臨床検査60巻13号

2016年12月発行

今月の特集2 がん分子標的治療にかかわる臨床検査・遺伝子検査

大腸がんの分子標的薬と分子病理検査の役割

著者： 郡司昌治¹

所属機関： ¹名古屋第一赤十字病院細胞診・分子病理診断部

ページ範囲：P.1564 - P.1570

Point

●長時間のホルマリン固定ではDNAの断片化が進む．中性緩衝液ホルマリンを用いると，核酸の品質を損なうと考えられているホルマリン分解産物の産生が抑えられる．

●DNA抽出は酵素処理で組織を完全に溶解する．酵素処理はホルマリンクロスリンクされた核酸-蛋白質から蛋白質の分解を行い，核酸の可溶化に作用する．熱処理にはメチレン架橋の解離の作用がある．

●組織切片は，連続切片を作製することによって腫瘍分布や腫瘍細胞比率が把握できる．しかし，細胞診スメアは染色して腫瘍細胞の有無や腫瘍細胞比率を確認したうえでDNAを抽出する必要がある．

●染色標本の遺伝子解析は可能であり，腫瘍分布や腫瘍細胞比率が把握できるため，非常に有用な手法である．

参考文献

1）厚生労働省：人口動態統計（http://www.mhlw.go.jp/toukei/list/81-1.html）

2）Hori M, Matsuda T, Shibata A, et al：Cancer incidence and incidence rates in Japan in 2009: a study of 32 population-based cancer registries for the Monitoring of Cancer Incidence in Japan (MCIJ) project. Jpn J Clin Oncol　45：884-891，2015

3）Gschwind A, Fischer OM, Ullrich A：The discovery of receptor tyrosine kinases: targets for cancer therapy. Nat Rev Cancer　4：361-370，2004

4）Spano JP, Lagorce C, Atlan D, et al：Impact of EGFR expression on colorectal cancer patient prognosis and survival. Ann Oncol　16：102-108，2005

5）Cunningham D, Humblet Y, Siena S, et al：Cetuximab monotherapy and cetuximab plus irinotecan in irinotecan-refractory metastatic colorectal cancer. N Engl J Med　351：337-345，2004

6）Van Cutsem E, Peeters M, Siena S, et al：Open-label phase III trial of panitumumab plus best supportive care compared with best supportive care alone in patients with chemotherapy-refractory metastatic colorectal cancer. J Clin Oncol　25：1658-1664，2007

7）Schwartzberg LS, Rivera F, Karthaus M, et al：PEAK: a randomized, multicenter phase II study of panitumumab plus modified fluorouracil, leucovorin, and oxaliplatin (mFOLFOX6) or bevacizumab plus mFOLFOX6 in patients with previously untreated, unresectable, wild-type KRAS exon 2 metastatic colorectal cancer. J Clin Oncol　32：2240-2247，2014

8）Heinemann V, von Weikersthal LF, Decker T, et al：FOLFIRI plus cetuximab versus FOLFIRI plus bevacizumab as first-line treatment for patients with metastatic colorectal cancer (FIRE-3): a randomised, open-label, phase 3 trial. Lancet Oncol　15：1065-1075，2014

9）日本臨床腫瘍学会：大腸がん患者におけるRAS遺伝子（KRAS/NRAS遺伝子）変異の測定に関するガイダンス　第2版，2014（http://www.jsmo.or.jp/about/doc/RAS_guidance_coi.pdf）

10）株式会社Qiagen：病理組織切片の解析　FFPEサンプルの分子解析における重要なファクター，2011（https://www.qiagen.com/jp/resources/download.aspx?id=5e78ce80-c784-415f-b79d-f70025e34b3e＆lang=ja-JP）

11）Ogino S, Kawasaki T, Brahmandam M, et al：Sensitive sequencing method for KRAS mutation detection by Pyrosequencing. J Mol Diagn　7：413-421，2005

12）Jänne PA, Borras AM, Kuang Y, et al：A rapid and sensitive enzymatic method for epidermal growth factor receptor mutation screening. Clin Cancer Res　12：751-758，2006

13）Li M, Diehl F, Dressman D, et al：BEAMing up for detection and quantification of rare sequence variants. Nat Methods　3：95-97，2006

14）池田聡，若井進，郡司昌治：検査材料別に見たEGFR遺伝子変異の頻度．日染色体遺伝子検会誌　32：43，2014

DNA FFPE Tissueプロトコールとトラブルシューティング　ホルマリン固定，パラフィン包埋した（FFPE）組織切片からのゲノムDNA精製，2010（https://www.qiagen.com/jp/resources/download.aspx?id=1c7ca996-88e5-4ca3-bb04-cfa755372b80＆lang=ja-JP）