生体の科学38巻5号

1987年10月発行

特集 細胞生物学における免疫実験マニュアル

抗体の免疫化学的応用

イムノブロッティング（ウエスタンブロット，ドットブロット）

著者： 尾形研二¹

所属機関： ¹栄研化学イムノケミカル研究所研究部研究一課

ページ範囲：P.430 - P.431

文献概要

　イムノブロッティングは1980年代に急速に発達した蛋白質の分析技術の一つであり，高分解能のポリアクリルアミドゲル電気泳動（PAGE）と組み合わせることにより，きわめて有用な技術となった^1）。現在ではスラブゲルによるSDS-PAGEと組み合わせて使うのが一般的である。その原理はSDS-PAGEによって分離された蛋白質をさらに電気泳動によってスラブゲルからニトロセルロース膜へ転写し，膜上に固相化された蛋白質を特異抗体によって検出するというものである。それに対し，ドットブロッティングは蛋白質溶液を直接ニトロセルロース膜上に滴下し，膜に結合した蛋白質を上記と同様に検出するものである。抗体を使ってニトロセルロース膜上の抗原を検出する方法には多くのバリエーション^2）が考えられるが，ここでは高感度で利用価値の高いストレプトアビジンとビオチンの系を使った酵素抗体法について述べることにする。またSDS-PAGEについては紙面の都合上ここでは省略するので，他の文献^3,4）を参考にしていただきたい。