臨床検査60巻12号

2016年11月発行

今月の特集1 血液学検査を支える標準化

フローサイトメトリーによる白血球分類参照法

著者： 永井豊¹

所属機関： ¹日本光電工業株式会社

ページ範囲：P.1396 - P.1402

Point

●自動血球分析装置の白血球分類値を評価するための白血球分類の参照法は，従来の視算参照法では均一な塗抹標本が困難であり，少数比率細胞の精密性も低く，実用的といえるものではなかった．

●臨床・検査標準協会（CLSI）は精密度の高いフローサイトメトリー（FCM）法を将来の参照法（FCM参照法）と位置付けて複数の文献を提示したが，分類する白血球を確実に捉える抗体選択などの提案はしていない．

●CLSIの提案を受けて，国際血液学標準化協議会（ICSH）は国際臨床サイトメトリー学会（ICCS）と連携したプロジェクトを発足させ，分類する白血球を確実に捉える抗体選択によるFCM参照法（ICSH-Diff参照法）を提案したが，その目的は“自動血球分析装置を評価するための参照法”から“大規模スクリーニングを目的とした異常細胞も含む参照法”に変更された．

●日本検査血液学会（JSLH）は“自動血球分析装置を評価するための参照法”の検討を継続し，分類する白血球を確実に捉える抗体選択によるFCM参照法（JSLH-Diff参照法）を独自に確立してICSH-Diffを対照とした検証を終え，メーカーサーベイで有用性を実証するために試用する予定である．

参考文献

1）Palmer L, Briggs C, McFadden S, et al：ICSH recommendations for the standardization of nomenclature and grading of peripheral blood cell morphological features. Int J Lab Hematol　37：287-303，2015

2）Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)：Reference Leukocyte (WBC) Differential Count (Proportional) and Evaluation of Instrumental Methods；Approved Standard, 2nd ed. CLSI document H20-A2, CLSI, Wayne PA，2007

3）Roussel M, Davis BH, Fest T, et al：International Council for Standardization in Hematology (ICSH). Toward a reference method for leukocyte differential counts in blood: comparison of three flow cytometric candidate methods. Cytometry A　81：973-982，2012

4）Briggs C, Culp N, Davis B, et al：International Council for Standardization of Haematology. ICSH guidelines for the evaluation of blood cell analysers including those used for differential leucocyte and reticulocyte counting. Int J Lab Hematol　36：613-627，2014

5）Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)：Validation, Verification, and Quality Assurance of Automated Hematology Analyzers；Approved Standard, 2nd ed. CLSI document H26-A2, Wayne PA，2010

6）Nagai Y, Kondo H, Tatsumi N：A study on leukocyte classification method for low rate cells in peripheral blood using a flow cytometric analysis, 7th Asian Network for Clinical Laboratory Standardization and Harmonization Congress, Putrajaya, Malaysia, 62，2006

7）Nagai Y, Kondo H：Country Report (Japan) JSLH Activity - Cell surface antigen laboratory procedure by flow cytometry as the reference method of the white blood cell classification-, 11th Asian Network for Clinical Laboratory Standardization and Harmonization Congress, Jakarta, Indonesia，2010

8）Nagai Y：Update on the blood cell differential as reference method by flow cytometry. Cytometry Research　21：13-22，2011

9）Björnsson S, Wahlström S, Norström E, et al：Total nucleated cell differential for blood and bone marrow using a single tube in a five-color flow cytometer. Cytometry B Clin Cytom　74：91-103，2008

10）Roussel M, Benard C, Ly-Sunnaram B, et al：Refining the white blood cell differential: the first flow cytometry routine application. Cytometry A　77：552-563，2010

11）Faucher JL, Lacronique-Gazaille C, Frébet E, et al：“6 markers/5 colors” extended white blood cell differential by flow cytometry. Cytometry A　71：934-944，2007

12）近藤弘，永井豊，小川恵津子，他：フローサイトメトリーによる白血球分類のための日本検査血液学会参照法の検討．日検血会誌　17：169-181，2016

13）Kawai Y, Kondo H, Nagai Y, et al：Evaluation of hematological values obtained with reference automated hematology analyzers of six manufacturers (JSLH SURVEY). Int J Lab Hematol 34(Suppl.1)：94-95，2012. the 25th International Symposium on Technological Innovations in Laboratory Hematology, Nice, France

14）Japanese Society for Laboratory Hematology (JSLH)：Toward a reference method for leukocyte differential counts in blood for evaluation of automated hematology analyzers：Validation of flowcytometric JSLH Diff method and SOP, the 27th International Symposium on Technological Innovations in Laboratory Hematology, The Hague, Netherlands，2014