臨床検査50巻7号

2006年07月発行

今月の主題 ホルマリン固定パラフィン包埋標本からどこまで遺伝子検索は可能か？ 総説

ホルマリン固定パラフィン包埋標本でどこまでmRNA in situ hybridizationは可能か？―その有効性と問題点

著者： 長塩亮¹² 佐藤雄一¹ 中島孝²

所属機関： ¹北里大学医療衛生学部遺伝子検査学教室 ²群馬大学大学院医学系研究科応用腫瘍病理学

ページ範囲：P.737 - P.744

　早期診断や患者個人に合わせた治療が期待される今，これらに関与する分子の探索が患者間や健常者との比較解析などにより急速に行われている．見いだされた分子の機能解析を行う際，その一つの手法として特定の遺伝子のmRNA発現を組織や細胞上で検索することが可能なin situ hybridization法がある．今回，ホルマリン固定パラフィン包埋組織を用いたISH法を環境や手技上の注意点，さらにその応用例も交えて初心者にもわかるように解説する．〔臨床検査　50：737-744，2006〕

参考文献

　１) Jiang SX, Kameya T, Asamura H, et al：hASH1 expression is closely correlated with endocrine phenotype and differentiation extent in pulmonary neuroendocrine tumors. Mod Pathol 17：222-229, 2004

　２) 佐藤雄一，土屋紅緒，橋詰薫，他：21. CSA法を用いたin situシングルコピーDNAの検出．脱アイソトープ実戦プロトコール（野村慎太郎 編)，秀潤社，pp224-235, 1998

　３) Kersteins HM, Poddinghe PJ, Hanselaar AG：A novel in situ hybridization signal amplification method based on the deposition of biotinylated tyramide. J Histochem Cytochem 43：347-352, 1995

　４) Divjak M, Glare EM, Walters EH：Improvement of non-radioactive in situ hybridization in human airway tissues：use of PCR-generated templated for synthesis of probes and an antibody sandwich technique for detection of hybridization. J Histochem Cytochem 50：541-548, 2002

　５) 土屋紅緒，佐藤雄一，亀谷徹：MicroProbe法．病理と臨床　18(臨増)：8-10, 2000

　６) Sato Y, Tsuchiya B, Nagashio R, et al：A rapid and highly sensitive in situ mRNA hybridization method with digoxigenin labeled cRNA probes. J Histotechnol (in press)

　７) 佐藤雄一，土屋紅緒：I. 病理検査81光顕的ISH．新染色法のすべて，医歯薬出版，pp212-216, 1999

　８) 佐藤雄一，土屋紅緒，亀谷徹：b. 細胞標本を用いたin situ hybridization法．病理と臨床　20(臨増)：78-85, 2002

　９) Oh-ishi M, Satoh M, Maeda T：Preparative two-dimensional gel electrophoresis with agarose gels in the first dimension for high molecular mass proteins. Electrophoresis　21：1653-1669, 2000

　10) Takanami I, Takeuchi K, Watanabe H, et al：Significance of autocrine motility factor receptor gene expression as a prognostic factor in non-small-cell lung cancer. Int J Cancer　95：384-387, 2001

　11) Tanizaki Y, Sato Y, Oka H, et al：Expression of autocrine motility factor mRNA is a poor prognostic factor in high-grade astrocytoma. Pathol Int (in press)