検査と技術33巻8号

2005年08月発行

技術講座 病理

染色骨髄液塗抹標本を用いたDNA抽出と微小残存病変検索への臨床応用

著者： 宮西節子¹

所属機関： ¹（財）天理よろづ相談所医学研究所

ページ範囲：P.715 - P.718

新しい知見

　染色後数年間保存された骨髄液塗抹標本からDNAを抽出した報告は極めて少ないので，基礎的検討を行いさらに微小残存病変の検出に臨床応用した．

　塗抹標本は細胞溶解液で塗抹部分を剥離し，プロテイナーゼK消化後，フェノール/クロロホルム法で精製した．標本1枚からの抽出量は5.4±3.26μg(平均±SD)で，PCR法によるβ-グロビン遺伝子の増幅可能なサイズは，3年間保存した塗抹標本では4/5例で536bp，4～5年間保存では1/5例で268bpを増幅することができた．目的とする遺伝子の増幅サイズを考えたプライマーを設計することにより，微小残存病変(minimal residual disease，MRD)検出をはじめとする多様な遺伝子検査に応用することができる．