生体の科学38巻5号

1987年10月発行

特集 細胞生物学における免疫実験マニュアル 抗体の作製と吟味

免疫拡散法

著者： 大日方昻¹

所属機関： ¹千葉大学理学部

ページ範囲：P.404 - P.405

　免疫拡散法は，抗原，抗体あるいはその両者を種々の支持体内で拡散させ，生じた沈降線（帯）を観察する方法であり，ゲル内拡散法ともよばれている。支持体としては寒天（またはアガロース）ゲル，セルロースアセテート膜その他が用いられている。近年，モノクローン抗体法の登場およびそれに関連して，イムノブロット法などの新しい抗体検定法の開発により，免疫拡散法の重要性はやや薄れたかにみえる。しかし，依然として重要な実験手技であることに変わりはない。この方法の利点として，1）抗体，抗原が拡散過程で希釈されてそれぞれの濃度勾配ができ，適切な濃度域で沈降線を生ずる。したがって，かなり広範囲の抗体，抗原濃度で免疫反応を検出できる，2）免疫沈降線の数と位置関係から，抗体の純度，抗原蛋白質の免疫学的類似性を知れる，3）抗原濃度の算出ができること，などがあげられよう。一般的に，モノクローン抗体の場合には免疫沈降を生じないので，この方法は使えない。免疫拡散法には種々の方法があるが，紙面の制約からここでは，主にOuchterlony法について述べ，他の方法はごく簡単にふれるにとどめる。不足の点は，他の実験書^1-4）を参照されたい。