生体の科学38巻5号

1987年10月発行

特集 細胞生物学における免疫実験マニュアル 抗体の標識

酵素標識法

著者： 中根一穂¹ 和泉伸一¹

所属機関： ¹東海大学医学部細胞生物学教室

ページ範囲：P.418 - P.420

　抗体にペルオキシダーゼを標識する操作であるが，初期にはペルオキシダーゼと抗体分子中のアミノ基をFNPS（p,p′-difluoro-m，m′-dinitro diphenyl sulfone）やグルタールアルデヒドなどのbifunctional reagentを用いて結合する方法がとられた。しかし，ペルオキシダーゼ中のfreeなアミノ基が少ないため効率よい標識ができなかった。そこで考案されたのがNakane and Kawaoiによる，ペルオキシダーゼ中の糖を利用し，アルデヒド化させ，それを抗体分子中のアミノ基に結合させる方法である（図1）。これにより効率の良い標識抗体が作製されるようになった。現在までに本法にいくつかの改良が加えられている。本免疫実験マニュアルでは当教室で現在施行しているWilson and Nakane^1）による改良方法の手順を記載する。