臨床婦人科産科60巻1号

2006年01月発行

今月の臨床 ART 2006 ART成功率向上のための要点

胚の凍結保存法

著者： 宇津宮隆史¹

所属機関： ¹セント・ルカ産婦人科、セント・ルカ生殖医療研究所

ページ範囲：P.71 - P.77

はじめに

　体外受精・胚移植（IVF─ET）の進展に伴って，未移植胚の凍結保存は不妊診療においてすでに重要な位置を占めている．また，日本産婦人科学会のガイドラインでは，生殖補助医療（ART）を行う施設は胚の凍結ができなければならないとしている．ここで凍結操作による胚への影響が気になるが，われわれの研究ではその染色体に与える影響はほとんどないことが判明している^1）．さらに凍結後の妊娠率は表1に示すように通常のIVF─ETに比較して遜色はない．

　最近では，凍結方法は従来のプログラム・フリーザーを用いたslow freezing法から，より簡便なvitrification法が行われ，妊娠例も報告されるようになってきた^2～5）．Vitrification法では，胚の各stageでの凍結・保存が可能であり，またそれに要する時間も15分程度で終了する．しかし，slow freezingに比較し高濃度の耐凍剤を要し，氷晶成長域を短時間に通過するべく急速に凍結する必要がある．

　本稿では，すでに行われているslow freezing法と今後広く行われるであろうvitrification法について述べ，その応用方法についても言及したい．

参考文献

1）大津英子，公文麻美，城戸京子，他 : ヒト胚における再凍結は安全か？大分市医師会医学雑誌アルメイダ医報27 : 115─117, 2002

2）Van den Abbeel E, Camus M, Van Waesberghe L, et al : A randomized comparison of the cryopreservation of one─cell human embryos with a slow controlled─rate cooling procedure or a rapid cooling procedure by direct plunging into liquid nitrogen. Hum Reprod 12 : 1554─1560, 1997

3）Yokota Y, Sato S, Yokota M, et al : Successful pregnancy following blastocyst vitrification : case report. Hum Reprod 15 : 1802─1803, 2000

4）熊迫陽子，公文麻美，宇津宮隆史，他 : 感染防止のためにストローを用いた前核期胚vitrification法による妊娠成功について．臨婦産57 : 1576─1579, 2003

5）Kumasako Y, Kumon M, Utsunomiya T, et al : Successful pregnancy after the vitrification of zygotes using commercial vitrification solutions and conventional straws to protect against infections in liquid nitrogen. J Assist Reprod Genet 22 : 33─35, 2005

6）Ishimori H, Saeki K, Inai M, et al : Vitrification of bovine embryos in a mixture of ethylene glycol and dimethyl sulfoxide. Theriogenology 40 : 427─433, 1993

7）Emiliani S, Van den Bergh M, Vannin AS, et al : Comparison of ethylene glycol, 1,2─propanediol and glycerol for cryopreservation of slow─cooled mouse zygotes, 4─cell embryos and blastocysts. Hum Reprod 15 : 905─910, 2000

8）Lane M, Schoolcraft WB, Gardner DK : Vitrification of mouse and human blastocysts using a novel cryoloop container─less technique. Fertil Steril 72 : 1073─1078, 1999

9）Kuleshova LL, Shaw JM : A strategy for rapid cooling of mouse embryos within a double straw to eliminate the risk of contamination during storage in liquid nitrogen. Hum Reprod 15 : 2604─2609, 2000

10）Fountain D, Ralston M, Higgins N, et al : Liquid nitrogen freezers : a potential source of microbial contamination of hematopoietic stem cell components. Transfusion 37 : 585─591, 1997

11）Bielanski A, Nadin─Davis S, Sapp T, et al : Viral contamination of embryos cryopreserved in liquid nitrogen. Cryobiology 40 : 110─116, 2000

12）Chen SU, Lien YR, Chao KH, et al : Cryopreservation of mature human oocytes by vitrification with ethylene glycol in straws. Fertil Steril 74 : 804─808, 2000

13）Kumon M, Kumasako Y, Utsunomiya T, et al : A vitrification method by means of a straw to prevent infections in mouse pronuclear embryos. J Mamm Ova Res 20 : 124─128, 2003

14）公文麻美，熊迫陽子，宇津宮隆史，他 : マウス前核期胚を用いた感染防止のためのストロー法によるvitrificationの検討．臨婦産57 : 1571─1575, 2003

15）Letur─Konirsch H, Collin G, Sifer C, et al : Safety of cryopreservation straws for human gametes or embryos : a study with human immunodeficiency virus─1 under cryopreservation conditions. Hum Reprod 18 : 140─144, 2003