生体の科学43巻5号

1992年10月発行

特集 〈研究室で役に立つ細胞株〉

Ⅶ．その他の細胞株 ハイブリドーマ

ニワトリDNAポリメラーゼα-プライマーゼに対するモノクローナル抗体を中心に

著者： 松影昭夫¹

所属機関： ¹愛知県がんセンター研究所生物学部

ページ範囲：P.536 - P.537

文献概要

　■樹立の経緯^1）
　ハイブリドーマの作成は，少なくともマウスミエローマ細胞を用いるものについては，方法論的には完全に確立され，広く普及しており改めて記述する必要はないであろう。抗体の検出法さえ確立しておけば，どのような抗原に対するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマも樹立することは可能であり，また一旦樹立すると，得られる抗体量は労さえ厭わなければ無限である。得られている抗体やその利用法は多岐にわたり，いまや膨大な情報が蓄積されている。ここでは一つの例として，われわれの行ってきたモノクローナル抗体を用いたDNA複製酵素の解析について概説する。
　われわれのグループでは1979年から，ニワトリ胚を材料にして，当時知られていた3種のDNAポリメラーゼ（以下polと略す）の系統的な精製を始め，約1年後にはその方法を確立していた。当初から，抗体を作成し将来は遺伝子クローニングまで行うことを目的としていた。ニワトリを選んだ理由は，安価なこと（受精卵でよい）の他に，哺乳類のものより高い抗原性を持つと期待していたためである。高い純度の標品が得られたpolβとγについては，従来の方法でポリクローナル抗体を作成し，収率を犠牲にしても純度が80％程度にしか上がらないpolαに対してはハイブリドーマ法を選んだ。