胃と腸31巻3号

1996年02月発行

特集 図説　形態用語の使い方・使われ方 第Ⅱ部　検査手技・所見等の用語 c．病理・病変用語

PCR法，PCR-SSCP法

著者： 落合淳志¹ 下田忠和²

所属機関： ¹国立がんセンター研究所病理部 ²国立がんセンター中央病院臨床検査部

ページ範囲：P.409 - P.409

　1．PCR法（polymerase chain reaction；ポリメラーゼ連鎖反応）

　特定のDNA領域を挟んだ2種類のプライマーと基質ヌクレオチドおよび耐熱性DNA合成酵素（DNAポリメラーゼ）を用いて試験管内でDNAの合成反応を繰り返し行うことにより，微量の試料からその特定のDNA領域を増幅して取り出す方法．増幅したいDNA領域の両端に相補的なオリゴヌクレオチドを合成してプライマーとする．鋳型DNAは通常2本鎖であり，これを熱変性して1本鎖化し，プライマーを結合させた後DNAポリメラーゼにより相補的なDNA鎖の合成を行う．この1サイクルによりDNA領域のコピー数が原理的に2倍になり，これを繰り返すことにより目的のDNA領域を数十万倍に増幅し取り出すことが可能となる．

　PCR法は1985年にSaikiらにより開発され，その原法ではKlenow酵素が用いられたが，その後，高度好熱菌から分離された耐熱性DNA合成酵素Taqポリメラーゼの導入と，1987年にはPCR自動化装置サーマルサイクラーの開発が進み，飛躍的にその利用が広まった．