検査と技術30巻10号

2002年09月発行

増刊号 誰でもわかる遺伝子検査 Ⅱ．各論—遺伝子検査はどういうときに必要なのか 2．技術編—遺伝子検査を活用するための知識 3）分析法／解析法

（3）ノーザンブロット・ハイブリダイゼーション法

著者： 酒井正春¹

所属機関： ¹北海道大学大学院医学研究科分子生化学講座分子生物学分野

ページ範囲：P.953 - P.957

はじめに
　遺伝子発現の解析，すなわち特異的なmRNAの量，大きさなどを調べる最もオーソドックスな方法が「ノーザンブロット・ハイブリダイゼーション法」である．変性したRNAを変性条件下のアガロース電気泳動で分離し，フィルターに移して標識した特異的なプローブで検出する．ほぼ同様の目的で用いられるRNaseプロテクションアッセイ（リボプローブマッピング）やプライマー伸長法に比べると，RNAのサイズを調べられる点，類似のRNAやスプライスされる前の前駆体など，プローブがハイブリダイズし得るRNAの全体像を検出することができる点が長所である．検出感度はRNaseプロテクション法よりやや劣る．RNAを変性する方法によっていくつかの方法が知られているが，ここでは最もよく使われ，信頼性も高いホルムアルデヒドを用いる方法を紹介する．