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臨床検査42巻9号

1998年09月発行

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今月の主題 in situ hybridization

技術解説

in situ PCR法による微量遺伝子の解析

著者：山王 なほ子¹ 著者：長村 義之²

所属機関：¹日本医科大学脳神経外科 所属機関：²東海大学医学部病態診断系病理学

ページ範囲：pp.996-1002

キーワード：

polymerase chain reaction  ,  PCR  ,  in situ PCR  ,  mRNA

文献概要

　in situ PCR法は組織切片上ないし個々の細胞内でpolymerase chain reaction （PCR）法を用いて特定の遺伝子の増幅を行い，微量遺伝子を検出する方法として考案された．その概略は，①組織切片の準備，②酵素処理など前処置，③mRNAのcDNAへの逆転写，④プライマーと耐熱性ポリメラーゼを用いたPCR反応，⑥標識プローブによるhybridization，⑥洗浄，発色によるシグナルの可視化．以上のステップから成り立つ．このin situ RT-PCR法の実際と，有用性について述べる．

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