検査と技術39巻4号

2011年04月発行

Laboratory Practice 〈生化学〉

3次元電気泳動法の臨床応用

著者： 中野恵一¹ 森山隆則²

所属機関： ¹北海道大学大学院保健科学院 ²北海道大学大学院保健科学研究院

ページ範囲：P.318 - P.320

文献概要

はじめに

　3次元電気泳動(three dimensional gel electrophoresis，3DE)法は，アガロース電気泳動，等電点電気泳動(isoelectric focusing，IEF)およびsodium dodecyl sulfate-polyaclylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)法を組み合わせたものである．3-DE法の特徴は，M蛋白解析に広く用いられてきた2-DE(IEF/SDS-PAGE)法における残余正常免疫グロブリンや他クローン産生M蛋白などの共存蛋白質による影響を回避し，単一クローン産生のM蛋白にのみ焦点を当て解析することが可能であることである．しかしながら，3-DE法を用いたM蛋白解析に関する報告が散見される一方，その方法は定まっていない．従来，アガロース電気泳動法にて分離されたM蛋白は，市販のゲルフィルムから変性・還元溶液を用いて抽出されてきたが，Vuら^1）はアガロースゲルからM蛋白の抽出法を改良し，溶液を用いることなく遠心分離により抽出した．しかしながら，方法に改良が成されているものの，その改良に対する評価は全く実施されていない．そこで筆者らは，現在までに，3-DE法の至適条件を検討し，確立した方法を応用してM蛋白多様性解析を実施してきた．

　本稿では，筆者らの確立したmodified 3-DE法について総括し，筆者らが実施したM蛋白多様性解析および臨床応用への展望について解説する．

参考文献

1) Vu DH, Schneider P, Tissot JD:Electrophoretic characteristics of monoclonal immunoglobulin G of different subclasses. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci　771：355-368，2002

2) Aurer I, Lauc G, Dumic J, et al:Aberrant glycosylation of Igg heavy chain in multiple myeloma. Coll Antropol　31：247-251，2007

3) Fleming SC, Smith S, Knowles D, et al:Increased sialylation of oligosaccharides on IgG paraproteins--a potential new tumour marker in multiple myeloma. J Clin Pathol　51：825-830，1998

4) Ilic V, Milosevic-Jovcic N, Petrovic S, et al:Signaling status of IgG B cell receptor (IgG BCR) is indicative for an activated state of circulating B cells in multiple myeloma. Ann Hematol　86：905-912，2007

5) Ilic V, Milosevic-Jovcic N, Petrovic S, et al:Glycosylation of IgG B cell receptor (IgG BCR) in multiple myeloma:relationship between sialylation and the signal activity of IgG BCR. Glycoconj J　25：383-392，2008

6) Harrison HH:Patient-specific microheterogeneity patterns of monoclonal immunoglobulin light chains as revealed by high resolution, two-dimensional electrophoresis. Clin Biochem　25：235-243，1992

7) Mimura Y, Nakamura K, Tanaka T, et al:Evidence of intra- and extracellular modifications of monoclonal IgG polypeptide chains generating charge heterogeneity. Electrophoresis　19：767-775，1998