検査と技術17巻12号

1989年11月発行

トピックス

高感度TSH測定法

著者： 内村英正¹

所属機関： ¹東大臨床検査医学

ページ範囲：P.1542 - P.1543

　血中TSH（thyroid stimulatinghormone：甲状腺刺激ホルモン）濃度の測定は甲状腺疾患の診断，治療に欠かすことのできないものであるが，最近，測定技術の進歩によりその重要性は著しく増加した．いわゆる高感度TSH測定法が開発される以前には，一般的にcompetitive radioimmunoassayで測定されていた．その方法は，放射性ヨード（¹²⁵I）で標識されたヒトTSH（¹²⁵I-TSH）と，家兎に免疫して得られたヒトTSHに対するポリクローナルの抗体，これに標準TSHあるいは検体血清とを混合し，¹²⁵I-TSH，非標識TSHを競合させて抗体と結合させ，¹²⁵I-TSHの結合の程度から検体血清中のTSH濃度を知る，いわゆる競合アッセイ（competitiveassay）であった．
　この種のアッセイでは最小検出濃度は研究室レベルでは0.25μU/ml程度であり，日常検査レベルでは2μU/ml程度であった．しかし，数年前から①細胞工学の技術を用いてヒトTSHに対するモノクローナル抗体，特にTSHに特異的であると考えられているβ-サブユニットに対するモノクローナル抗体を作ることができたこと，②特異性の高い抗体を標識してTSH分子と特異的に結合させ，その標識体を検出する方法が進歩したこと，③チューブやビーズなどに抗体を均一にコーティングする技術の進歩から固相法が改良されたこと，これらの三つの点での大きな進歩から，固相法によるいわゆるサンドイッチ法が出現した．すなわち，ヒトTSHに対する特異的な抗体をチューブやビーズにコーティングしたものと検体血清中のTSHあるいは標準TSHと結合させ，その後洗浄した後（2ステップ法）あるいは洗浄しないで（1ステップ法）そのままさらに標識された抗体を加えて試験管中のTSHと結合させる．最後に十分に洗浄して固相化抗体・TSHの複合体と結合していない標識抗体を除去した後，標識体を計測するものである（図）．したがって，原理的には計測機器の精度がよければ固相化抗体に結合した1分子のTSHでも測定できるはずであるが，実際には0.01μU/ml程度が最小検出濃度となっている．