結核菌群リファンピシン耐性遺伝子検出　　[保] 850点

基準値　結核菌群であり，rpoB遺伝子に変異ありの結果が得られた場合にリファンピシン(RFP)耐性結核菌と判定される

測定法

・Line Probe法(ジェノスカラー・RFP-TBⅡ)を用いて測定する

・RFPの抗菌活性の作用機序はRNAポリメラーゼのβサブユニットに結合することによるRNA合成阻害である．その耐性機序は，RNAポリメラーゼのrpoBの点変異であり，RFP耐性との間に強い相関があることが確認されている．本法は喀痰または分離培養で得られた菌から核酸抽出を行い，PCR反応にてrpoB内の一部の領域(core region)を増幅させ，その領域に変異があるかどうか検出する．検出は，ビオチン化増幅DNAを10種類のプローブが固定化されたストリップとハイブリダイゼーション反応させ，さらに酵素標識ストレプトアビジン系で発色反応させて行う．そして，ストリップ上で発色したプローブの本数および位置