検査と技術13巻8号

1985年08月発行

基礎実習講座

K_mの求め方

著者： 塚田敏彦¹

所属機関： ¹虎の門病院臨床化学検査部

ページ範囲：P.765 - P.768

　K_mについて理論上の式の導き方は，学校などで学んでいる．しかし，実際に酵素活性や基質濃度の測定法を検討するに当たっては，各基質濃度に対する酵素活性（初速度）を測定し，計算や多くはLineweaver-Burk式などのグラフにプロットしてK_mを求める．そのうえで誤差や試薬の溶解度・安定性および経済性なども考慮して，測定機器にマッチした測定条件を決定しなければならない．
　そこで今回は，そのK_mの求め方について解析する．実習には多くの施設で経験できるよう，わずかな試薬と簡単な比色計のみがあれば，容易にK_m値が求められる基質フェニルリン酸に対する酵素アルカリホスファターゼ（ALP：EC, 3.1.3.1）のK_mの求め方を取り上げた_1）．