臨床検査52巻6号

2008年06月発行

今月の主題 エピジェネティクスと臨床検査 臨床検査への展開

エピジェネティクスと病理

著者： 北澤荘平¹ 近藤武史¹ 松田修一¹ 森淸¹ 北澤理子¹

所属機関： ¹神戸大学大学院医学系研究科病理学分野分子病理学研究室

ページ範囲：P.655 - P.661

　「病的なメチル化」として検査対象になるものは，遺伝子発現との関連性のある特異的な部位におけるメチル化の状態である．そのなかでも特にCpG-islandのhypermethylationは，p16などの癌抑制遺伝子の不活化に関与することが報告されている．一方，技術的な側面からは病理で最も汎用性の高いホルマリン固定・パラフィン包埋検体を用いる場合，微量のDNAから検討せざるを得ないため，メチル化特異的PCR法の操作を効率良く行う工夫が必要となる．ここではわれわれが改良したアガロースビーズ法の概要を紹介し，結果の解釈の仕方や応用例を含め解説する．

参考文献

１) Kitazawa R, Kitazawa S：Methylation status of a single CpG locus 3 bases upstream of TATA-box of receptor activator of nuclear factor-κB ligand(RANKL)gene promoter modulates cell-and tissue-specific RANKL expression and osteoclastogenesis. Mol Endocrinol　21：148-158, 2007

２) Kitazawa S, Kitazawa R, Maeda S：Identification of methylated cytosine from archival formalin-fixed parraffin-embedded specimens. Lab Invest　80：275-276, 2000

３) 吉田淳一，牛島俊和：2章エピジェネティクスとクロマチンの解析　1) DNAメチル化解析の技術-MSP法とbisulfite sequencing法，実験医学別冊　実験医学基礎から先端までのクロマチン・染色体実験プロトコール(押村光雄，平岡泰編)羊土社，2004