検査と技術36巻6号

2008年06月発行

私の一推し免疫染色

cleaved caspase 3 免疫染色―優れた組織化学的アポトーシス検出法

著者： 鴨志田伸吾¹ 堤寛²

所属機関： ¹神戸大学大学院保健学研究科病態解析学領域 ²藤田保健衛生大学医学部第一病理学講座

ページ範囲：P.504 - P.506

文献概要

はじめに

　アポトーシスの組織化学的証明法として，ヌクレオソーム単位のDNA断片化を検出するterminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-biotin nick end labeling(TUNEL)法，in situ nick translation法や単鎖DNA免疫染色が広く利用されてきた．しかし，これらの証明法は，固定を含めた標本作製過程や標本採取時の影響により偽陽性・偽陰性反応を生じやすいだけでなく，再現性を高めるための前処理(増感法)を含めた技術論にも不安定な側面を有している^1，2）．

　近年，アポトーシス誘導因子，実行因子の同定とシグナル伝達経路の解析が盛んに行われ，アポトーシスにおいて生じる生化学的・形態学的変化の多くは，システインプロテアーゼの一種であるcaspasesによる特定蛋白質の限定分解に依存することが解明された．なかでもcaspase3はアポトーシス実行過程における中心的酵素であり，活性化されたcaspase3(cleaved caspase3，c-caspase3)を検出することで，組織・細胞内のアポトーシスをDNA断片化よりも早い段階から捉えることができる．加えてc-caspase3免疫染色は技術的に安定しており，感度および再現性に優れた組織化学的アポトーシス検出法である^1，2）．

　癌治療においてもアポトーシスは抗腫瘍効果発現に重要な役割を担っており，化学療法および放射線療法はアポトーシス誘導因子として理解されている．したがって，本稿では化学療法・放射線療法によって誘導されるアポトーシス経路におけるc-caspase3の位置づけについて概説する．次いで，癌臨床に連携した免疫組織化学の視点から治療の効果判定，治療効果・患者予後の予測におけるc-caspase3検出の意義について言及する．

参考文献

1) Tsutsumi Y, Kamoshida Su:uPitfalls and caveats in histochemically demonstrating apoptosis. Acta Histochem Cytochem　36：271-280，2003

2) 堤寛，塩竃和也，鴨志田伸吾：病理医に必要なワンポイント病理技術　第13回．アポトーシスの組織化学．病理と臨床　23：403-416，2005

3) 仲田文造，平川弘聖：がん化学療法の効果とアポトーシス関連蛋白．北島政樹，佐治重豊(編)：がん治療におけるアポトーシスの応用．医薬ジャーナル社，pp11-20，2001

4) Kobayashi T, Masumoto J, Tada T, et alu:uPrognostic significance of the immunohistochemical staining of cleaved caspase-3, an activated form of caspase-3, in gliomas. Clin Cancer Res　13：3868-3874，2007

5) McPartland JL, Guzail MA, Kendall CH, et alu:uApoptosis in chronic viral hepatitis parallels histological activityu:uan immunohistochemical investigation using anti-activated caspase-3 and M30 cytodeath antibody. Int J Exp Pathol　86：19-24，2005