検査と技術22巻5号

1994年04月発行

増刊号 免疫検査実践マニュアル 総論 Ⅱ．免疫学的測定法 5．標識免疫測定法

（4）蛍光イムノアッセイ（FIA）

著者： 橋本琢磨¹ 西部万千子²

所属機関： ¹金沢大学医学部臨床検査医学 ²金沢大学医学部附属病院検査部

ページ範囲：P.61 - P.66

■蛍光測定の原理
　光の照射により基底状態のπ電子が励起エネルギーを吸収し励起状態となり，基底状態に戻る際には光を放出する．放出される光子（蛍光）のエネルギーは，吸収される光子のエネルギーよりも常に小さい．このため蛍光スペクトルと吸収スペクトルを比較すると，蛍光帯は常に吸収帯より長波長側に現れる（stokes shift）．蛍光物質は特有のスペクトル特性を有するため，使用する蛍光物質については，励起スペクトルと蛍光スペクトルを測定し，各スペクトルの極大吸収を求めて試料測定時の励起波長（ex. max）ならびに蛍光波長（em. max）を選択する．蛍光物質の蛍光特性（蛍光スペクトル，蛍光強度，蛍光量子収率^注1））は，溶液の環境因子，特に溶媒，温度，pHおよび化学構造の影響を強く受ける．
　注1）吸収した光エネルギーが蛍光となる効率．