生体の科学38巻5号

1987年10月発行

特集 細胞生物学における免疫実験マニュアル 抗体の免疫形態学的応用

酵素抗体法（PAP，Alkaline phosphatase，ABC，double staining）

著者： 中根一穂¹ 和泉伸一¹

所属機関： ¹東海大学医学部細胞生物学教室

ページ範囲：P.462 - P.464

　■原理
　酵素抗体法の実施にあたり，（1）直接法（Direct method），（2）間接法（Indirect method），（3）PAP法（Peroxidase-anti-peroxidase），（4）ABC法（Avidin-biotin-complex）などの他，数種の方法があるが，上記四つの方法について説明する。
　1．直接法（図1，414頁「直接法と間接法の問題点」　図1参照）
　この方法は抗体に直接，酵素（horseradish peroxidase，HRP）を標識して，HRP標識抗体（図省略）と組織内抗原（図省略）とを反応させる。この反応後，酵素組織化学的に3,3'-diaminobenzidine（DAB）とH₂O₂を基質として，HRPの局所分布を検出することにより，組織内抗原の局在の証明をする。