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シリーズ最新医学講座・Ⅱ 耐性菌の基礎と臨床・7 主として市中感染で問題となる耐性菌・1
肺炎マイコプラズマ(基礎編)
著者: 成田光生1
所属機関: 1札幌鉄道病院小児科
ページ範囲:P.923 - P.926
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肺炎マイコプラズマ(Mycoplasma pneumoniae,以下単にマイコプラズマ)の薬剤耐性菌に関しては,現在野生でその存在が証明されているのは23Sリボソーム(r)RNAの点突然変異を耐性機構とするマクロライド-リンコサミド耐性のみである.またマイコプラズマのリボソームにはオペロンが1つしか存在しない.したがってマイコプラズマにおいては,その遺伝子型(genotype)と表現型(phenotype)がよく一致することが興味深い点である.本稿では,実際の臨床分離株における薬剤感受性試験の結果と遺伝子変異の検索結果を基に,薬剤耐性マイコプラズマの生物学的特徴を解説する.なお具体的な実験方法などについては別に報告があるので,詳細は略する1~5).
マイコプラズマ野生株の分離は通常の滅菌綿棒にて患者の咽頭あるいは扁桃粘膜を擦過し,自家製のPPLO(Pleuro-Pneumonia-Like Organism)培地を用いて行った.薬剤感受性試験は,神奈川県衛生研究所にて微量液体培地希釈法(マイクロプレート法)を用いて行った.23Sr RNAドメインⅤにおける遺伝子変異の検索は,国立感染症研究所にてnested PCR法と直接塩基配列決定法を用いて行った.また,小児気道感染患者喀痰から抽出されたDNAを用いて,retrospectiveに耐性遺伝子変異を有するマイコプラズマの存在も検索した.前述のごとく,マイコプラズマにはリボソームのオペロンは1つしか存在せず,したがってリボソーム遺伝子に耐性変異を有する菌はそのまま耐性菌であると考えて良い.
肺炎マイコプラズマ(Mycoplasma pneumoniae,以下単にマイコプラズマ)の薬剤耐性菌に関しては,現在野生でその存在が証明されているのは23Sリボソーム(r)RNAの点突然変異を耐性機構とするマクロライド-リンコサミド耐性のみである.またマイコプラズマのリボソームにはオペロンが1つしか存在しない.したがってマイコプラズマにおいては,その遺伝子型(genotype)と表現型(phenotype)がよく一致することが興味深い点である.本稿では,実際の臨床分離株における薬剤感受性試験の結果と遺伝子変異の検索結果を基に,薬剤耐性マイコプラズマの生物学的特徴を解説する.なお具体的な実験方法などについては別に報告があるので,詳細は略する1~5).
マイコプラズマ野生株の分離は通常の滅菌綿棒にて患者の咽頭あるいは扁桃粘膜を擦過し,自家製のPPLO(Pleuro-Pneumonia-Like Organism)培地を用いて行った.薬剤感受性試験は,神奈川県衛生研究所にて微量液体培地希釈法(マイクロプレート法)を用いて行った.23Sr RNAドメインⅤにおける遺伝子変異の検索は,国立感染症研究所にてnested PCR法と直接塩基配列決定法を用いて行った.また,小児気道感染患者喀痰から抽出されたDNAを用いて,retrospectiveに耐性遺伝子変異を有するマイコプラズマの存在も検索した.前述のごとく,マイコプラズマにはリボソームのオペロンは1つしか存在せず,したがってリボソーム遺伝子に耐性変異を有する菌はそのまま耐性菌であると考えて良い.
参考文献
1) Okazaki N, Narita M, Yamada S, et al:Characteristics of macrolide-resistant Mycoplasma pneumoniae strains isolated from patients and induced with erythromycin in vitro. Microbiol Immunol 45:617-620, 2001
2) Matsuoka M, Narita M, Okazaki N, et al:Characterization and molecular analysis of macrolide-resistant Mycoplasma pneumoniae clinical isolates obtained in Japan. Antimicrob Agents Chemother 48:4624-4630, 2004
3) Suzuki S, Yamazaki T, Narita M, et al:Clinical evaluation of macrolide-resistant Mycoplasma pneumoniae. Antimicrob Agents Chemother 50:709-712, 2006
4) 成田光生:マクロライド耐性マイコプラズマ野生株の性状解析と,その臨床医学に関わる問題点.「百日咳菌,ジフテリア菌,マイコプラズマ等の臨床分離菌の収集と分子疫学的解析に関する研究」厚生労働科学研究費補助金(新興・再興感染症研究事業)平成15年度総括・分担研究報告書,pp41-48, 2004
5) 成田光生:マクロライド耐性肺炎マイコプラズマの性状と,その臨床における問題点.「百日咳菌,ジフテリア菌,マイコプラズマ等の臨床分離菌の収集と分子疫学的解析に関する研究」厚生労働科学研究費補助金(新興・再興感染症研究事業)平成16年度総括・分担研究報告書,pp55-63, 2005
6) Morozumi M, Hasegawa K, Kobayashi R, et al:Emergence of macrolide-resistant Mycoplasma pneumoniae with a 23SrRNA gene mutation. Antimicrob Agents Chemother 49:2302-2306, 2005
7) Vester B, Douthwaite S:Macrolide resistance conferred by base substitutions in 23SrRNA. Antimicrob Agents Chemother 45:1-12, 2001
8) Douthwaite S, Hansen LH, Mauvais P:Macrolide-ketolide inhibition of MLS-resistant ribosomes is improved by alternative drug interaction with domain II of 23SrRNA. Mol Microbiol 36:183-193, 2000
9) Lucier TS, Heitzman K, Liu S-K, et al:Transition mutations in the 23S rRNA of erythromycin-resistant isolates of Mycoplasma pneumoniae. Antimicrob Agents Chemother 39:2770-2773, 1995
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