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通常軽く水洗した後,0.5〜1%アルコールに浸して分別を行うが,図にその原理を示す.細胞(核と細胞質)全体を濃く染めて,酸(H+)に浸すと,細胞質に結合していたレーキと水素イオン(H+)とが交換し,その結果細胞質の部分の色が抜ける.しかしあまり長時間浸すと,核に結合していたレーキも水素イオンと交換してしまい色が落ちてしまう.
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