検査と技術49巻6号

2021年06月発行

技術講座 微生物

これから始めるリアルタイムRT-PCR—新型コロナウイルスの検出方法を例に

著者： 中村彰宏¹

所属機関： ¹天理医療大学医療学部臨床検査学科

ページ範囲：P.664 - P.670

Point

●遺伝子検査は従来のculture-based methodでは捉えきれない感染症病原体の検出において大変有用である．

●RNAはDNAに比べて不安定であるため，検査実施時はRNaseの混入を防止することを常に意識して操作する．

●リアルタイムRT-PCRにおいて内部コントロール不良や非特異反応を生じた場合は，スピンカラム法によるRNA抽出やシークエンス解析の実施を考慮する．

●遺伝子検査においては内部精度管理が極めて重要であり，内部コントロール，陽性コントロールおよび陰性コントロールの反応を必ずチェックする．

参考文献

1）厚生労働省：新型コロナウイルス感染症（COVID-19）病原体検査の指針，第2版（https://www.mhlw.go.jp/content/000696201.pdf）（2021年1月21日アクセス）

2）国立感染症研究所：病原体検出マニュアル 2019-nCoV Ver.2.9.1（https://www.niid.go.jp/niid/images/lab-manual/2019-nCoV20200319.pdf）（2021年1月21日アクセス）

3）東洋紡：新型コロナウイルス検出キット-マルチ-（SARS-CoV-2 Detection Kit -Multi-）取扱説明書（2020年10月2日改訂）https://lifescience.toyobo.co.jp/user_data/pdf/products/manual/NCV-301_302.pdf（2021年2月26日アクセス）

™ 1-Step Kit添付文書（https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/4392653#/4392653）（2021年2月26日アクセス）

™ 1-Step Kit添付文書（https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/4389986#/4389986）（2021年2月26日アクセス）