耳鼻咽喉科・頭頸部外科85巻1号

2013年01月発行

Current Article

組織再生工学を応用した中耳疾患の病態解明

著者： 田中康広¹

所属機関： ¹獨協医科大学越谷病院耳鼻咽喉科学教室

ページ範囲：P.10 - P.18

はじめに

　真珠腫性中耳炎や癒着性中耳炎をはじめとする慢性炎症を伴う中耳疾患に関する研究は，これまで動物実験もしくは摘出標本からの免疫組織学的検討によるものがほとんどであった。一方，培養細胞を用いたin vitroでの研究は文献として報告されたものが少なく，現在まで発症機序や成因については明らかにされていない。その原因のひとつとしてin vitroにおいては培養細胞を用いた研究が主体となるが，最近まで三次元的に培養細胞を用いて組織構築を行うことが困難であり，真珠腫性中耳炎や癒着性中耳炎のモデル作製には限界があったことが挙げられる。近年，air-liquid interface methodを用いた培養法によって三次元的に立体構築させる細胞培養が開発され，細胞を気相に触れさせることにより細胞の分化を誘導させることが可能となった。さらに，温度応答性培養皿の出現により，組織構築された培養細胞シートを細胞自体にダメージを与えることなく回収することが可能となり，病変部位への移植についても検討されている。このことは新しく組織構築された培養細胞を用いて，in vitroだけではなくin vivoでの研究にも応用できる可能性を示唆している。

　本稿では，これまでにわれわれが行ってきたair-liquid interface methodによる三次元培養皮膚を用いた実験的真珠腫モデルの作製を中心とし，温度応答性培養皿を利用した癒着性中耳炎治療への可能性などについても触れてゆく。

参考文献

1）Choi JY, et al：Retinoic acid depletion induces keratinizing squamous differentiation in human middle ear epithelial cell cultures. Acta Otolaryngol 123：466-470, 2003

2）Moon SK, et al：Effects of retinoic acid, triiodothyronine and hydrocortisone on mucin and lysozyme expression in cultured human middle ear epithelial cells. Acta Otolaryngol 120：944-949, 2000

3）Albers-op t'Hof BM, et al：Air-exposed tissue culture of human middle ear epithelium and meatal epidermis：a method to study the advancing front of cholesteatoma. Acta Otolaryngol 122：720-725, 2002

4）Soldati D, et al：Knowledge about cholesteatoma, from the first description to the modern histopathology. Otol Neurotol 22：723-730, 2001

. Proc Natl Acad Sci USA 76：1274-1278, 1979

6）Bell E, et al：The reconstitution of living skin. J Invest Dermatol 81（1 Suppl）：2s-10s, 1983

7）Pruniéras M, et al：Methods for cultivation of keratinocytes with an air-liquid interface. J Invest Dermatol 81（1 Suppl）：28s-33s, 1983

8）Amano S, et al：Importance of balance between extracellular matrix synthesis and degradation in basement membrane formation. Exp Cell Res 271：249-262, 2001

9）Blais M, et al：Improvement of nerve regeneration in tissue-engineered skin enriched with schwann cells. J Invest Dermatol 129：2895-2900, 2009

10）Boyce ST, et al：Assessment of replication rates of human keratinocytes in engineered skin substitutes grafted to athymic mice. Wound Repair Regen 20：544-551, 2012

11）Larouche D, et al：Tissue-engineered skin preserving the potential of epithelial cells to differentiate into hair after grafting. Tissue Eng Part A 17：819-830, 2011

12）Tanaka Y, et al：A study on epidermal proliferation ability in cholesteatoma. Laryngoscope 108：537-542, 1998

13）Miyazaki H, et al：Terminal differentiation of epithelial cells in middle ear cholesteatoma：investigation of patterns of expression of protein kinase C-delta and protein kinase C-eta. Laryngoscope 109：1785-1792, 1999

14）El Ghalbzouri A, et al：Crucial role of fibroblasts in regulating epidermal morphogenesis. Cell Tissue Res 310：189-199, 2002

15）Rendl M, et al：Caspase-14 expression by epidermal keratinocytes is regulated by retinoids in a differentiation-associated manner. J Invest Dermatol 119：1150-1155, 2002

16）Yi JY, et al：Reconstruction of basement membrane in skin equivalent：role of laminin-1. Arch Dermatol Res 293：356-362, 2001

? Eur Arch Otorhinolaryngol 258：472-476, 2001

18）Banerjee AR, et al：Localization of matrix metalloproteinase 1 in cholesteatoma and deep meatal skin. Otol Neurotol 22：579-581, 2009

19）Suchozebrska-Jesionek D, et al：Gelatinolytic activity of matrix metalloproteinases 2 and 9 in middle ear cholesteatoma. J Otolaryngol Head Neck Surg 37：628-632, 2008