臨床検査42巻7号

1998年07月発行

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研究

胃癌組織のパラフィン切片を用いたin situ Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reactionによるp53mRNAの検出―DNaseによる消化効果の検討

著者： 西野信一¹ 福地邦彦² 小林英昭¹ 嘉悦勉¹ 河村正敏¹ 草野満夫¹

所属機関： ¹昭和大学医学部第二外科学教室 ²昭和大学医学部臨床病理学教室

ページ範囲：P.823 - P.826

　in situ RT PCR法においてゲノムDNAの消化条件の設定は，重要な要因の1つである．われわれは胃癌組織のパラフィン切片を用いてゲノムDNAの消化条件の設定を目的とした．
　①1N HCl室温30分間とDNase4倍希釈37℃16時間の条件でゲノムDNAが消化できた．②1N HCl室温30分とDNase2倍希釈，37℃4時間の条件でゲノムDNAの消化は不十分であり，消化には16時間を要した．③残存Proteinase Kを加熱処理で失活させることによりDNaseの消化作用を高めた．
　これらの結果により，ゲノムDNAが消化できmRNAの局在を形態学的に確認でき臨床材料への応用が期待できる．