検査と技術19巻7号

1991年06月発行

増刊号 臨床血液検査 I．形態学的検査 1．形態学的検査の実際

12）polymerase chain reaction法

著者： 北村聖¹

所属機関： ¹東京大学医学部臨床検査医学教室

ページ範囲：P.82 - P.87

はじめに
　polymerase chain reaction（PCR）はDNAポリメラーゼ反応を利用したDNAの増幅法である．この方法は最近，開発され，短期間に多くの分野で応用された，遺伝子解析における画期的方法である．
　この反応の媒体である酵素DNAポリメラーゼは，一本鎖DNAを鋳型にして相補的なDNAを合成するが，その反応の開始にはプライマーすなわち開始点に当たる短い二重鎖部分を必要とする．したがって，適当なプライマーを利用することにより，それを開始点とする目的のDNA領域を合成できる．生体のDNAは通常，二本鎖であるので，分析したいDNA領域を挟む二つのプライマーを用いることにより，1回の反応でその領域を倍化できる．このDNAポリメラーゼ反応を繰り返すのがPCR法の原理であり，n回のサイクルにより原理的には2のn乗倍（2ⁿ）にDNAを増幅できることになる．重要な点は，PCR法を用いれば検体中の分析したいDNA領域だけを数十万倍にも増幅できるので，分析の大幅な高感度化，微量化を達成することができるようになったことである．PCRの感度は計算上も，文献的にも，1分子のDNAを検出できるという驚くべきものである．