診療支援
治療

一般細菌の検出と培養法
Isolation and culture of common bacteria
山﨑 修
(島根大学教授)

【概説】皮膚の一般細菌感染症は,診断できれば起炎菌もある程度は推定でき,経験的治療を開始することができる.診断・治療の再評価や修正をするためには,細菌培養は必須である.一般細菌培養検査は,検体の採取から塗抹標本を作製し形態学的に観察,培養検査から菌を同定し,薬剤感受性検査を行う(図2-1).流れは今日も同様だが,同定は機器により自動化されている.


検査の進め方

1.検体の採取

 臨床細菌検査で最も重要なことは,感染が疑われる部位からの検体採取とその取り扱いである.正しい検体採取が,後日判明する結果によって診断の確認や治療の修正につながる.原則,抗菌薬の投与前に,常在菌や消毒薬の混入を避けて,滅菌容器や輸送培地に採取する.慢性の場合は繰り返し培養を行う.膿瘍などの非開放病変ではポビドンヨードやアルコールで皮膚を消毒し,注射器で吸引する.針を交換し,輸送培地に注入する.びらん面や開放病変の膿や滲出液は,病変の周辺だけをアルコール綿で消毒し,検体を採取する.

2.グラム染色

 膿汁,分泌物は綿棒で直接スライドガラスに薄く塗抹する.検体が濃いときには水道水を1滴滴下し検体を薄める.自然乾燥し,火炎固定する.グラム染色にはHuckerの変法や西岡の方法などがある.鏡検はまず弱拡大レンズで観察し,拡大を上げ,1,000倍の油浸レンズで観察する.紫に染まるものがグラム陽性菌で,赤に染まるものがグラム陰性菌である.グラム陽性菌は細胞壁のペプチドグリカン層が厚く,青や紫色が脱色されにくい.また形態により球菌,桿菌に分け,ブドウ状,レンサ状,双球菌などの配列も観察することができる.上皮細胞の有無,炎症細胞の有無,細菌の貪食像を観察する.多核白血球に貪食された細菌が起炎菌の可能性が高い.

3.同定検査

 好気性・嫌気性発育やグラム染色所見と炭水化物・アミノ酸分解試験,呼吸酸素に関する試験,菌体外毒素の産生試

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