検査と技術34巻9号

2006年09月発行

技術講座 生化学

平衡法と初速度法

著者： 山舘周恒¹

所属機関： ¹日本大学医学部附属板橋病院臨床検査部

ページ範囲：P.825 - P.829

文献概要

新しい知見

　酵素的分析法は平衡法と初速度法に大別されるが，オキシダーゼ系酵素を利用した平衡法で汎用されるパーオキシダーゼ(peroxidase)検出系(POD系)ではアニリン誘導体を中心とした水素イオン供与体の開発が進み，吸収帯が長波長側にシフトした呈色が選ばれるようになった．また，高感度な測定に利用されるPOD系にロイコ型の色原体も実用化された．初速度法による成分系の測定では，K_m値の大きい酵素を用いる必要があるが，ミカエリス-メンテンの反応速度式(Michaelis-Menten equation of enzyme kinetics)を応用して，使用する酵素のK_m値から一定の誤差内での測定可能域を算出することができる．

参考文献

1）　松本宏治郎：4 . 酵素的分析法．臨床化学実践マニュアル，検査と技術(増刊号)　21：279-286，1993

2）　等々力徹，松本宏治郎，加野象次郎：速度法による基質濃度の酵素的測定法成立条件の基礎的検討．臨床化学　10：325-331，1981

3）　Good NE, Winget GD, Winter W, at al:Hydrogen ion buffers for biological research. Biochemistry　5：467-477，1966

4）　山舘周恒，長村洋一：酵素活性測定に用いられる緩衝液・基質．Medical Technology　31：429-435，2003

5）　山舘周恒，関口光夫：Ⅱ. 試薬調製の基本―緩衝液の種類，調製法，使い分け，図説　臨床化学と遺伝子検査に必要な基本技術と理論．臨床病理レビュー特集128号，臨床病理刊行会，pp15-24，2004

-POD系．臨床検査　41：1014-1019，1997

7）　田添栄：臨床化学で汎用される酵素反応．Medical Technology　33：613-618，2005

8）　Trinder P.:Determination of glucose in blood using glucose oxidase with an alternative oxygen acceptor. Ann Clin Biochem　6：24-27，1969