 沢田哲治

ページ範囲：P.416 - P.417

検査の概要
　二重免疫拡散法により同定された自己抗体であり，主にSjögren症候群（Sjögren syndrome：SjS）の診断に用いられる．抗SS-A抗体と抗SS-B抗体は，1961年にAndersenらがSjS患者の血清中に自己抗体を同定した報告にまで遡る．その後，1969年に二重免疫拡散法によりClarkらがSjSの血清中に抗Ro抗体を，1971年にMattioliらが当初に全身性エリテマトーデス（systemic lupus erythematosus：SLE）の自己抗体として抗La抗体を同定した．これらの自己抗体は，1975年にAlspaughらがSjS患者の血清中に同定した抗SS-A抗体，抗SS-B抗体と同一であることから，抗SS-A/Ro抗体，抗SS-B/La抗体と称される．
　抗SS-A/Ro抗体が認識するSS-A抗原は，細胞質低分子RNAを結合した52kDaと60 kDa蛋白質からなるリボ核蛋白質複合体である．抗SS-B/La抗体が認識するSS-B抗原は，細胞核内の47kDa蛋白（RNAポリメラーゼⅢのtranscription termination factor）である．近年は二重免疫拡散法に加えて，精製またはリコンビナント抗原を用いたELISA（酵素免疫測定法）でも測定される．

抗アセチルコリン受容体抗体，抗筋特異的チロシンキナーゼ抗体

著者：鈴木秀和 , 楠進

ページ範囲：P.418 - P.419

検査の概要
　重症筋無力症（myasthenia gravis：MG）は神経筋接合部に対する自己免疫疾患である．MGの症状の特徴は，筋疲労現象と日内変動である．眼症状として眼瞼下垂や複視を，そのほかの症状として四肢筋力低下や，嚥下障害，構音障害などの球症状を認める．時に呼吸筋障害のために人工呼吸器管理が必要となる場合がある．抗アセチルコリン受容体（acetylcholine receptor：AChR）抗体，抗筋特異的チロシンキナーゼ（muscle-specific receptor tyrosine kinase：MuSK）抗体はMG診断において特異性の高い検査である．いずれもラジオイムノアッセイ（RIA）法にて測定される．

抗ミトコンドリア抗体

著者：平形道人

ページ範囲：P.420 - P.422

検査の概要
　抗ミトコンドリア抗体（anti-mitochondrial antibody：AMA）は，原発性胆汁性肝硬変症（primary biliary cirrhosis：PBC）に高頻度かつ特異的に検出され，PBCの診断のうえで重要な検査である^1,2)．胆道系酵素（ALP，γ-GTP）優位の肝機能障害や黄疸を呈し，肝炎ウイルスマーカー陰性で，閉塞性黄疸が否定的な場合，AMAを測定しPBCの鑑別診断を進める．
　AMAの測定法には，間接蛍光抗体法（indirect immunofluorescent assay：IIF），enzyme-linked immunosorbant assay（ELISA），免疫ブロット法（immunoblotting），chemiluminescent enzyme immuno assay（CLEIA）などがあり，IIF，ELISA，CLEIAが保険適用として認められている^2〜5). IIFは，ラットの腎および胃の凍結組織切片を基質として用い，ミトコンドリア内膜の対応抗原全体に対する自己抗体を検出する方法で，PBCのスクリーニング検査として行われる．一方，ELISA（MESACUP^TM-2テストミトコンドリアM2，MBL社），CLEIA（ステイシアMEBLux^TMテストミトコンドリアM2，MBL社）はミトコンドリアM2抗原であるpyruvate dehydrogenase complex-E2（PDC-E2），branched chain 2-oxo acid dehydrogenase complex-E2（BCOADC-E2），2-oxo glutarate dehydrogenase complex-E2（OGDC-E），の3種類のリコンビナント蛋白を用いた試薬で，IIFと同等以上に高感度（90％）であることが示されている^3〜5)．

抗肝腎ミクロソーム-1抗体

著者：小池和彦 , 銭谷幹男

ページ範囲：P.424 - P.425

検査の概要
　Rizzettoらは慢性活動性肝炎の患者血清中に抗ミトコンドリア抗体（anti-mitochondrial antibody：AMA）とは異なる，細胞質に対する自己抗体を発見した．この抗体は，間接蛍光抗体法により腎臓の近位および遠位尿細管上皮細胞が染色されるAMAとは異なり，遠位尿細管細胞が染色されずに近位尿細管上皮細胞や肝細胞と反応し，その対応抗原がミクロソームであることから，抗肝腎ミクロソーム抗体（anti-liver kidney microsome antibody：抗LKM抗体）と名づけられた．
　抗LKM抗体は間接蛍光抗体法による染色パターンから3種類（LKM-1，2，3）に分類されるが，このなかの抗LKM-1抗体は，自己免疫性肝炎（autoimmune hepatitis：AIH）のなかで抗核抗体（anti-nuclear antibody：ANA）陰性，抗平滑筋抗体（anti-smooth muscle antibody：SMA）陰性，抗LKM-1陽性のⅡ型AIHに特徴的な自己抗体であることが判明している．

抗平滑筋抗体

著者：小池和彦 , 銭谷幹男

ページ範囲：P.426 - P.427

検査の概要
　抗平滑筋抗体（anti-smooth muscle antibody：SMA）は，1965年Jonsonらによって自己免疫性肝炎（autoimmune hepatitis：AIH）患者の血清において陽性を示すことが報告され，本抗体が陽性を示す際には肝障害の原因として自己免疫機序が関わっている可能性が示唆された．その後，DoniachらやWhittinghamらの検討で，SMAはAIHのみでなく，慢性活動性肝炎でも17〜67％と高率に陽性となることが報告された．
　SMA自体に臓器特異性はなくAIHの病因との関連は少ない．しかし，本抗体はAIHにおいて抗核抗体（anti-nuclear antibody：ANA）に次いで検出率は高く，特にANA陰性AIHにおいて診断的価値は高い．2013年に厚生労働省「難治性の肝・胆道疾患に関する調査研究」班の診断指針が改定されたが，この指針においてもANAまたはSMAが陽性であることがAIH診断の重要な1項目とされている¹⁾．

抗胃壁細胞抗体，抗内因子抗体

著者：今福裕司

ページ範囲：P.428 - P.429

検査の概要
　胃壁細胞（parietal cell）は胃底部，胃体部にある主要な細胞の1つで，最大多数を占める主細胞［消化酵素前駆体であるペプシノーゲン（pepsinogen）を産生］に次いで多く，刺激因子（ガストリン，ヒスタミン，アセチルコリン）による刺激を受けてプロトンポンプ（proton pump，HT^＋，KT^＋-ATPase）の作用により胃内腔への酸（HT⁺）分泌を担っている．抗胃壁細胞抗体（parietal cell antibody：PCA）は，この胃壁細胞に対する自己抗体であり，悪性貧血（pernicious anemia）と萎縮性胃炎に出現する抗体として報告された．
　また，胃壁細胞は消化管からのビタミンBT₁₂（VBT₁₂）吸収に必要な内因子（intrinsic factor：IF）を産生する．食餌とともに摂取されたVBT₁₂は，胃壁細胞から産生されたIFと複合体を形成して回腸粘膜細胞の受容体を介して体内に吸収される．このときIFがなければVBT₁₂は遊離型となり体内に吸収されない．抗内因子抗体（IF antibody：IFA）は内因子に対する自己抗体である．

抗リン脂質抗体

著者：家子正裕

ページ範囲：P.430 - P.432

検査の概要
　抗リン脂質抗体（antiphospholipid antibody：aPL）は，動静脈血栓症や妊娠合併症を主症状とする抗リン脂質抗体症候群（antiphospholipid antibody syndrome：APS）の診断的検査であるが，近年はaPL自体が独立した血栓症のリスクファクターとして考えられている．aPLはリン脂質-リン脂質結合蛋白複合体に対する自己抗体であり，酵素免疫法（ELISA）で測定されるELISA-aPLと，リン脂質依存性凝固時間の延長で検出されるlupus anticoagulant（LA）がある．APSの診断的検査所見としては，ELISA-aPLの抗カルジオリピン抗体（aCL），抗β2-glycoprotein Ⅰ抗体（aβ2 GPI）およびLAである．近年，次世代のAPS診断的検査としてホスファチジルセリン依存性抗プロトロンビン抗体（aPS/PT）がある．aCLはELISA-aPLのスクリーニング的意味合いがある．aβ2 GPIはAPSの臨床症状によく相関する．aPS/PTもAPS臨床症状にきわめて強い相関を示す．
　一方，本邦にはβ2 GPI依存性aCL（β2 GPI-aCL）というELISA-aPL検査がある．aβ2 GPI-aCLは保険収載があるので，保険収載のないaβ2 GPIに代わって測定されることが多い．aβ2 GPIの測定結果とは若干異なる．

抗血小板抗体

著者：渡邊直英 , 半田誠

ページ範囲：P.433 - P.434

検査の概要
　抗血小板抗体は，自己免疫異常で生じ，特発性血小板減少性紫斑病（idiopathic thrombocytopenic purpura：ITP）などの疾患の原因となる自己抗体と，輸血や妊娠で感作されて生じ，主に血小板輸血不応症の原因となる同種抗体の2種に大別される．同種抗体にはさらに抗HLA抗体や抗HPA抗体（血小板の膜糖蛋白のアミノ酸点多型に対する抗体）などが存在する．これらの抗血小板抗体の検出法には，血小板関連IgG（platelet associated IgG：PA-IgG）と，血小板結合性IgG（platelet bindable IgG：PB-IgG）が用いられ，それぞれ抗赤血球抗体検出における直接および間接Coombs試験に相当する．
　PA-IgGは患者体内で血小板に結合したIgGのことで，ELISA（enzyme-linked immuno-sorbent assay）法またはフローサイトメトリーで検出する．自己抗体は産生量が少ないので，そのほとんどが血小板に結合しており，血清中から検出することは難しい．PA-IgGは，これまでITPの診断を行ううえでの自己血小板抗体のスクリーニング法として長年測定されてきたが，感度は高いものの特異性は低く，その臨床的意義はほとんどない．2007年に発表された厚生労働省「特発性凝固異常症研究班」によるITPの診断基準案でも，血小板関連GPⅡb/Ⅲa抗体やそれを産生する末梢血中のBリンパ球の増加，網血小板比率の増加，血漿トロンボポイエチンの上昇などが診断基準として採用された（いずれも一般的検査には至っていない）が，PA-IgGは含まれていなかった¹⁾．その一方で，PA-IgGはこれまで保険収載されていなかったが，2012年度よりITPの診断または経過判定目的で保険適用となっている．

抗好中球細胞質抗体(ANCA)

著者：大久保光修 , 平橋淳一

ページ範囲：P.435 - P.437

検査の概要
　自己免疫性疾患の患者血清中には自己細胞核や細胞質成分を抗原とする多種類の自己抗体が検出される．一般的に，これらの自己抗体には特定の疾患や病型と密接に関連するものが多く，疾患の診断・病型分類・予後予測・治療効果判定などに有用である．現在では，検査法の進歩によって100種類近くの自己抗体・対応抗原が知られている．
　抗好中球細胞質抗体（anti-neutrophil cytoplasmic antibody：ANCA）は好中球の細胞質顆粒蛋白に対する自己抗体である．ANCAの産生が亢進している代表的疾患が顕微鏡的多発血管炎（microscopic polyangiitis：MPA）や多発血管炎性肉芽腫症（granulomatous with polyangiitis：GPA，旧称Wegener肉芽腫症），好酸球性肉芽腫性多発血管炎（eosinophilic granulomatosis with polyangiitis：EGPA，旧称Churg-Strauss症候群）をはじめとした自己免疫性血管炎症候群であり，ANCAはその疾患マーカーとして認識されてきた．厚生労働省難治性血管炎調査研究班による血管炎の診断基準にもANCAの測定結果が含まれており，血中ANCA抗体価の測定は血管炎の診断および治療効果判定において重要な意義をもつ．また，ANCAは疾患マーカーであるだけでなく，好中球を異常活性化させる病原性をもつことも動物実験で示されている．

抗糸球体基底膜抗体

著者：大久保光修 , 平橋淳一

ページ範囲：P.438 - P.439

検査の概要
　抗糸球体基底膜抗体とは，糸球体基底膜（glomerular basement membrane：GBM）中のⅣ型コラーゲンNC1ドメインに対する自己抗体であり，通常免疫グロブリンIgGクラスに属しており補体結合能をもつものが多い．
　抗GBM抗体が血液中から検出される代表的な疾患として，急速進行性糸球体腎炎（rapidly progressive glomerulonephritis：RPGN）および肺出血をきたす重篤な自己免疫疾患であるGoodpasture症候群が挙げられる．わが国におけるRPGN症例の60〜70％はMPO-ANCA陽性の顕微鏡的多発血管炎が占めており，抗GBM型RPGNの頻度は稀とされている．

免疫複合体

著者：秋山雄次

ページ範囲：P.440 - P.442

検査の概要
　免疫複合体（immune complex：IC）とは抗原に抗体が結合した抗原抗体複合体と，それに補体成分が結合した抗原抗体補体複合体をいう．生体に侵入した病原微生物などの異物を排除する際にICが形成されるが，効率的に処理されないと後述するように組織の障害を引き起こす可能性がある．血中の抗原抗体複合体は，複合体中の免疫グロブリンが他の複合体と次々に架橋し巨大な複合体を形成する可能性がある．しかし血中に存在する補体がICと反応すると複合体上に補体分解産物のC3bを結合・発現する．C3bやC3dはICが他の免疫グロブリンと架橋するのを防ぎ，かつ複合体の中に入り込みサイズを小さくし可溶化する．大きなICも可溶化され，赤血球の補体レセプター（CR1）によって補体部分を捕捉され血漿中より吸着される．赤血球上のICは肝臓や脾臓に運ばれ，そこでⅠ因子の作用によって赤血球から解離されFcレセプターや補体レセプターを有する単球，樹状細胞，マクロファージ，肝Kupffer細胞などによって貪食され処理される．
　Ⅲ型アレルギーが病態に関与していることが疑われたとき（表1），補体や他の必要な検査とともに測定する意義がある．疾患活動性や治療効果の判定に有用である．

抗アクアポリン4抗体

著者：高橋利幸 , 藤原一男

ページ範囲：P.443 - P.444

検査の概要
　抗アクアポリン4（aquaporin 4：AQP4）抗体は，視神経脊髄炎関連疾患（neuromyelitis optica spectrum disorders：NMOSD）の病因かつ疾患マーカーである．特異性はきわめて高く，実臨床では，NMOSDが疑われる場合，あるいは原因不明の中枢神経病変を認める場合に測定され，陽性であればNMOSDの診断がほぼ確定する，といった運用がなされている．NMOSDは視神経脊髄炎（neuromyelitis optica：NMO）の疾患概念が拡大されたものだが，名前に反して脳病変も珍しくなく，誤解を招きやすい疾患名である．当初は，視神経と脊髄に病変が限局すると考えられていたためNMOと呼ばれてきたが，抗AQP4抗体の発見後，NMOの部分症と考えられる例（視神経炎や脊髄炎単独例）や，脳病変を有する例でも抗AQP4抗体が陽性になることがわかり，それらを含めてNMOSDと呼称することとなった．
　現時点で通用しているNMOの診断基準（表1）¹⁾と，NMOSDの原案（表2）²⁾を示す．なお，NMOSDの原案は「こういった例で抗AQP4抗体が陽性になりうる」というものであり，診断基準ではないため，その後の定義は研究者によって異なることに注意が必要である．抗AQP4抗体測定は，国内では主に，AQP4を強制発現させた細胞を用いた間接蛍光抗体法（cell-based assay：CBA）が各施設で行われてきたが，2013年11月にRSR社のenzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）が保険適用となった．

天疱瘡・類天疱瘡関連抗体

著者：青山裕美

ページ範囲：P.445 - P.446

検査の概要
　天疱瘡・類天疱瘡を含む自己免疫性水疱症では，接着分子に対する自己抗体が表皮細胞の接着力を低下させるため，全身に表皮内水疱や表皮下水疱が生じる．天疱瘡では表皮細胞間接着構造デスモソームの構成分子デスモグレイン1，3に対する自己抗体が，類天疱瘡では表皮真皮境界接着構造であるヘミデスモソームの構成成分であるBP180に対する自己抗体が検出される．
　天疱瘡関連抗体である抗デスモグレイン1抗体と抗デスモグレイン3抗体，類天疱瘡関連抗体の抗BP180抗体は，マイクロカップに固相化されたリコンビナント蛋白を基質として測定するenzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）法と，磁性粒子結合させたリコンビナント蛋白を基質として測定する化学発光酵素免疫測定法（chemiluminescent enzyme immunoassay：CLEIA法）にて，抗体価の定量が可能である．いずれの場合も検出されるのはIgG抗体である．

輸血・移植関連検査

血液型試験

著者：村上純子

ページ範囲：P.448 - P.451

血液型の概要
　医療現場で血液型試験の実施が必須なのは，輸血を前提とする場合と，妊娠した場合である．前者は，血液型不一致による輸血事故を防ぐ目的で，後者は母児間の血液型不一致による種々の合併症に備える目的で実施される．
　これらの目的を達成するために必要な血液型試験は，ABO血液型とRho（D）血液型の2種類である．

交差適合試験

著者：村上純子

ページ範囲：P.452 - P.455

検査の概要
　交差適合試験は，供血者の血液が受血者（患者）に輸血された時に，溶血性輸血副作用が発生する危険を可能な限り低下せしめることを目的に，輸血前検査として必ず行われるべき重要な検査である．
　国際輸血学会（ISBT）は300種以上の血液型抗原を認定しているが，輸血に先だって検査される血液型は，ABO血液型とRho（D）型だけなので，それ以外の血液型については，不一致に眼をつぶったまま輸血していることになる．したがって，輸血を行えば，受血者が有していない型抗原が輸注され，これに対して抗体を産生する可能性が必ずつきまとう．そのため，2回目以降の輸血では，常に血液型不一致が原因の輸血副作用が発生する危険を伴っている．

抗グロブリン試験(Coombs試験)

著者：宮崎孔 , 佐藤進一郎 , 池田久實

ページ範囲：P.456 - P.458

検査の概要
　他人同士の血液を混ぜると血液が凝集することによりLandsteinerはABO血液型を発見し，その原因が血清中の凝集素（抗体）であることを見い出した．一方，Rh血液型に対する抗体の一部では赤血球に結合しても凝集を起こさないことが知られており，この抗体は不完全抗体と呼ばれた．その実態はIgG抗体であり，血清中に自然に存在する抗A，抗BなどのIgM抗体よりも小さい分子であるため赤血球を架橋できず凝集が起こらない．しかし，CoombsらはIgG抗体が結合した赤血球を抗グロブリン血清を用いて架橋することにより凝集が認められることを報告した（図1）．これにより多くの血液型が発見され，輸血検査では最も重要な検査法となっている．また，抗IgGと抗補体（C3）を混合した多特異性抗グロブリン試薬により検出感度は向上した．
　抗グロブリン試験には直接抗グロブリン試験（direct antigloburin test：DAT）と，間接抗グロブリン試験（indirect antigloburin test：IAT）の2種類がある．DATは主に溶血所見がある患者の診断に用いられており，IATは輸血時の交差適合試験や不規則抗体（抗A・抗B以外の赤血球抗体）の検査に利用される．特にIATは37℃で抗原抗体反応を行うため臨床的意義の高いIgG抗体を検出するのに適しており，不規則抗体検出の必須検査となっている¹⁾．また，RhD血液型検査にも利用されweak Dの鑑別にも役立っている．現在では検査法に改良が加えられ，ポリエチレングリコール（PEG）や低イオン強度塩類溶液（LISS）のような反応増強剤を添加して検査時間の短縮や検出感度の向上が図られている．さらに試験管内での凝集反応ではなく，抗IgGを結合させたゲルを用いてIgG感作血球を分別するカラム凝集法やマイクロプレートのウェルに赤血球膜を固相し，被験血清中のIgG抗体を結合させて抗IgG感作血球で検出する固相凝集法が開発されている（図2）．これらの方法によって熟練した検査技師に頼らない客観的な判定が可能になり，検査の自動化も可能となった²⁾．

不規則抗体

著者：宮崎孔 , 佐藤進一郎 , 池田久實

ページ範囲：P.459 - P.461

検査の概要
　不規則抗体とは抗A，抗B以外の赤血球抗原に対する抗体の総称であり，溶血性輸血副作用や新生児溶血性疾患の原因となりうる．不規則抗体の検査は大きく分けて生理食塩液法，酵素法，間接抗グロブリン試験があり，検査法によってそれぞれ特徴があるが，溶血反応に関与する臨床的意義の高い抗体は37℃で反応するIgG抗体であるため，溶血性輸血副作用を防ぐには間接抗グロブリン試験は必須である（表1）．
　不規則抗体スクリーニングでは臨床的に重要な抗体を検出できるように2〜4種類のO型赤血球を組み合わせた血球試薬を使用し，抗体が検出された場合は特異性を同定するために10〜20種類のO型赤血球で構成されたパネル血球試薬を用いる．さらに，血清中に複数の抗体が含まれる場合や自己抗体の存在が疑われる場合は，追加パネル血球による確認や吸着試験，解離試験などを組み合わせて同定する必要があるため，検査に時間を要する場合もある．

HLA系とHLAタイピング

著者：渡邊直英 , 半田誠

ページ範囲：P.462 - P.463

検査の概要
　HLA抗原（human leukocyte antigen：ヒト白血球抗原）は，第6染色体短腕（6p21.3）に存在する主要組織適合性複合体（major histocompatibility complex：MHC）遺伝子領域内のHLA遺伝子群に支配されている．T細胞への抗原提示機能をもつ分子であり，T細胞はHLA抗原を元に自己と非自己を認識するため，移植免疫の中心的役割を担う．HLA抗原は，白血球をはじめとするほとんどの有核細胞（血小板も含む）に発現するクラスⅠ抗原（HLA-A，B，C抗原）と，主としてB細胞，活性化T細胞，マクロファージなど限られた細胞のみに発現するクラスⅡ抗原（HLA-DR，DQ，DP）に分類される．
　これらのHLA抗原は高度の多型を有する細胞膜抗原であり，そのHLA型を同定する検査がHLAタイピングである．HLAタイピングには，血清学的検査，細胞学的検査およびDNAタイピングがある．血清学的検査はHLA-A，B，C，DR，DQ型が同定可能かつ安価なため通常の臓器移植で用いられるが，血清学的に一致したHLAでもDNAレベルでは不一致のことがあり，造血幹細胞移植ではDNAタイピングで適合を評価する．細胞学的検査はHLA-D（HLA-DR，DQ複合体）やHLA-DPのタイピングに用いられるものの，臨床での有用性が低く現在ではほとんど用いられない．血清学的検査は，被験者リンパ球に既知のHLA抗原を認識する抗体を混合し，反応する抗体を特定することで被験者リンパ球のもつHLA抗原を同定するリンパ球細胞毒性試験（lymphocyte cytotoxicity test：LCT）でHLA型が同定される．

腫瘍マーカー消化器系

AFP，AFP-L3分画

著者：佐藤雅哉 , 池田均

ページ範囲：P.466 - P.468

検査の概要
　厚生労働省診療ガイドライン支援事業によりまとめられた「科学的根拠に基づく肝癌診療ガイドライン」¹⁾では，B型慢性肝炎，C型慢性肝炎，肝硬変のいずれかを肝癌の高危険群，そのなかでもB型肝硬変，C型肝硬変患者は超危険群と設定し，肝癌サーベイランスの対象としている．このサーベイランスの基本となるのが肝腫瘍マーカーと画像検索であり，危険群に対しては6カ月ごと，超危険群に対しては3〜4カ月ごとの腫瘍マーカーの測定が推奨されており，特に肥満や肝萎縮などで腹部エコーでのスクリーニングが困難な症例においての有用性が報告されている²⁾．
　肝癌における代表的な腫瘍マーカーであるAFP（α-fetoprotein）は肝癌患者において上昇することが知られているが，問題点として急性肝炎や慢性肝炎，肝硬変で，肝細胞の壊死が強い時にも上昇し，特異性に欠けることが挙げられる．そこで，特にAFPが軽度高値であった場合には特異度を向上させる目的でAFP分画の測定が有用である．

PIVKA-Ⅱ

著者：佐藤雅哉 , 池田均

ページ範囲：P.470 - P.471

検査の概要
　PIVKA-Ⅱ（protein induced by vitamin K absence factor Ⅱ：ビタミンK欠乏時産生蛋白）はdes-γ-carboxy prothrombin（DCP）とも呼ばれ，凝固活性のない異常プロトロンビンである．血液凝固因子のうち第Ⅱ，Ⅶ，Ⅸ，Ⅹ因子はいずれも活性化に際してCa²⁺を必要とし，N末端領域にγ-カルボキシグルタミン酸を有する．このカルボキシ化はビタミンK依存性に行われるため，ビタミンK欠乏下ではN末端領域がグルタミン酸のまま血中に放出されるが，この正常の凝固因子活性をもたない蛋白をPIVKAと呼ぶ．
　PIVKAはそれぞれの凝固因子に対応して4種存在するが，このなかでⅡ因子に対応したPIVKA-Ⅱは，1984年にLiebmanらによって肝細胞癌を有する患者の血清中に高率に出現することが見出され，新規の肝細胞癌の腫瘍マーカーとして報告された¹⁾．わが国では1989年より保険適用となっており，AFPと並ぶ肝細胞癌の腫瘍マーカーとして普及している．

CA19-9（糖鎖抗原19-9）

著者：廣田衛久 , 下瀬川徹

ページ範囲：P.472 - P.473

検査の概要
　CA19-9（carbohydrate antigen 19-9）は消化器系，特に膵管や胆道の上皮細胞の細胞表面に発現している，代表的なⅠ型糖鎖抗原の1つである．癌細胞では過剰に発現し，分泌されて血中レベルが上昇する．このため主に膵癌，胆管癌，胆囊癌をはじめとする膵胆道癌および消化管癌の腫瘍マーカーとして用いられている．
　Ⅰ型糖鎖は，ガラクトースとN-アセチルグルコサミンが結合した基幹構造（Galβ1→3GlcNAc）の繰り返しにより構成される糖鎖であり，ABO式血液型抗原やルイス式血液型抗原の構成要素である．この基幹構造にフコースが結合することにより形成されるのがルイスA（Le^a）糖鎖であり，さらにシアリル酸が結合したシアリルルイスAがCA19-9である．

CA50，Span-1，DU-PAN-2

著者：濱田晋 , 正宗淳 , 下瀬川徹

ページ範囲：P.474 - P.475

検査の概要
　CA50，Span-1，DU-PAN-2はいずれもモノクローナル抗体により認識される糖鎖抗原であり，消化器癌のなかでも，主に膵胆道癌のマーカーとして測定される．Span-1は膵癌細胞株SW1990の産生するムチンに対して反応するモノクローナル抗体を，DU-PAN-2は膵癌細胞株HPAF-1を免疫原として作成されたモノクローナル抗体を使用し，それぞれラジオイムノアッセイと酵素抗体法による測定が行われている（CA50については，2000年より測定試薬の供給が中止されたため，現在は測定することができない）．
　膵胆道癌のマーカーとしてはCA19-9が広く用いられているが，ルイス血液型陰性者では糖鎖構造にフコースを付加してシアリルルイスA糖鎖抗原であるCA19-9を生成する酵素活性が弱く，CA19-9が低値（2.0U/mL以下）を呈する¹⁾．このような患者でもCA50，Span-1，DU-PAN-2の産生は行われており（特にDU-PAN-2はCA19-9の前駆体そのものである），これらを検出するモノクローナル抗体はフコースを欠いたシアリルルイスA抗原以外の糖鎖構造を認識することが可能であるために，腫瘍マーカーとして利用することができる．

NCC-ST-439

著者：濱田晋 , 正宗淳 , 下瀬川徹

ページ範囲：P.476 - P.477

検査の概要
　NCC-ST-439は糖鎖抗原の一種であるシアリルルイスX抗原に属し，膵癌，胆管癌，大腸癌などの消化器系癌の腫瘍マーカーとして利用されている．消化器癌以外では乳癌のマーカーとしての有用性が高い．抗原の本態は高分子ムチン様蛋白質であり，ヒト胃癌細胞株を利用して作成されたモノクローナル抗体により検出される．シアリルルイスX抗原の糖鎖は血管内皮に発現するセレクチンと結合し，癌細胞の血行性転移に関わることが知られている．
　検出方法としては，酵素抗体法や化学発光酵素免疫測定法が用いられている．消化器癌のマーカーとして使用されているCA19-9はシアリルルイスA抗原に属し，ルイス血液型陰性者では消化器癌に罹患していても高値を示さない場合があるが，シアリルルイスX抗原に属する糖鎖の合成はルイス血液型の影響を受けない．そのため，NCC-ST-439はルイス陰性者でも腫瘍マーカーとして利用することが可能である．

呼吸器系

CYFRA21-1

著者：永田泰自

ページ範囲：P.478 - P.479

検査の概要
◆概要
　CYFRA21-1とは血中のサイトケラチン19フラグメントである．サイトケラチンは上皮細胞の細胞骨格を構成する蛋白であり，20種類ある亜分画のうちの1つがサイトケラチン19である．このサイトケラチン19が分解されて血中に流出した可溶性のフラグメントが測定され，腫瘍マーカーとして利用されている^1〜3)．
　「CYFRA」は，サイトケラチン（cytokeratin）のcyとフラグメント（fragment）のfraの組み合わせ，「21-1」は測定に用いる2種類のモノクローナル抗体（BM19.21とKS19.1）に由来している．検査項目名としては，「CYFRA21-1」よりも「サイトケラチン19フラグメント」，あるいは単に「CYFRA」，「シフラ」のほうが一般的である．さまざまな上皮性腫瘍の腫瘍マーカーとして有用であるが，保険が適用されるのは肺癌のみである．

NSE，proGRP，SLX

著者：永田泰自

ページ範囲：P.480 - P.483

NSE
検査の概要
◆概要
　NSEとは神経特異エノラーゼ（neuron specific enolase）の略である．エノラーゼは解糖系酵素で，α，β，γサブユニットの二量体として存在し，5種類のアイソザイム（αα，ββ，γγ，αβ，αγ）がある．このうち，γサブユニットをもつαγとγγは神経細胞に特異的に存在することからNSEと呼ばれている．NSEは神経組織だけでなく神経内分泌細胞にも局在性が高く，臨床的には主に神経内分泌腫瘍の腫瘍マーカーとして利用されている¹⁾．
　肺小細胞癌，褐色細胞腫，神経芽細胞腫の腫瘍マーカーとして保険が適用され，症状や画像などからこれらの疾患を疑う場合に，診断補助の目的で測定する．陽性であれば治療効果判定，再発チェックの目的で経時的に測定する．

乳腺・婦人科系

CA125，CA130，CA602

著者：長阪一憲 , 矢野哲

ページ範囲：P.484 - P.485

検査の概要
　CA125，CA130，CA602は，腫瘍マーカーとして特に卵巣癌の診断に広く利用されている．いずれも糖鎖抗原関連腫瘍マーカーとして血中で測定ができるコア蛋白関連抗原である．糖鎖抗原関連腫瘍マーカーは，糖蛋白の構造別にコア蛋白，母核糖鎖，基幹糖鎖，糖転移酵素，修飾構造（末端糖）に分類され，抗原抗体反応で認識できるモノクローナル抗体によって測定される．
　CA125は，1981年にBastらが卵巣漿液性腺癌から樹立したOVCA433培養細胞系を用いて作製したモノクローナル抗体OC-125によって認識される糖鎖抗原であり¹⁾，実際には精度を上げるため，OC-125抗体とは異なるCA125上のエピトープを認識するモノクローナル抗体M11と組み合わせて測定される．またCA130は，肺腺癌細胞株PC-9を用いて作製したモノクローナル抗体130-22と145-9により認識される糖鎖抗原である²⁾．CA602は，卵巣明細胞腺癌細胞株RMG-Ⅱを用いて作製したモノクローナル抗体MA602-1，MA602-2により認識される糖鎖抗原である³⁾．これらCA125，CA602，CA130のエピトープは，それぞれMUC16と呼ばれる膜結合型ムチン表面にあり，3者の測定値はよく相関する．そのため，臨床的にこれらを同時に測定する意義は少ないとされる．

CA15-3，BCA225，血清HER2蛋白

著者：多田寛 , 大内憲明

ページ範囲：P.486 - P.487

検査の概要
　CA15-3，BCA225，血清HER2（human epidermal growth factor receptor 2）蛋白はいずれも乳癌の腫瘍マーカーであり，再発乳癌の診断補助，進行再発乳癌のモニタリングのために任意で用いられる．多くの施設では，CEA（本号の別項参照）とCA15-3の組み合わせで検査することが多い．
　進行乳癌である場合や乳癌が再発をきたした場合に，これらの腫瘍マーカーは上昇することが多く，CTや骨シンチグラフィ，脳MRIなどの画像検査で転移部位を確定させる．これらの画像検査で転移部位が不明である場合はPET-CTが有効であることがある．画像検査に先立ってこれらの腫瘍マーカーが上昇する場合があるが，腫瘍マーカー上昇をもって，無症状の潜伏転移の治療を開始することの意義は証明されていない．また，感度・特異度が十分ではないため，進行再発乳癌治療中に上昇がみられても，画像検査をせずに治療の変更をすることは基本的には勧められず，また早期乳癌のスクリーニングとしては使用するべきではない．

泌尿器系

PSA，γ-セミノプロテイン，PAP

著者：武内巧

ページ範囲：P.489 - P.491

検査の概要
　前立腺特異抗原（prostate specific antigen：PSA），γ-セミノプロテイン（γ-Sm），前立腺酸性ホスファターゼ（prostatic acid phosphatase：PAP）のいずれも，前立腺癌の腫瘍マーカーとして血清にて測定される．
◆PSA
　Wangらがヒト前立腺組織から精製したserine-proteaseという蛋白分解酵素の一種であり¹⁾，前立腺腺上皮から精漿中に分泌され，精子の運動性に重要である．血中PSAは，主にα1-antichymotrypsin（ACT）と結合した不活性型のPSA-ACTと酵素活性をもつ遊離型PSA（free PSA）より構成され，その和が総PSA濃度（total PSA）である．

BTA，NMP22

著者：武内巧

ページ範囲：P.492 - P.493

検査の概要
　膀胱癌の診断では，膀胱鏡と尿細胞診が必須の検査である．しかしながら，膀胱鏡は侵襲的な検査であり患者の負担が大きく，また尿細胞診は特に悪性度の低い膀胱癌において感度が低い．膀胱癌の診断に補助的に施行される腫瘍マーカー検査として保険診療が認められている代表的な検査に，尿中膀胱腫瘍抗原（bladder tumor antigen：BTA）と尿中核マトリックスプロテイン22（nuclear matrix protein 22：NMP22）の測定がある．そのほか，尿サイトケラチン8/18，尿BFPの検査も膀胱癌に対して保険収載されている．
◆BTA
　BTAは2種類の物質が同じ用語で表現されており，紛らわしい．膀胱癌では各種の組織プロテアーゼによって膀胱上皮の基底膜が破壊され，基底膜に含まれるヒトⅣ型コラーゲン，フィブロネクチン，ラミニン，プロテオグリカンなどの成分が断片的に分解され，さらに尿中に基底膜成分複合体を形成する．この分子量16〜165kDaの特異的ポリペプチドがBTAである．

非特異マーカー

CEA(癌胎児性抗原)

著者：末広寛

ページ範囲：P.494 - P.495

検査の概要
　癌組織で産生され血中に逸脱してくる癌胎児性抗原（carcinoembryonic antigen：CEA）を腫瘍マーカーとして利用するものである．測定方法としてはEIA法やCLIA法などがある．

SCC抗原

著者：永田泰自

ページ範囲：P.496 - P.497

検査の概要
◆概要
　SCC抗原とは扁平上皮癌（squamous cell carcinoma：SCC）関連抗原である．子宮頸部扁平上皮癌の肝転移巣より分離・精製された腫瘍関連抗原で，分子量約45kDaの蛋白である．子宮癌に限らず扁平上皮癌の腫瘍マーカーとして有用であり^1,2)，子宮頸癌，子宮体癌，肺癌，食道癌，扁平上皮癌一般に保険が適用される．
　症状や画像などからこれらの癌を疑う場合に，診断補助の目的で測定する．陽性であれば治療効果判定，再発チェックの目的で経時的に測定する．特に血中半減期が1〜2日と短いため，治療効果判定に適している．

抗p53抗体

著者：船橋公彦 , 谷島聡 , 島田英昭

ページ範囲：P.498 - P.499

検査の概要
　固形癌の過半数では，癌抑制遺伝子であるp53遺伝子の異常があり，変異型のp53蛋白を発現している．この変異型p53蛋白に対して，癌患者血清中には抗p53 IgG抗体が出現する．p53抗体検査はこのIgG抗体を検出する検査法である．抗原抗体反応を利用しているため，比較的早期の癌であっても陽性となり，従来の分泌型腫瘍マーカーであるCEAやCA19-9などと比較して診断上の有用性が高い．
　従来の腫瘍マーカーと相関関係がないため，両者を併用することで陽性率が高くなる．また，微少残存腫瘍抗原を反映するため，化学療法や手術の前後での変化をモニタリングすることで，治療効果や再発のリスクを評価することができる．手術後に抗体が陰性化しない場合には癌細胞遺残のリスクがある．年齢・性別・炎症などでほとんど影響を受けず，日内変動もない．通常のIgG抗体の半減期は30日前後とされているが，抗p53抗体では，再発のない治癒切除症例においても半減期は2カ月以上のことが多い．

微生物学的検査細菌同定検査

グラム染色

著者：吉田麻衣子 , 森永芳智 , 栁原克紀

ページ範囲：P.502 - P.504

検査の概要
　グラム染色は感染症の原因菌を推測できる迅速かつ有用な検査である．特別な機器や技術も必要なく，安価で簡便なため，検査施設のない病院や夜間の救急時など，活用場面は幅広い．喀痰，尿，髄液，膿などあらゆる材料が検査対象となり，気管支洗浄液や髄液などの液体が多い検体でも，遠心して沈殿したペレットを利用できる．
　グラム染色は細菌細胞壁の構造の違いを利用して，グラム陽性菌を青，グラム陰性菌を赤に染め分ける．グラム陽性菌は厚いペプチドグリカン層で覆われるため脱色されにくいが，グラム陰性菌は薄いペプチドグリカン層とリポ多糖を含む脂質二重膜がアルコールで壊れやすいため脱色され，後染色で赤色になる．

喀痰微生物検査

著者：塚本千絵 , 小佐井康介 , 栁原克紀

ページ範囲：P.506 - P.507

検査の概要，異常を示す疾患・病態
　喀痰の微生物検査は主に肺炎や肺結核，下気道感染症などの原因菌を検出し，適切に抗菌薬を選択することを目的としている．
◆原因菌
　肺炎は市中肺炎，院内肺炎，医療・介護関連肺炎（nursing and health care associated pneumonia：NHCAP）に大別され，主な原因菌は市中型肺炎では肺炎球菌，インフルエンザ菌，Moraxella catarrhalis，院内肺炎ではメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（MRSA），緑膿菌，肺炎桿菌，アシネトバクター属，NHCAPでは肺炎球菌，黄色ブドウ球菌（MRSA含む），クレブシエラ属などの腸内細菌，緑膿菌である．

尿培養

著者：熊坂一成

ページ範囲：P.508 - P.509

検査の概要
　尿路感染症の原因菌を同定し薬剤感受性を検査するために尿培養を行う．女性の単純性膀胱炎は臨床症状から診断が可能であり，初発では尿培養は省略できる．
◆検体採取
　女性は外尿道口，外陰部からの細菌汚染を防止するため，片方の手で陰唇を開き中間尿を採取する．本来はカテーテル採尿が望ましい¹⁾．

便細菌検査

著者：熊坂一成

ページ範囲：P.510 - P.511

検査の概要
　外来診療で下痢患者は多く，抗菌薬を投与しなくても，あるいは原因菌の検索をせずに抗菌薬を投与しても数日で改善することが多い．冬季の下痢症の多くはウイルス性である．
　便の細菌検査は，①血便，②発熱，③激しい下痢で全身状態が不良である場合，また細菌性食中毒が疑われる場合に便培養を行う．正確な同定結果が出るまで数日がかかるが，院内検査では原因菌として疑いのある細菌集落が発育した段階で中間報告ができる．

血液培養検査

著者：松本哲哉

ページ範囲：P.512 - P.513

検査の概要
　血液培養検査は，血液中に存在する菌を培養によって検出する方法である．対象疾患は菌血症であるが，菌血症の状態に陥りやすい感染性心内膜炎や各種の感染症も対象に含まれる．血液培養が陽性となった段階で菌血症という診断を行うことが可能である．また，体内深部の感染症で直接的に感染部位から検体が採取できない場合も起因菌の診断のために血液培養が行われる．さらに不明熱など，感染症の鑑別が必要な場合に用いられる場合もある．
【方法】発熱や悪寒が認められる時点で成人では約20mLの静脈血を採取し，好気および嫌気用のカルチャーボトルにそれぞれ10mLずつ注入する．これを1セットと呼ぶ．

髄液の微生物学的検査

著者：大楠清文

ページ範囲：P.514 - P.517

検査の概要，異常を示す疾患・病態
　髄液の微生物学的な検査は髄膜炎，脳炎，脳膿瘍などの中枢神経系感染症の診断と治療に必須である．髄膜炎は発熱，頭痛または意識障害，項部硬直を主徴とする緊急疾患であるため，迅速な起炎菌診断と抗菌薬治療の開始が重要である．臨床症状と診察所見から髄膜炎が疑われるときは頭部CTやMRI撮影で脳内占拠性病変がないことを確認し，髄液を採取して直ちに髄液検査を行い，可及的速やかに治療を開始する．細菌性髄膜炎を疑ったときの髄液穿刺から検査のフローチャートを図1に示した．さらに，日常検査における髄液の細菌学的な検査の具体的な手順¹⁾を図2に示す．
　髄液の塗抹および培養検査はその採取量（検査に用いる量）が多いほど，そして遠心分離を行った後に沈渣を用いると検出感度が高くなる．沈渣のグラム染色像と免疫学的な抗原検査の併用によって，1時間以内に起炎菌の推定が可能である．免疫学的な抗原検査として現在，市販されているPASTOREX MENINGITIS^®（バイオ・ラッド　ラボラトリー社）は，肺炎球菌，B群連鎖球菌（GBS），インフルエンザ菌b型（Hib），髄膜炎菌A，B，C，YおよびW135群，大腸菌（K1抗原陽性）を対象としており，抗菌薬先行投与後の培養陰性の場合にも有用性が高い．

質量分析による細菌同定

著者：野村文夫 , 村田正太

ページ範囲：P.518 - P.520

検査の概要
　一般細菌の同定に用いられてきた従来の生化学的手法は結果を得るのに，例えば腸内細菌の場合は平均18時間と長時間を要する．核酸配列の解析などによる分子生物学的手法は正確であるが，いまだ高コストかつ煩雑であり，ルーチン検査には適していない．
　これに対して，マトリックス支援レーザー脱離イオン化（matrix-assisted laser desorption/ionization：MALDI）と飛行時間型（time-of-flight：TOF）質量分析計を組み合わせたMALDI-TOF MSによる同定法は簡便性，正確性に優れ，迅速（10分以内）かつ低ランニングコストで多くの分離菌種の同定が可能であり，近年急速に普及している．また，一般細菌のみならず，真菌，抗酸菌のデータベースも充実しつつあり，臨床微生物検査に大きなパラダイムシフトが起きている¹⁾．

感受性検査

薬剤感受性試験—MIC，ディスク法

著者：大野章

ページ範囲：P.522 - P.527

　感染症原因菌が同定され有効な抗菌薬が決定されるまでの間，通常，広域スペクトラムを有する抗菌薬が投与される（経験的治療：empiric therapy）．臨床検査室の役割は，経験的治療から個別的治療へ切り替えるため，感染症原因菌を分離同定することと，薬剤感受性試験を行い原因菌の治療に有効な抗菌薬の情報を提供することにある．それにより効果の少ない抗菌薬の継続使用が回避でき，耐性菌出現の抑制や医療コストの軽減につながる．
　検査室は原因菌同定結果と薬剤感受性試験結果を示すとともに，当該時期に問題となっている抗菌薬耐性菌に該当するならばその旨をコメントして報告する．担当臨床医はその情報を受け，治療薬候補となる抗菌薬について，それぞれの体内動態および組織移行性，副作用などを考慮し，最終的に治療薬を選択する．

細菌関連検査

溶連菌

著者：辻章志

ページ範囲：P.528 - P.529

検査の概要
　一般的に「溶連菌」感染症とは，A群β溶血性連鎖球菌（group A β-hemolytic streptococcus：GABHS）感染症のことを示す．GABHSの大部分はStreptococcus pyogenesである．他に，S. agalactiae, S. dysgalactiae subsp. equisimilis，anginosus groupなどがある．GABHS感染症を確定診断する方法として，抗原迅速検査と細菌培養検査がある．本項目では主に抗原迅速検査について記述する．
　抗原迅速検査はGABHS抗体を用いたラテックス凝集法もしくはイムノクロマトグラフ法を原理として，咽頭粘液中のGABHS抗原を検出する．以前はラテックス凝集法が主流であったが，現在は検出感度や操作性，反応時間などで優位性があるイムノクロマトグラフ法が採用されている．代表的な抗原迅速検査キットを表1に示す．

ASO，ASK

著者：辻章志

ページ範囲：P.530 - P.531

検査の概要
　A群β溶血性連鎖球菌（group A β-hemolytic streptococcus：GABHS）の菌体外産生物質である溶血毒素ストレプトリジンOに対する抗体のanti-streptolysin O（ASO）と，酵素ストレプトキナーゼに対する抗体のanti-streptokinase（ASK）を測定する．1932年，ToddらによってASOの測定法が開発されて以降，広く応用されている．
　ASOとASKは主にIgG抗体であるためGABHS感染後7〜10日経過してから上昇し，2〜5週間後に最高値に達して6〜8週間持続し低下する¹⁾．ASOやASKの値が高値を示すのは，GABHS感染による急性期ではなく回復期以降である．続発性疾患である溶連菌感染後急性糸球体腎炎（post streptococcal acute glomerulo nephritis：PSAGN）やリウマチ熱に罹患したときには，細菌培養法や抗原迅速検査を施行してもGABHSを検出しないことが多いため，血清ASO・ASKの測定は続発性疾患の診断にも有用である．

インフルエンザ菌

著者：生方公子 , 岩田敏

ページ範囲：P.532 - P.533

検査の概要，異常値の出るメカニズム
　インフルエンザ菌（Haemophilus influenzae）には，多糖体からなる莢膜（a，b，c，d，e，fの6種類）を有する菌と，莢膜を有しない菌（無莢膜型：nontypable：NT）とがある．莢膜を保持する菌のなかでは，b抗原を保持するインフルエンザ菌（Hib）が乳幼児期における化膿性髄膜炎の原因としてその60％を占め，臨床的に最も重要な菌であったが，結合型Hibワクチンの導入に伴い激減した¹⁾．成人ではHibに対する抗体を保持するため，Hib感染症はきわめて稀である．臨床的には無莢膜型菌が問題となり，肺炎，COPDなどの悪化時の原因となっている．この無莢膜型インフルエンザ菌の短時間検出用として，菌体成分のP6蛋白を抗原とするELISA法が開発されている．
　肺炎球菌と同様に，インフルエンザ菌も気道に常在菌として棲息することがあり検査時には注意を要するが，インフルエンザ菌が原因として疑われる急性中耳炎，副鼻腔炎例を対象に本菌の関与を把握することは，臨床的意義が大きい．

肺炎球菌

著者：生方公子 , 岩田敏

ページ範囲：P.534 - P.535

検査の概要，異常値の出るメカニズム
　肺炎球菌，インフルエンザ菌，あるいはレジオネラ菌などによる感染症例の尿中には，菌体細胞壁成分が排出されることが古くから知られている．この菌体成分を抗原としてイムノクロマトグラフィで検出できるように開発されたのが「尿中肺炎球菌莢膜抗原迅速診断キット」などである．肺炎球菌の迅速診断キットでは，現在94種ある莢膜のうち，23種類を抗原とし，それらの莢膜を保持する肺炎球菌を検出することが可能とされる．
　成人呼吸器感染症では喀痰を検体として用いる場合が多いが，口腔内に棲息する多くの常在細菌が混入しやすいこと，またすでに抗菌薬が投与されている場合も多く，培養で肺炎球菌を検出し難いことがある．尿中へ排出された抗原は血中の抗原が濃縮されており，その診断的意義は大きい．

レジオネラ

著者：三木誠 , 渡辺彰

ページ範囲：P.536 - P.537

　レジオネラ（Legionella pneumophila）は人工的な水循環設備（循環式浴槽，ジャグジー，加湿器，ビル屋上に建つ冷却塔，噴水）などで繁殖し，これらを曝露することにより経気道的に感染する．レジオネラ肺炎は進行が早く，適切な抗菌薬を投与されなければ致死率は60〜70％と高く，疑われた時点から治療を開始しなければならない．したがって迅速な診断が必要となる．また，感染症法4類に属し，届出の必要もある．

マイコプラズマ

著者：宮下修行

ページ範囲：P.539 - P.540

検査の概要
　マイコプラズマの検査法は，検体中に存在する菌体あるいは菌体構成成分を検出する病原体検出法と，菌体の種特異的抗原に対する特異抗体を検出する抗体価測定法に大別される．
◆迅速抗原検査法
　病原体検出法はPPLO培地を用いた培養法，抗原検出法，遺伝子検出法などがあるが，いずれも特殊な機械や技術が必要で一般化されていなかった．2013年に，2つの迅速抗原検査法であるリボテスト^®（旭化成ファーマ）とプライムチェック^®（アルフレッサファーマ）（ともに検体：咽頭拭い液）が保険収載となり，マイコプラズマ感染症の実態把握に大きな期待が寄せられている．

クラミジア

著者：福地邦彦

ページ範囲：P.542 - P.543

検査の概要
　クラミジア科（Chlamydiaceae）は偏性細胞内寄生体であり，16S rRNAと23S rRNAの塩基配列に基づき，クラミジア（Chlamydia）属とクラミドフィラ（Chlamidophila）属に分類される．このうち，クラミジア・トラコマチス（C. trachomatis）とクラミドフィラ・ニューモニエ（C. pneumoniae）がヒトを自然宿主とし病原性を示す．また，トリが保有するクラミドフィラ・シッタシ（C. psittaci）は，ヒトにも感染してオウム病を引き起こす．
【C. trachomatis】現在，代表的な性行為感染症の原因微生物であり，尿路，生殖器感染症，また眼に感染すると結膜炎の原因となる．クラミジアは感染性粒子の基本小体（elementary body：EB），増殖能を有する網様体（reticular body：RB），およびその中間体（intermediate form：IF）の形態をとり，EBが上皮に感染し，RBとなり増殖後，IFを経てEBへと変換するという増殖サイクルをもつ．感染後，数週間で発症し男性では尿道から透明な膿が，女性ではおりものが増えるが，無症状のこともある．また，オーラルセックスにより咽頭炎を発症する．新生児では産道感染して肺炎や結膜炎を起こす．

淋菌

著者：福地邦彦

ページ範囲：P.544 - P.545

検査の概要
　ナイセリア属には24種の細菌が分類され，そのなかで2種の淋菌（Neisseria gonorrhoeae）と，髄膜炎菌（Neisseria meningitidis）がヒトに病原性を有する．
　淋菌は直径0.6〜1μmのグラム陰性双球菌で，線毛を構成する表面PilCが，ヒトの泌尿生殖器の粘膜上皮に，補体制御膜蛋白であるCD46とよく付着することで感染が成立する．患者の粘膜から離れると数時間で感染性を失い，日光，乾燥，温度の変化，消毒剤で簡単に死滅するため，性交や性交類似行為以外で感染することは稀である．

梅毒血清反応

著者：鷲野巧弥 , 大西健児

ページ範囲：P.546 - P.547

検査の概要
　梅毒はスピロヘータの一種であるTreponema pallidum（T. pallidum）の感染による全身性の感染症である．感染症発生動向調査によれば，2001年は585例であった報告数が，2013年には1,226例と増加傾向にあり，今後も注意すべき疾患である．
　病原体の分離がなされれば確定診断となるが，in vitroでの培養は不可能である．また，皮膚病変検体を用いた暗視野鏡検法や蛍光抗体法は研究室以外では一般的ではない．したがって，梅毒の診断には血清反応が用いられることが多いが，臨床所見と併せて総合的に診断する必要がある．梅毒血清反応には大きく2種類があり，非特異的脂質抗原を用いる非トレポネーマ検査と，梅毒トレポネーマ抗原を用いるトレポネーマ検査とがある．

結核・非結核性抗酸菌症

著者：佐々木結花

ページ範囲：P.548 - P.550

　Mycobacterium（抗酸菌）は，1.0〜10μmの無芽胞のグラム陽性桿菌で，好気性菌であり，培養に1週間以上要する遅発育菌と，1週間以内に発育する迅速発育菌に大別される．
　結核菌群は遅発育菌に分類され，Mycobacterium tuberculosis（M. tuberculosis），M. bovis，M. africanum，M. microti，M. canettii，M. pinnipediiによって構成される（M. tuberculosis complex）が，初めの4菌種が結核症を生じる．また，その他の培養しうる抗酸菌を，非結核性抗酸菌（nontuberculous mycobacteria：NTM）と称している．

Helicobacter pylori

著者：山口太輔 , 藤城光弘

ページ範囲：P.551 - P.553

検査の概要，異常値の出るメカニズム，判断基準
　Helicobacter pylori（以下，H. pylori）の診断法には内視鏡を用いた侵襲的な検査法〔培養法，組織鏡検法，迅速ウレアーゼ試験（rapid urease test：RUT）〕と内視鏡を用いない非侵襲的な検査法〔尿素呼気試験（urea breath test：UBT），抗体測定法，便中抗原測定法〕があり，それぞれに長所や短所がある（表1）¹⁾．それぞれの特徴を以下に述べる．
◆培養法
　H. pyloriの唯一の直接的証明法であり，特異性に優れ，薬剤感受性試験を実施することができる．採取された標本は直ちに輸送培地内に入れ，冷蔵保存し48時間以内に分離培養を行う．薬剤耐性菌は1次除菌ではクラリスロマイシンに対する耐性菌が増加傾向にある（2010〜2011年耐性率31.0％）．1次除菌，2次除菌で用いるアモキシシリンの耐性菌は比較的少なく（2010〜2011年耐性率16.9％），2次除菌に使用されるメトロニダゾールの耐性菌はさらに少ない（2010〜2011年耐性率3.4％）²⁾．診断精度は感度68〜98％，特異度は100％と報告されている（表2）³⁾．

ウイルス関連検査

インフルエンザウイルス

著者：畠山修司

ページ範囲：P.554 - P.556

検査の概要
　インフルエンザの検査診断には，ウイルスを検出する方法と血清診断がある．前者には，迅速抗原検査，遺伝子検査，ウイルス培養，免疫蛍光法がある．
　迅速抗原検査は15分以内に結果が得られ汎用性が高いが，感度は遺伝子検出法（reverse transcriptase polymerase chain reaction：RT-PCR法）に劣る．RT-PCR法は最も感度，特異度が高いが，特殊な設備などが必要である．

ヒトメタニューモウイルス

著者：鈴木琢光 , 畠山修司

ページ範囲：P.557 - P.558

検査の概要
　ヒトメタニューモウイルス（human metapneumovirus：hMPV）は，2001年にオランダでrespiratory syncytial virus（RSV）様の臨床症状を呈する小児の鼻咽頭から発見されたウイルスである．RSVと同じパラミクソウイルス科，ニューモウイルス亜科に属するRNAウイルスで，遺伝子の系統樹解析から2つのグループに分かれ，さらにそれぞれが2つのサブグループに分かれるが，グループ，サブグループの違いによる臨床症状の違いや重症度には差を認めないという報告が多い．
◆PCR
　鼻腔吸引液を用いたreverse transcriptase（RT）-PCR法が最も感度の高い検査法と考えられている．系統樹解析を行い，グループ，サブグループを決定する．Songら¹⁾はhMPVのloop-mediated isothermal amplification（LAMP）法を開発し，従来のRT-PCRと比較して感度・特異度ともに優れていると報告しているが，本邦ではまだ実用化されていない．

A型肝炎ウイルス関連検査

著者：八橋弘

ページ範囲：P.559 - P.560

　A型肝炎とはA型肝炎ウイルス（HAV）感染によって生じる急性の肝障害で，HAVはピコルナウイルス科のへパトウイルス属に分類される全長7,500塩基の一本鎖のプラス鎖RNAウイルスである．HAV遺伝子型はⅠ型，Ⅱ型，Ⅲ型の3種類に分類され，さらにそれぞれが，A，Bの亜型に分けられている．わが国に常在するHAVの遺伝子型はIA型である．
　HAVの主な感染経路は経口感染で，肝臓で増殖したウイルスが胆汁，腸管より便中に排出され，これらの排泄物がなんらかの経路で口より侵入し感染が成立する．よって主な感染媒体は汚染された水および食べ物である．

B型肝炎ウイルス関連検査

著者：八橋弘

ページ範囲：P.561 - P.563

検査の概要
　現在，保険診療下での検査が可能なB型肝炎ウイルス関連検査は，表1に示すように10種類ある．そのなかでも個々の患者の病態を理解するうえで必要な検査項目は，HBs抗原，HBs抗体，HBc抗体，HBe抗原，HBe抗体，HBV-DNA量である．

C型肝炎ウイルス関連検査

著者：井上貴子 , 田中靖人

ページ範囲：P.564 - P.567

　C型肝炎ウイルス（hepatitis C virus：HCV）は1989年に米国のChooらによって同定報告され，それまで非A非B肝炎と診断されていた患者の9割以上がHCV感染者であることがわかった．HCVは全長約9,600塩基の一本鎖（＋）RNAウイルスである．

そのほかの肝炎ウイルス関連検査—D型肝炎ウイルス，E型肝炎ウイルス

著者：松居剛志 , 田中靖人

ページ範囲：P.568 - P.570

D型肝炎ウイルス（hepatitis D virus：HDV）
形態，構造
　HDVはB型肝炎ウイルス（hepatitis B virus：HBV）と共存することによってのみ増殖し，肝炎を起こす不完全RNAウイルスである．約36nmの球形粒子で，約1.7 kbの環状1本鎖RNAとデルタ抗原蛋白がHBVの3つの表面抗原small，middle，large HBs抗原で覆われている．また，HDVには8つの遺伝子型が存在し，本邦で認められるのはⅠ型とⅡ型が主である．

風疹ウイルス，麻疹ウイルス

著者：南波広行 , 和田靖之

ページ範囲：P.571 - P.573

風疹ウイルス
検査の概要
　一般にウイルス感染症における診断のゴールドスタンダードは，ウイルス分離やPCR法によるウイルス遺伝子の検出である．しかし，これらは健康保険では実施できない．また，検査に時間を要し，実施可能な検査機関も限られるため，血清診断が主となる．風疹では，赤血球凝集抑制反応（HI），酵素抗体法（EIA）が一般的に用いられる．なお，2008年より麻疹，風疹は全例届け出疾患となっている

ムンプスウイルス

著者：和田靖之

ページ範囲：P.574 - P.575

検査の概要
　ムンプスウイルスは，飛沫または接触感染で体内に侵入後，上気道粘膜や所属リンパ節で増殖し，血行性に唾液腺，中枢神経，精巣，卵巣，膵臓，腎臓などの親和性の高い臓器に到達し増殖して流行性耳下腺炎の臨床像を呈する．潜伏期16〜18日後，耳下腺，顎下腺などの腫脹，疼痛，圧痛，それによる食欲不振，唾液の分泌低下，発熱が起こる．耳下腺腫脹は，発症後1〜3日をピークに3〜7日間で消退し，経過として通常1〜2週間を要する．不顕性感染は30％で乳児に多く，年齢とともに典型的な症状を呈する顕性感染が増加する．
　血清抗体価の測定法は一般に4つの測定法がある．

HTLV-1

著者：内丸薫

ページ範囲：P.576 - P.577

検査の概要
　HTLV-1感染症および関連疾患，特に成人T細胞白血病（adult T-cell leukemia：ATL）を疑う場合に，いくつかの検査が必要になる．本稿では診断の流れのなかで要点となる抗体検査，クローナリティ解析の2点に絞って解説を加える．HTLV-1感染の有無は抗体検査により行われる．
◆抗体検査
　抗体検査にはスクリーニングと確認検査があり，前者としては粒子凝集法（PA法），化学発光免疫測定法（CLIA法）が，後者としてはウェスタンブロット法がある．

HIV-1，HIV-2

著者：古賀道子

ページ範囲：P.578 - P.580

　ヒト免疫不全ウイルス（human immunodeficiency virus：HIV）は，主としてCD4陽性Tリンパ球（CD4細胞）とマクロファージ系の細胞に感染するレトロウイルスである．HIV-1はAIDS（acquired immune deficiency syndrome）の原因ウイルスとして，1983年にMontagnierとBarre-Sinoussiにより分離・同定され，2008年ノーベル医学生理学賞を受賞した．その後，HIV-1より増殖が遅く低病原性とされるHIV-2も分離されているが，わが国ではほとんどがHIV-1感染である．

単純ヘルペスウイルス(HSV)，水痘帯状疱疹ウイルス(VZV)

著者：寺田喜平

ページ範囲：P.582 - P.584

検査の概要，異常値の出るメカニズム
◆抗体検出法
　抗体は宿主の生体防御反応の1つであり，間接的ではあるが，その測定は確定診断や免疫の有無を判断するのに利用されている．
　HSV抗体ではEIA（enzyme immunoassay：酵素免疫測定）法，NT（neutralization test：中和試験）法，CF（complement fixation：補体結合反応）法など，VZV抗体ではEIA法，IAHA（immune adherence hemagglutination：免疫粘着血球凝集反応）法，CF法などがある．どちらのウイルスもEIA法ではIgMとIgG抗体を分けて測定することができる．HSV-1型および2型の区別は交差性があるため困難であるが，NT法で区別できる．

EBウイルス

著者：岡村隆行

ページ範囲：P.585 - P.587

検査の概要
　Epstein-Barrウイルス（EBV）が関連する疾患は感染症から悪性腫瘍まで多岐にわたり，疾患に応じた検査の選択が重要である．EBVの初感染の病像の多くは，無症状あるいは伝染性単核症であるが，稀に血球貪食症候群などで発症することもある．一方，慢性感染や再活性化では，慢性活動性EBV感染症，蚊刺過敏症などのEBV関連T/NK細胞増多症，また悪性疾患関連ではリンパ腫，胃癌などに関与している．
　EBVで一般的に可能な検査として，血清抗体価測定，PCRやサザンブロット法によるEBV遺伝子の検索，RT-PCR法を用いた血液や血球中に含まれるゲノム量の測定，EBER（EBV encoded small RNAs）染色を用いた組織中でのEBVの検索などが挙げられ，目的に応じて選択が必要である．なお，EBV関連T/NK細胞増多症では，EBV感染細胞がT細胞あるいはNK細胞であることの証明が必要であるが，現在のところ研究室レベルの検査であり国立成育医療研究センターや名古屋大学などの検査可能な施設に依頼する必要がある．本稿では血清抗体価を中心に概説する．

サイトメガロウイルス

著者：安川正貴

ページ範囲：P.588 - P.589

　サイトメガロウイルス（cytomegalovirus：CMV）は，正式にはヒトサイトメガロウイルス（human cytomegalovirus：HCMV）と呼ばれ，ヘルペスウイルス科βヘルペスウイルス亜科に属する．多くの場合，乳幼児期に不顕性感染し，終生体内にとどまり持続感染（潜伏感染）する．免疫不全，特に細胞性免疫不全状態になると再活性化をきたし，さまざまな症状を呈する¹⁾．

ロタウイルス

著者：前田明彦

ページ範囲：P.590 - P.591

ロタウイルス胃腸炎の病態
　ロタウイルスは，レオウイルス科の2本鎖RNAウイルスで，白色ないし黄白色の下痢を特徴とする胃腸炎を起こす．従来は1〜2月に流行し冬季の嘔吐下痢を引き起こすが，近年，4〜5月の春の感染症に変わってきている．潜伏期間は1〜3日で糞口感染する．
　5歳までにほとんどの子どもが感染する．生涯免疫ではなく，何度でも感染は起きるが，初めての罹患が最も重症化しやすい．予備能の低い0〜2歳児がロタウイルス胃腸炎に罹患すると容易に脱水を起こし，入院を要することも多い．稀に脳症の合併例も経験される．今なお，わが国でも死亡例が報告されており，世界中で1年間に1億1千万人が罹患，200万人が入院し，44万人が死亡している．脱水の極期に腎前性腎不全を起こすことは一般的に認識されていたが，高尿酸血症から尿酸結石を合併し腎後性腎不全を起こす例があることが報告され¹⁾，注目されている．

ノロウイルス

著者：前田明彦

ページ範囲：P.592 - P.594

ノロウイルス胃腸炎の病態
　ノロウイルスはカリシウイルス科に属し，毎年，秋〜冬季に流行する感染性胃腸炎の原因ウイルスである．集団食中毒の原因としても事例件数はカンピロバクターに次いで2位，患者数は1位である．きわめて伝染力が強いことが最大の特徴である．エンベロープを欠くため消毒に安定で失活しにくく，ごく少数のウイルスで感染が成立するので，用心して感染対策を講じても流行を防ぐことが難しい．
　感染経路には，①ヒトの吐物・糞便からヒトへ直接伝播，②ヒトの吐物・糞便から食物汚染を介してヒトへ間接的に伝播，③ウイルスが濃縮・蓄積した二枚貝からヒトへというルートがある．医療の現場で二次感染や院内感染を防ぐためには感染の有無を簡便かつ高精度に確認する方法が求められる．

ヒトパピローマウイルス(HPV)遺伝子

著者：川名敬

ページ範囲：P.595 - P.597

検査の概要
　ヒトパピローマウイルス（HPV）には，100種類以上の遺伝子型genomic typeがある．皮膚に感染するHPVを皮膚型，外生殖器や性器粘膜，気道粘膜に感染するHPVを粘膜型という．粘膜型HPVのうち，子宮頸がん，肛門がん，外陰がん，腟がん，中咽頭がんなどのがんから検出されるHPVをハイリスクHPV，尖圭コンジローマなどの良性乳頭腫から検出されるHPVをローリスクHPVと呼ぶ．図1に示すようにHPVの系統樹をみると皮膚型と粘膜型，ハイリスクとローリスクによって形成される病変は全く異なることがわかる¹⁾．したがって，HPV遺伝子型を推定することは診断に有用である．
　HPV感染症においては，血清抗体検査が商業ベースで存在しないことから，病原体診断としてHPV遺伝子検査（HPV検査）が臨床現場で普及している．HPV検査は，HPVグルーピング検査とHPVタイピング検査に大別される．

その他

つつが虫病

著者：岡山昭彦 , 橘宣祥 , 長友安弘

ページ範囲：P.598 - P.599

　つつが虫病は発熱，発疹，刺し口を3主徴とする感染症であり，山歩きなどの機会に，ダニの一種ツツガ虫の幼虫に刺されることにより，Orientia tsutsugamushiに感染する．4類感染症のなかで2番目に頻度が高く，本邦では北海道を除くすべての地域に発生がみられる．
　体内に侵入したOrientia tsutsugamushiは局所で増殖して炎症病巣を形成し，リンパ行性，血行性に全身に広がり，血管内皮細胞やマクロファージ内で増殖して微小血管炎・血管周囲炎を起こし，全身諸臓器の障害を起こす．感染より7〜14日の潜伏期の後に急激な発熱で発症し，頭痛，悪寒，全身倦怠感，筋肉や関節の痛みを伴う．発疹は2〜5病日に顔面，体幹から出現する．刺し口は径約10mmの黒色痂皮で覆われた潰瘍で周囲に発赤，腫脹を認める．リンパ節腫脹，肝脾腫を伴うことがある．

真菌抗原・抗体

著者：渡辺晋一

ページ範囲：P.600 - P.602

検査の概要
　深在性の真菌症では原因真菌に対する抗体が生じるため，その特異抗体を検出する方法が検討されてきた．しかし，抗体産生は感染から遅れるため，早期診断には役立たない．また多くの深在性真菌症は免疫不全状態であり，必ずしも抗体の産生が十分でない．一方，Candida属真菌などの常在真菌では，健常者でも高い抗体価を示すことがある．
　そこで，最近は血清中に微量に存在する真菌成分（細胞表層多糖，細胞質蛋白など）やその代謝物を検出する方法が開発された．

マラリア

著者：金子明

ページ範囲：P.603 - P.606

検査の概要
　マラリアは，人類にとって最も古くかつ今なお重要な健康問題である．現在世界約200カ国のうち半数でマラリア伝播がある．マラリアによる死亡者数は依然世界全体で年間約60〜100万人にのぼり，その80％は熱帯アフリカの5歳以下小児である．日本でも1955年ぐらいまで土着媒介蚊によるマラリア伝播があった．近年輸入感染症としてマラリアは再び重要度を増している．韓国では1993年よりマラリア伝播が再興し，いまだに続く．マラリアワクチンは完成していない．免疫のない邦人にとってマラリアは死に至る可能性のある急性疾患であるが適切な化学療法により根治できる．重症化を抑えマラリア死を防ぐためには早期診断が要であり，以下のポイントが重要となる．
1)発熱：マラリアを鑑別診断に入れる．

遺伝子検査と染色体検査

悪性腫瘍の遺伝子検査—EGFR変異，KRAS変異，HER2増幅など

著者：宮地勇人

ページ範囲：P.608 - P.611

検査の概要
　遺伝子異常の検出は，腫瘍の存在診断，進行度，生物学的悪性度さらに治療反応性の指標として用いられる．薬物療法における有用な情報を提供するコンパニオン診断への利用が拡大している．
◆治療薬選択の指標
【肺がん・大腸がん】肺がんや大腸がんの組織において，上皮成長因子受容体（epidermal growth factor receptor：EGFR）をコードするEGFRやKRASの変異の有無を調べる．

遺伝病のDNA診断

著者：宮地勇人

ページ範囲：P.612 - P.614

検査の概要
　単一遺伝子疾患（遺伝病）における遺伝学的検査は，発症者の確定診断をはじめ，発症前検査，血縁者の（非発症）保因者検査，あるいは出生前検査として用いられる．
◆発症者の確定診断
　疾患（病型）の確定，重症度や経過などの予後推定に有用である場合に考慮する．

染色体検査

著者：涌井敬子

ページ範囲：P.615 - P.618

検査の概要
　染色体分裂像（メタフェーズ）を得るために生きた細胞を培養し，固定した細胞浮遊液をスライドグラスに展開した標本に，目的に応じた染色を施し，顕微鏡下で観察し，染色体の数および構造の異常について確認する方法が染色体検査の基本である．
【適応】
　先天異常の原因の特定を目的として実施する染色体検査は，以下の場合に適応となる．

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索引

ページ範囲：P.620 - P.627

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バックナンバーのご案内

ページ範囲：P.630 - P.630

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